Effect of Qiyu Sanlong Decoction in Inducing Autophagy of A549 Cells by Regulating Molecular Expression Related to Signal Axis of mTOR-Beclin1-LC3

Ya-ting GAO; Xin-heng WANG; Xiao-le WANG; Jian-chao CHENG; Xing-xing ZHANG; Jia-bing TONG; Ze-geng LI

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20202225

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

Effect of Qiyu Sanlong Decoction in Inducing Autophagy of A549 Cells by Regulating Molecular Expression Related to Signal Axis of mTOR-Beclin1-LC3

更新时间：2021-12-03

- Effect of Qiyu Sanlong Decoction in Inducing Autophagy of A549 Cells by Regulating Molecular Expression Related to Signal Axis of mTOR-Beclin1-LC3
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 27, Issue 1, Pages: 98-104(2021)
- 作者机构：
  
  1.安徽中医药大学研究生院，合肥 230038
  2.安徽省中医药科学院中医呼吸病防治研究所，合肥 230031
  3.安徽省教育厅重点实验室中医药防治肺系重大疾病重点实验室，合肥 230031
  4.安徽中医药大学第一附属医院，合肥 230031
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20202225
  CLC： R22;R242;R2-031;R285.5
- Received：12 May 2020，
  
  Published Online：03 September 2020，
  
  Published：05 January 2021
- 稿件说明：
移动端阅览
高雅婷,王心恒,王小乐等.芪玉三龙汤调节mTOR/Beclin1/LC3信号轴相关分子的表达诱导肺癌A549细胞自噬[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(01):98-104.

GAO Ya-ting,WANG Xin-heng,WANG Xiao-le,et al.Effect of Qiyu Sanlong Decoction in Inducing Autophagy of A549 Cells by Regulating Molecular Expression Related to Signal Axis of mTOR-Beclin1-LC3[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(01):98-104.
高雅婷,王心恒,王小乐等.芪玉三龙汤调节mTOR/Beclin1/LC3信号轴相关分子的表达诱导肺癌A549细胞自噬[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(01):98-104. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20202225.

GAO Ya-ting,WANG Xin-heng,WANG Xiao-le,et al.Effect of Qiyu Sanlong Decoction in Inducing Autophagy of A549 Cells by Regulating Molecular Expression Related to Signal Axis of mTOR-Beclin1-LC3[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(01):98-104. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20202225.

摘要

目的

从细胞水平探讨芪玉三龙汤干预肺癌A549细胞对哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）/自噬关键分子酵母Atg6同系物（Beclin1）/微管相关蛋白1轻链3（LC3）信号轴关键分子表达的影响。

方法

选择肺癌人A549细胞作为研究对象，采用细胞增殖检测试剂盒（CCK-8）法检测芪玉三龙汤含药血清对A549细胞活性的影响；原位末端标记法（TUNEL），透射电镜（TEM）及实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR），蛋白免疫印迹法（WB）分别检测芪玉三龙汤对A549细胞凋亡、自噬体形成及自噬标记分子表达的影响。

结果

芪玉三龙汤血清能以浓度依赖性的方式抑制细胞活性；与空白血清组比较，芪玉三龙汤血清组A549细胞的凋亡数量显著增多（

0.01），自噬体形成增加；与空白血清组比较，芪玉三龙汤血清组A549细胞的mTOR mRNA和蛋白表达显著降低（

0.01），Beclin1，自噬相关基因5（Atg5），自噬相关基因13（Atg13） mRNA和蛋白表达水平均显著升高（

0.01）。

结论

芪玉三龙汤能够诱导肺癌A549细胞发生自噬，其具体作用机制可能与其下调mTOR的表达，上调Beclin1，Atg5，Atg13，LC3的表达，促进LC3Ⅰ转化为LC3Ⅱ有关。

Abstract

Objective

To observe the effect of Qiyu Sanlong decoction （QYSL） on the expressions of key molecules in signal axis of mammalian rapamycin target protein （mTOR）/yeast Atg6 homologous （Beclin1）/ microtubule-associated protein1 light chain3 （LC3） in A549 cells.

Method

With A549 cells as the research object， the effect of QYSL medicated serum on cell viability of A549 cells were detected by cell counting kit-8 （CCK-8） method. The effect of QYSL decoction on A549 cell apoptosis， autophagosome formation and the expression of autophagy markers were detected by Terminal-deoxynucleoitidyl transferase mediated nick end labeling （TUNEL） method， transmission electron microscope （TEM）， Real-time polymerase chain reaction （Real-time PCR） and Western blot.

