Effect of Modifide Wenjingtang on JAK2/STAT3 Signal Pathway and Downstream Factors Protein Expression in Endometriosis Rats

Rui-ying SUN; Yi-fan CUI; Juan CAO; Rui JIAO

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20210540

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

Effect of Modifide Wenjingtang on JAK2/STAT3 Signal Pathway and Downstream Factors Protein Expression in Endometriosis Rats

Pharmacology | 更新时间：2021-02-09

- Effect of Modifide Wenjingtang on JAK2/STAT3 Signal Pathway and Downstream Factors Protein Expression in Endometriosis Rats
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 27, Issue 5, Pages: 41-51(2021)
- 作者机构：
  
  1.山西中医药大学第二临床学院，太原 030000
  2.山西中医药大学第四临床学院，基础医学院，护理学院，山西晋中 030619
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20210540
  CLC： R2-0;R289;R271.1
- Received：10 September 2020，
  
  Published Online：12 January 2021，
  
  Published：05 March 2021
- 稿件说明：
移动端阅览
孙瑞英,崔轶凡,曹娟等.温经汤加味对EM肾虚血瘀型大鼠JAK2/STAT3信号通路及其下游因子的影响[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(05):41-51.

SUN Rui-ying,CUI Yi-fan,CAO Juan,et al.Effect of Modifide Wenjingtang on JAK2/STAT3 Signal Pathway and Downstream Factors Protein Expression in Endometriosis Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(05):41-51.
孙瑞英,崔轶凡,曹娟等.温经汤加味对EM肾虚血瘀型大鼠JAK2/STAT3信号通路及其下游因子的影响[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(05):41-51. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20210540.

SUN Rui-ying,CUI Yi-fan,CAO Juan,et al.Effect of Modifide Wenjingtang on JAK2/STAT3 Signal Pathway and Downstream Factors Protein Expression in Endometriosis Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(05):41-51. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20210540.

摘要

目的

探讨温经汤加味对子宫内膜异位症（EM）肾虚血瘀型大鼠的治疗作用及其机制研究。

方法

从105只SPF级雌性未孕健康SD大鼠中随机选取10只作为空白组，余采用复合因素法构建肾虚血瘀型大鼠模型，造模成功后随机抽取10只为假手术组，仅开腹，不缝内膜，余采用自体内膜移植法构建EM肾虚血瘀型大鼠模型。从造模成功的56只大鼠中随机选取50只大鼠随机分为模型组、达那唑组（63 mg·kg

-1

）及温经汤加味低、中、高剂量组（5，10，20 g·kg

-1

），每组10只，每日灌胃1次，连续4周。取各组内膜组织进行苏木素-伊红（HE）染色，观察组织病理变化；酶联免疫吸附测定（ELISA）检测各组血清上清液中白细胞介素-10（IL-10），白细胞介素-17（IL-17）含量；测量治疗前后各造模组异位灶长（D

），宽（D

），高（D

），并计算异位灶体积；免疫组化（IHC）检测各组大鼠内膜组织中Janus激酶2（JAK2），信号转导与转录活化因子3（STAT3），磷酸化STAT3（p-STAT3），血管内皮生长因子（VEGF），肿瘤坏死因子-

（TNF-

），血小板反应素-1（TSP-1）蛋白表达情况；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测VEGF，TNF-

以及TSP-1蛋白表达情况。

结果

镜下病理观察可见空白组大鼠子宫内膜腺体细胞排列整齐，腺体及间质细胞生长良好；与空白组比较，模型组子宫内膜结构完整，呈子宫腔状或环形封闭式结构，内有囊肿形成，上皮为立方状或柱状上皮，大部分上皮细胞有分泌现象，间质致密，基质呈少许纤维化，血管增生密集，并可见到少量腺体及炎细胞浸润。与空白组比较，模型组血清中IL-10含量显著降低（

0.01），IL-17含量显著升高（

0.01）；模型组内膜组织中JAK2，STAT3，p-STAT3，VEGF，TNF-

蛋白表达明显升高（

0.05），TSP-1蛋白表达明显降低（

0.05）。与模型组比较，温经汤加味各剂量组大鼠血清中IL-10含量显著升高（

0.01），IL-17含量显著降低（

0.01），异位灶体积显著减小（

0.01）；温经汤加味高、中剂量组内膜组织中JAK2，STAT3，p-STAT3，TNF-

，VEGF蛋白水平均明显降低（

0.05），TSP-1蛋白水平明显升高（

0.05）。

结论

温经汤加味具有抑制EM肾虚血瘀型大鼠异位灶侵袭作用，其机制可能与干预JAK2/STAT3信号通路过度激活所介导的免疫屏障、阻断微血管新生功能有关。

Abstract

Objective

To investigate the therapeutic effect and mechanism of modified Wenjingtang on endometriosis （EM） rats with kidney deficiency and blood stasis.

