Establishment of UPLC Fingerprint and Quantitative Analysis of Multi-components of Shengyutang

Yu-qing ZHANG; An WU; Ting ZOU; Zhi-feng ZHAO; Shao-hua XIAN; Yu XIANG; Xu-guang HU

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20202358

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Establishment of UPLC Fingerprint and Quantitative Analysis of Multi-components of Shengyutang

Classic Prescriptions | 更新时间：2021-03-29

- Establishment of UPLC Fingerprint and Quantitative Analysis of Multi-components of Shengyutang
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 27, Issue 8, Pages: 8-16(2021)
- 作者机构：
  
  1.广东药科大学中药学院，广州 510006
  2.国药集团德众（佛山）药业有限公司，广东佛山 528000
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20202358
  CLC： R22;R289;R917;R28;O657.7
- Received：09 September 2020，
  
  Published Online：20 October 2020，
  
  Published：20 April 2021
- 稿件说明：
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张誉晴,吴安,邹婷等.经典名方圣愈汤的UPLC指纹图谱建立及多成分定量分析[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(08):8-16.

ZHANG Yu-qing,WU An,ZOU Ting,et al.Establishment of UPLC Fingerprint and Quantitative Analysis of Multi-components of Shengyutang[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(08):8-16.
张誉晴,吴安,邹婷等.经典名方圣愈汤的UPLC指纹图谱建立及多成分定量分析[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(08):8-16. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20202358.

ZHANG Yu-qing,WU An,ZOU Ting,et al.Establishment of UPLC Fingerprint and Quantitative Analysis of Multi-components of Shengyutang[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(08):8-16. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20202358.

摘要

目的

建立圣愈汤的超高效液相色谱法（UPLC）指纹图谱及其11个成分的定量分析方法。

方法

采用UPLC-二极管阵列检测器（PDA）/蒸发光散射检测器（ELSD），根据化学成分极性不同使用不同的检测器，建立2种色谱条件，指纹图谱1选择ACQUITY UPLC HSS T

色谱柱（2.1 mm×100 mm，1.8 µm），流动相乙腈（A）-0.6%甲酸水溶液（C）梯度洗脱（0~4 min，0~4%A； 4~8 min，4%A；8~9 min，4%~8%A；9~14 min，8%~9%A；14~21 min，9%~15%A；21~26 min，15%~17%A；26~30 min，17%~20%A；30~35 min，20%~32%A；35~40 min，32%~40%A；40~50 min，40%~80%A；50~55 min，80%A），柱温30 ℃，PDA流速设定0.3 mL·min

-1

，检测波长280 nm和321 nm；指纹图谱2选择CORTECS C

色谱柱（3.0 mm×100 mm，2.7 µm），流动相乙腈（A）-水（D）梯度洗脱（0~11 min，19%A；11~16 min，19%~25%A；16~34 min，25%~28%A；34~47 min，28%~47%A；47~60 min，47%~80%A），流速0.4 mL·min

-1

，ELSD，漂移管温度95 ℃，载气流量2.0 L·min

-1

，柱温30 ℃；建立15 批圣愈汤的UPLC-PDA/ELSD指纹图谱，采用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”（2012版）进行相似度评价，并对11种指标性成分进行定量分析。

结果

15批圣愈汤的UPLC-PDA/ELSD指纹图谱与对照图谱的相似度均

0.98，指纹图谱1和2的共有峰分别为27，16个，2种色谱方法的精密度、重复性、稳定性、线性关系、加样回收率结果均符合2020年版《中华人民共和国药典》（简称《中国药典》）的方法学要求。15批圣愈汤中绿原酸，阿魏酸，毛蕊异黄酮葡萄糖苷，毛蕊花糖苷，洋川芎内酯I，洋川芎内酯H，洋川芎内酯A，人参皂苷Rg

，人参皂苷Re，人参皂苷Rb

，黄芪甲苷的质量分数范围分别为0.063~0.193，0.509~0.638，0.160~0.318，0.012~0.056，0.394~0.519，0.110~0.143，0.031~0.097，0.382~0.595，0.292~0.505，0.590~0.803，0.142~0.367 mg·g

-1

。

结论

建立的检测方法符合2020年版《中国药典》的要求，可表征圣愈汤中化学成分的整体特征，可为该经典名方的质量标准研究提供实验依据。

Abstract

Objective

To establish ultra performance liquid chromatography （UPLC） fingerprint of Shengyutang and quantitative analysis method of 11 index components in this famous classical formula.

Method

UPLC-diode array detector/evaporative light scattering detector （UPLC-PDA/ELSD） was used， two chromatographic conditions were established by different detectors according to the polarity of chemical components. Conditions of fingerprint 1 were as follows：ACQUITY UPLC HSS T

column （2.1 mm×100 mm， 1.8 µm） with the mobile phase of acetonitrile （A）-0.6% formic acid solution （C） for gradient elution （0-4 min， 0-4%A； 4-8 min， 4%A； 8-9 min， 4%-8%A； 9-14 min， 8%-9%A； 14-21 min， 9%-15%A； 21-26 min， 15%-17%A； 26-30 min， 17%-20%A； 30-35 min， 20%-32%A； 35-40 min， 32%-40%A； 40-50 min， 40%-80%A； 50-55 min， 80%A）， the flow rate of 0.3 mL·min

-1

， PDA with detection wavelengths of 280 nm and 321 nm， the column temperature at 30 ℃. Conditions of fingerprint 2 were as follows：the CORTECS C

column （3.0 mm×100 mm， 2.7 µm） with the mobile phase of acetonitrile （A）-water （D） for gradient elution （0-11 min， 19%A； 11-16 min， 19%-25%A； 16-34 min， 25%-28%A； 34-47 min， 28%-47%A； 47-60 min， 47%-80%A）， the flow rate of 0.4 mL·min

-1

， ELSD with drift tube temperature of 95 ℃， the carrier gas （air） flow rate of 2.0 L·min

-1

， and the column temperature at 30 ℃. UPLC-PDA/ELSD fingerprints of 15 batches of Shengyutang were established， and the similarity was evaluated by similarity evaluation system of chromatographic fingerprint of traditional Chinese medicine （2012 edition） issued by the Chinese Pharmacopoeia Commission， and the contents of eleven index components in this famous classical formula were determined.

Result

The similarities of UPLC-PDA/ELSD fingerprints of 15 batches of Shengyutang were

0.98 by comparing with the control fingerprint， 27 and 16 common peaks were identified in fingerprint 1， 2， respectively. It was tested and verified that the precision， repeatability， stability， linear relationship and other results of this method all met the requirements of the 2020 edition of

Chinese Pharmacopoeia

. The contents of chlorogenic acid， ferulic acid， calycosin glucoside， verbascoside， senkyunolide I， senkyunolide H， senkyunolide A， ginsenoside Rg

， ginsenoside Re， ginsenoside Rb

and astragaloside A in 15 batches of Shengyutang were 0.063-0.193， 0.509-0.638， 0.160-0.318， 0.012-0.056， 0.394-0.519， 0.110-0.143， 0.031-0.097， 0.382-0.595， 0.292-0.505， 0.590-0.803， 0.142-0.367 mg·g

-1

， respectively.

Conclusion

The established detection method meets the requirements of the 2020 edition of

Chinese Pharmacopoeia

， which can characterize the overall characteristics of chemical components in Shengyutang， and provide experimental basis for the quality standard research of this famous classical formula.

关键词

Keywords

references

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