Result

QYSL medicated serum could inhibit the viability of A549 cells in a concentration-dependent manner. Compared with the blank serum group， the number of apoptotic A549 cells in the QYSL medicated serum group was significantly increased （

0.01）， and the formation of autophagosome was significantly increased. Compared with the blank serum group， the mRNA and protein expressions of mTOR in A549 cells in the QYSL serum group were significantly decreased （

0.01）， while mRNA and protein expressions of Beclin-1， autophagy related genes 5 （ATG5）， autophagy related genes 13 （ATG13） were significantly increased （

0.01）.

Conclusion

QYSL decoction can induce autophagy in A549 cells， and its specific mechanism may be related to the down-regulation of mTOR expression， the up-regulation of Beclin1， ATG5， ATG13 and LC3 expression， and the promotion of LC3Ⅰ conversion to LC3Ⅱ.

关键词

Keywords

references

MPH L S R ， MPH D M K ， PHD J D A . Cancer statistics， 2020 ［J］. CA Cancer J Clin ， 2020 ， 70 （ 1 ）： 7 - 30 .

Nsclc Meta-Analysis Collaborative Group . Preoperative chemotherapy for non-small-cell lung cancer： a systematic review and Meta-analysis of individual participant data ［J］. Lancet ， 2014 ， 383 （ 9928 ）： 1561 - 1571 .

YANG J ， ZHU X ， YUAN P ， et al . Efficacy of traditional Chinese medicine combined with chemotherapy in patients with non-small cell lung cancer （NSCLC）： a Meta-analysis of randomized clinical trials ［J］. Support Care Cancer ， 2020 ， 28 （ 4 ）： 3571 - 3579 .

TONG J B ， ZHANG X X ， WANG X H ， et al . Qiyu Sanlong decoction suppresses lung cancer in mice via Wnt/ β -catenin pathway ［J］. Mol Med Rep ， 2018 ， 17 （ 4 ）： 5320 - 5327 .

童佳兵，高雅婷，范春雷，等 . 芪玉三龙汤治疗中晚期非小细胞肺癌临床观察［J］. 新中医， 2018 ， 50 （ 4 ）： 146 - 150 .

张星星，童佳兵，杨程，等 . 芪玉三龙汤对肺癌移植瘤小鼠PI3K/Akt/mTOR通路PI3K、Akt、mTOR表达的影响［J］. 安徽中医药大学学报， 2016 ， 35 （ 1 ）： 73 - 77 .

NOMAN M Z ， BERCHEM G ， JANJI B . Targeting autophagy blocks melanoma growth by bringing natural killer cells to the tumor battlefield ［J］. Autophagy ， 2018 ， 14 （ 4 ）： 730 - 732 .

黄继汉，黄晓晖，陈志扬，等 . 药理试验中动物间和动物与人体间的等效剂量换算［J］. 中国临床药理学与治疗学， 2004 （ 9 ）： 1069 - 1072 .

彭波，李泽庚，孙志广 . 肺气虚证的认识及内涵［J］. 辽宁中医药大学学报， 2008 ， 10 （ 8 ）： 36 - 38 .

陈滨海，张光霁 . 肺癌的“痰毒瘀”微观模型初探［J］. 中华中医药杂志， 2019 ， 34 （ 1 ）： 50 - 54 .

程建超，张星星，童佳兵，等 . 芪玉三龙汤对肺癌小鼠肿瘤组织TLR4/MyD88/NF- κ B通路分子表达的影响［J］. 中药药理与临床， 2019 ， 35 （ 5 ）： 101 - 106 .

NAKAMURA S ， YOSHIMORI T . Autophagy and longevity ［J］. Mol Cells ， 2018 ， 41 （ 1 ）： 65 - 72 .

YU J J ， ZHOU D D ， CUI B ， et al . Disruption of the EGFR-SQSTM1 interaction by a stapled peptide suppresses lung cancer via activating autophagy and inhibiting EGFR signaling ［J］. Cancer Lett ， 2020 ， 474 ： 23 - 35 .

MARSH T ， DEBNATH J . Autophagy suppresses breast cancer metastasis by degrading NBR1 ［J］. Autophagy ， 2020 ， 16 （ 6 ）： 1164 - 1165 .

CHEN Y ， CHEN Y ， ZHANG J ， et al . Fusobacterium nucleatum promotes metastasis in colorectal cancer by activating autophagy signaling via the upregulation of CARD3 expression ［J］. Theranostics ， 2020 ， 10 （ 1 ）： 323 - 339 .

