Effect of Triptonide on Proliferation and Apoptosis of SHI-1 Cells

Hui-jie LI; Kun HONG; Xiao-qiang LI; Li LIU; Yu-qing TAN

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20210323

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Effect of Triptonide on Proliferation and Apoptosis of SHI-1 Cells

Pharmacology | 更新时间：2021-02-09

- Effect of Triptonide on Proliferation and Apoptosis of SHI-1 Cells
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 27, Issue 3, Pages: 72-77(2021)
- 作者机构：
  
  中国中医科学院中药研究所，北京 100700
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20210323
  CLC： R22;R242;R2-031;R285.5
- Received：22 October 2020，
  
  Published Online：01 December 2020，
  
  Published：05 February 2021
- 稿件说明：
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李慧杰,洪坤,李晓强等.雷公藤内酯酮对SHI-1细胞增殖及凋亡的影响[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(03):72-77.

LI Hui-jie,HONG Kun,LI Xiao-qiang,et al.Effect of Triptonide on Proliferation and Apoptosis of SHI-1 Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(03):72-77.
李慧杰,洪坤,李晓强等.雷公藤内酯酮对SHI-1细胞增殖及凋亡的影响[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(03):72-77. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20210323.

LI Hui-jie,HONG Kun,LI Xiao-qiang,et al.Effect of Triptonide on Proliferation and Apoptosis of SHI-1 Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(03):72-77. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20210323.

摘要

目的

探讨雷公藤内酯酮（TN）对人急性单核细胞白血病（AML）细胞株SHI-1细胞增殖、周期、凋亡以及凋亡相关蛋白表达水平的影响，并探究其可能的作用机制。

方法

采用噻唑蓝（MTT）比色法检测20，40，80，160，320 nmol·L

-1

的雷公藤内酯酮作用SHI-1细胞48，72 h对细胞增殖的抑制作用，流式细胞术碘化丙啶（PI）单染法检测雷公藤内酯酮作用前后SHI-1细胞周期的变化，流式细胞术AnnexinV/PI双染法检测雷公藤内酯酮作用前后SHI-1细胞凋亡的变化，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测80，160 nmol·L

-1

雷公藤内酯酮作用于SHI-1细胞前后半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3），半胱氨酸蛋白酶-8（Caspase-8）和核转录因子-

B（NF-

B）的蛋白表达。

结果

分别作用48，72 h，与空白组比较，40，80，160，320 nmol·L

-1

雷公藤内酯酮对SHI-1细胞增殖均具有显著抑制作用（

0.01），且具有剂量依赖性；雷公藤内酯酮160，320 nmol·L

-1

可诱导SHI-1细胞凋亡（

0.01），并且雷公藤内酯酮160 nmol·L

-1

可使SHI-1细胞S期比例降低（

0.01）。此外，与空白组比较，雷公藤内酯酮80，160 nmol·L

-1

组NF-

B蛋白表达水平显著下调（

0.05，

0.01），雷公藤内酯酮160 nmol·L

-1

组Caspase-3，Caspase-8蛋白表达水平显著下调（

0.01）。

结论

雷公藤内酯酮可以体外抑制SHI-1细胞增殖并诱导其凋亡，其作用机制可能与雷公藤内酯酮降低SHI-1细胞S期比例，下调Caspase-3，Caspase-8以及NF-

B的蛋白表达水平有关。

Abstract

Objective

This study aims to investigate the effect of triptonide （TN） on proliferation， cell cycle， apoptosis and expressions of apoptosis-related proteins of human acute monocytic leukemia（AML） cell line SHI-1， and to explore its possible mechanism of action.

Method

The thiazolyl blue （MTT） colorimetric assay was applied to detect the inhibitory effect of 20，40，80，160，320 nmol·L

-1

triptonide on the proliferation of SHI-1 cells for 48， 72 h. Changes in SHI-1 cell cycle before and after triptonide treatment were detected by flow cytometry propidium iodide （PI） simple staining， and changes in SHI-1 cell apoptosis before and after triptonide treatment were detected by flow cytometry with AnnexinV/PI double staining. Western blot was applied to detect the protein expression of cysteine protease （Caspase）-3， Caspase-8 and nuclear transcription factor kappaB（NF-

B） in SHI-1 cells before and after treatment with 80， 160 nmol·L

-1

triptonide.

Result

Compared with the blank group， 40，80，160，320 nmol·L

-1

triptonide significantly inhibited the proliferation of SHI-1 cells（

0.01） in a dose-dependent manner for 48， 72 h， while 160， 320 nmol·L

-1

triptonide induced apoptosis of SHI-1 cells（

0.01） for 48， 72 h， and 160 nmol·L

-1

triptonide could decrease the S phase ratio of SHI-1 cells（

0.01）. In addition， compared with the blank group， 80，160 nmol·L

-1

triptonide induced the downregulation of NF-

B significantly（

0.01）， 160 nmol·L

-1

triptonide induced the downregulation of Caspase-3， Caspase-8 significantly（

0.01）.

Conclusion

Triptonide can inhibit the proliferation and induce apoptosis

in vitro

of SHI-1 cells， which may be related to the reduction of the cells in S phase proportion by triptonide， and the downregulation of the expression levels of Caspase-3， Caspase-8 and NF-

B proteins.

关键词

Keywords

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