Method

The 10 from 105 SPF female healthy SD rats were randomly selected as the blank group. The rest constructed the rat model of kidney deficiency and blood stasis by compound factorial method. After the model was successfully established， 10 rats were randomly selected as the sham operation group， with only laparotomy and no intima suture， and the remaining rats were established with EM kidney deficiency and blood stasis type by autologous intimal transplantation. Fifty rats which were randomly selected from 56 successful rats were treated with the modified Wenjingtang （5，10，20 g·kg

-1

） and danazol group（63 mg·kg

-1

）， 1 time daily ， for 4 weeks. The endometrial tissues of each group were stained with hematoxylin eosin （HE） to observe the histopathology. The levels of inflammatory factors interleukin-10 （IL-10） and interleukin-17 （IL-17） in serum supernatant were detected by enzyme linked immunosorbent assay （ELISA）. Measuring the length（D

），width （D

） and height （D

） of the heterotopic foci in each group before and after treatment. Then calculating the volume of them. The expression of tyrosine kinase 2（JAK2），transcription factor 3 （STAT3），phosphorylation transcription factor 3 （p-STAT3）， vascular endothelial growth factor （VEGF）， tumor necrosis factor-

（TNF-

） and thrombospondin-1 （TSP-1） were detected by immunohistochemistry （IHC）. The expression of VEGF，TNF-

and TSP-1 was detected by Western blot.

Result

Microscopic pathological observation showed that the endometrial glandular cells of the blank group were arranged in order， and the glandular and stromal cells grew well， compared with the blank group， the endometrial structure of the model group was complete， showing a cavity like or annular closed structure， with cyst formation， and the epithelium was cubic or columnar epithelium， most of the epithelial cells had secretion， the stroma was dense， and the matrix showed a little fibrosis There were a few glands and inflammatory cell infiltration. Compared with the blank group， the content of IL-10 in serum of model group was significantly decreased （

0.01）， and the content of IL-17 was significantly increased （

0.01）， the protein expression of JAK2， STAT3，p-STAT3， VEGF， TNF-

in endometrial tissue of model group was significantly increased （

0.05）， and the expression of TSP-1 protein was significantly decreased （

0.05）. Compared with the model group， the serum IL-10 content of rats in modified Wenjingtang treatment group increased significantly （

0.01）， the IL-17 content decreased significantly

（P

0.01）， and the volume of ectopic foci decreased significantly （

0.01）. While the level of JAK2，STAT3，p-STAT3，TNF-

，VEGF protein in intimal tissue of modified Wenjingtang high and middle dose group decreased significantly （

0.05） and the level of TSP-1 protein increased significantly （

0.05）.

Conclusion

Modified Wenjingtang can inhibit the invasion of ectopic foci in EM rats with kidney deficiency and blood stasis， the mechanism may be related to the intervention of immune barrier and block angiogenesis function mediated by JAK2/STAT3 signaling pathway activation.

关键词

Keywords

references

CHEN P ， ZHANG Z F ， CHEN Q ， et al . Expression of Th1 and Th2 cytokine associated transcription factors，T-bet and GA-TA-3，in the eutopic endometrium of women with endometriosis ［J］. Acta Histochem ， 2012 ， 114 ： 779 - 784 .

SHAFRIR A L ， FARLAND L V ， SHAH D K ， et . al.Risk for and consequences of endometriosis：a critical epidemiologic review ［J］. Best Pract Res Clin Obstet Gynaecol ， 2018 ， 8 （ 51 ）： 1 - 15 .

YAN R ， LIN F ， HU C ， et al . Association between STAT3 polymorphisms and cancer risk：a Meta-analysis ［J］. Mol Genet Genomics ， 2015 ， 290 （ 6 ）： 2261 - 2270 .