GAN X ， ZHU H ， JIANG X ， et al . CircMUC16 promotes autophagy of epithelial ovarian cancer via interaction with Atg13 and miR-199a ［J］. Mol Cancer ， 2020 ， 19 （ 2 ）： 69 - 90 .

SANTANA-CODINA N ， MANCIAS J D ， KIMMELMAN A C . The role of autophagy in cancer ［J］. Annu Rev Cancer Biol ， 2017 ， 1 ： 19 - 39 .

LI L ， LIU W L ， SU L ， et al . The role of autophagy in cancer radiotherapy ［J］. Curr Mol Pharmacol ， 2020 ， 13 （ 1 ）： 31 - 40 .

GLICK D ， BARTH S ， MACLEOD K F . Autophagy： cellular and molecular mechanisms ［J］. J Pathol ， 2010 ， 221 （ 1 ）： 3 - 12 .

YU L ， CHEN Y ， TOOZE S A . Autophagy pathway： cellular and molecular mechanisms ［J］. Autophagy ， 2018 ， 14 （ 2 ）： 207 - 215 .

UGOLINO J ， JI Y J ， CONCHINA K ， et al . Loss of C9orf72 enhances autophagic activity via deregulated mTOR and TFEB signaling ［J］. PLoS Genet ， 2016 ， 12 （ 11 ）： e1006443 .

JUNG C H ， JUN C B ， RO S H ， et al . ULK-Atg13-FIP200 complexes mediate mTOR signaling to the autophagy machinery ［J］. Mol Biol Cell ， 2009 ， 20 （ 7 ）： 1992 - 2003 .

周立江 . 肺积宁方对Lewis肺癌抗肿瘤作用及自噬效应的实验研究［D］. 沈阳：辽宁中医药大学， 2016 .

KUMA A ， MATSUI M ， MIZUSHIMA N . LC3， an autophagosome marker， can be incorporated into protein aggregates independent of autophagy： caution in the interpretation of LC3 localization ［J］. Autophagy ， 2007 ， 3 （ 4 ）： 323 - 328 .

LI W ， ZOU W ， YANG Y ， et al . Autophagy genes function sequentially to promote apoptotic cell corpse degradation in the engulfing cell ［J］. J Cell Biol ， 2012 ， 197 （ 1 ）： 27 - 35 .

BU T ， WANG C ， JIN H ， et al . Organic anion transporters and PI3K-Akt-mTOR pathway mediate the synergistic anticancer effect of pemetrexed and rhein ［J］. J Cell Physiol ， 2020 ， 235 （ 4 ）： 3309 - 3319 .

Views

下载量

CSCD

Alert me when the article has been cited

提交

Tools

Publicity Resources

Mechanism of Traditional Chinese Medicine Regulating JAK/STAT Signaling Pathway to Intervene in Lung Cancer： A Review

Bioinformatics Reveals Mechanism of Xiezhuo Jiedu Precription in Treatment of Ulcerative Colitis by Regulating Autophagy

Effect of Gandou Fumu Decoction on Autophagy in Mice with Liver Fibrosis in Wilson's Disease by Regulating Expression of miR-29b-3p/ULK1

Bushen Jianpi Prescription Regulates Autophagy in Patients with Aplastic Anemia

Effect of Stemona tuberosa Alkaloids on Apoptosis and PI3K/Akt and JNK/MAPK Signaling Pathways of Human Lung Cancer A549 Cells

Related Author

CAO Jiarui

FENG Bo

MA Chunzheng

CHEN Weixia

YU Jiangfan

CAO Shasha

ZHANG Zhenyu

OUYANG Wenhui

Related Institution

Henan Province Hospital of Traditional Chinese Medicine/The Second Affiliated Hospital of Henan University of Chinese Medicine

The Second Clinical Medical College， Henan University of Chinese Medicine

Handan Hospital of TCM

Hebei Key Laboratory of Turbidity Toxin Syndrome

Hebei Key Laboratory of Gastroenterology Research of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine

AI问答

Postal code：100700
Tel：010-84076882 Email：syfjx_2010@188.com
Technical support is provided by Beijing Founder electronics co., LTD 京ICP备11006657号-10 京公网安备11010802024621
It is recommended to read the content of this site in Chrome&IE9+. Please switch to extreme mode in browser 360.
Cookies We use cookies to help provide and enhance our service and tailor content. By continuing, you agree to the use of cookies.

⁰