吴松，郑桂霞，张艳辉，等 . JAK2/STAT3信号通路与子宫内膜异位症发病机制相关性研究［J］. 中国继续医学教育， 2016 ， 8 （ 30 ）： 51 - 53 .

陈建梅，杨蕊蕊，刘洪恩，等 . JAK2/STAT3信号转导通路在子宫内膜异位症发病过程中的作用［J］. 天津医药， 2019 ， 47 （ 2 ）： 136 - 139 .

王玲，黄蓉，林晓潭，等 . GnRHa治疗子宫内膜异位与JAK2/STAT3信号通路的相关性研究［J］. 标记免疫分析与临床， 2019 ， 26 （ 12 ）： 2121 - 2124，2150 .

崔轶凡，王庆国 . 从微观辨证论子宫内膜异位症的病机［J］. 北京中医药大学学报， 2009 ， 32 （ 6 ）： 370 - 373 .

马遇春，孟庆刚，李佩玲，等 . 基于“伏邪”、“络病”理论探讨子宫内膜异位症中医病机通路构建［J］. 湖北中医药大学学报， 2017 ， 19 （ 6 ）： 58 - 60 .

GUO S W ， DU Y ， LIU X . Platelet-derived TGF- β 1 mediates the down-modulation of NKG2D expression and may be responsible for impaired natural killer（NK）cytotoxicity in women with endometriosis ［J］. Hum Reprod ， 2016 ， 31 （ 7 ）： 1462 - 1474 .

GUEUVOGHLANIAN-SILVA B Y ， BELLELIS P ， BARBEIRO D F ， et al . Treg and NK cells related cytokines are associated with deep rectosigmoid endometriosis and clinical symptoms related to the disease ［J］. J Reprod Immunol ， 2018 ， 126 ： 32 - 38 .

崔轶凡，刘宏奇 . 基于子宫内膜异位症与恶性肿瘤的相关性探析补肾化瘀法作用机制及中医理论依据［J］. 世界科学技术―中医药现代化， 2020 ， 22 （ 2 ）： 441 - 445 .

祝敏捷，孙莲芳，杨静 . 温经汤治疗子宫内膜异位症的疗效及对机体免疫功能的影响［J］. 现代中西医结合杂志， 2016 ， 25 （ 2 ）： 148 - 151 .

林继红，杨海英 . 雌性大鼠肾虚模型初探［J］. 中国比较医学杂志， 2010 ， 20 （ 10 ）： 78 .

谷栩萌 . 基于PDGFR/JAK2/STAT3通路探讨痛愈舒颗粒对寒凝血瘀型EMs大鼠在位内膜的调控机制［D］. 哈尔滨：黑龙江中医药大学， 2018 .

VERNON M W ， WILSON E A . Studies on the surgical induction of endometriosis in the rat ［J］. Fertil Steril ， 1985 ， 44 （ 5 ）： 684 - 694 .

ZULFIKAROGLU E ， ISLIMYE M ， AYDIN M ， et al . Efficacy of anti-tumor necrosis factherapy on endometriosis in an experimental rat mode ［J］. Arch Gynecol Obstet ， 2011 ， 283 （ 4 ）： 799 - 800 .

曾如辉，罗丽莉，许铭炎，等 . 自体子宫移植建立子宫内膜异位症大鼠模型［J］. 实验动物与比较医学， 2006 ， doi： 10.3969/j.issn.1674-5817.2006.02.002 http://dx.doi.org/10.3969/j.issn.1674-5817.2006.02.002 .

崔轶凡，王庆国 . 子宫内膜异位症肾虚血瘀证大鼠模型的建立与评价方法研究［J］. 世界中西医结合杂志， 2011 ， 6 （ 7 ）： 607 - 609 .

徐淑云 . 药理实验方法学［M］. 北京：人民卫生出版社， 2002 ： 238 .

李雷，冷金花 . 子宫内膜异位症及其治疗对女性生育影响的研究进展［J］. 中国实用妇科与产科杂志， 2013 ， 29 （ 5 ）： 393 - 396 .

张琦、林昌松 . 金匮要略讲义［M］. 北京：人民卫生出版社， 2014 ： 263 - 264 .

汤艳秋，吴燕虹 . 温经汤治疗子宫内膜异位症痛经30例临床观察［J］. 江苏中医药， 2015 ， 47 （ 6 ）： 36 - 37 .

梁俊燕 . 温经汤对子宫内膜病变不孕症患者子宫内膜形态与妊娠的影响［J］. 现代中西医结合杂志， 2016 ， 25 （ 29 ）： 3259 - 3261 .

江志扬 . 温经汤加减治疗月经不调肾虚血瘀型临床观察［J］. 新中医， 2010 ， 42 （ 10 ）： 57 - 58 .

国家药典委员会 . 中华人民共和国药典：一部［M］. 北京：中国医药科技出版社， 2015 ： 299 - 300 .

管俊，崔瑛 . 桑寄生药理作用及临床应用研究进展［J］. 河北中医， 2017 ， 39 （ 3 ）： 460 - 463 .

罗鹏 . 川续断化学成分及药理作用研究进展［J］. 化工管理， 2015 ， 19 ： 199 .

SZYMANOWSKI K ， NIEPSUJ B J ， DERAZYMANOWSKA A ， et al . Aninfluence of immunomodulation on Th1 and Th2 immune response in endometriosis in an animal model ［J］． Biomed Res Int ， 2013 ， 10 （ 5 ）： 1 - 7 .

KODAPPULLY S S ， SAKSHI S ， ROHIT S ， et al . Targeting the STAT3 signaling pathway in cancer：role of synthetic and natural inhibitors ［J］. BBA-Reviews on Cancer ， 2014 ， 1845 （ 2 ）， 21 （ 6 ）： 698 - 702 .

李佳萍，余功，谢斌 . 清燥救肺汤对肺癌JAK2/STAT3信号通路及其下游凋亡相关蛋白表达的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2020 ， 26 （ 4 ）： 48 - 53 .

蒋树龙，花宝金 . JAK2/STAT3/SOCS3信号通路与肿瘤转移［J］. 中国肿瘤生物治疗杂志， 2014 ， 21 （ 6 ）： 698 - 702 .

LONCLE C ， BONJOCH L ， FOLCHPUY E ， et al . IL17 Functions through the novel REG3 β -JAK2-STAT3 inflammatory pathway to promote the transition from chronic pancreatitis to pancreatic cancer ［J］. Cancer Res ， 2015 ， 75 （ 22 ）： 4852 - 4862 .

MUCIDA D ， HUSAIN M M ， MUROI S ， et al . Transcriptional reprogra-mming of mature CD4 + T helper cells generates distinct MHC class iirestricted cytotoxic T lymphocytes ［J］. Nat Immunol ， 2013 ， 14 （ 3 ）： 281 - 289 .

Views

下载量

CSCD

Alert me when the article has been cited

提交

Tools

Publicity Resources

Effect of Modified Wendantang on Serum 5-HT， MT， TNF-α， and Sex Hormone Levels in Patients with Perimenopausal Insomnia of Phlegm Heat Type

Role of VEGF Signaling Pathway in Pathological Mechanism of Colorectal Cancer and Traditional Chinese Medicine Intervention： A Review

Comprehensive Evaluation of Acupuncture for Secondary Dysmenorrhea Based on Health Technology Assessment

Modified Shaofu Zhuyutang Mediates VEGF/PI3K/Akt/eNOS Signaling Pathway to Inhibit Angiogenesis in Endometriosis

Exploring Academic Characteristics of Contemporary Experts and Schools in Traditional Chinese Medicine Gynecology in Treating Endometriosis Diseases Based on SrTO

Related Author

WANG Yan

XU Yuexia

DING Wei

LIU Qiuning

ZHU Yutian

XU Yun

YE Yang

JIA Xiaoqiang

Related Institution

The First Affiliated Hospital of Nanjing Medical University

Nanjing Changjiang Hospital

Beijing University of Chinese Medicine

Peking University Third Hospital

Xiyuan Hospital， China Academy of Chinese Medical Sciences

AI问答

Postal code：100700
Tel：010-84076882 Email：syfjx_2010@188.com
Technical support is provided by Beijing Founder electronics co., LTD 京ICP备11006657号-10 京公网安备11010802024621
It is recommended to read the content of this site in Chrome&IE9+. Please switch to extreme mode in browser 360.
Cookies We use cookies to help provide and enhance our service and tailor content. By continuing, you agree to the use of cookies.

⁰