Study on Sub-minimal Inhibitory Concentration of Tanreqing Injection in Inhibiting Hemolytic Activity of <italic style="font-style: italic">Staphylococcus aureus</italic> <italic style="font-style: italic">α</italic>-hemolysin

Qian TONG; Yi WANG; Jin-he ZHOU; Kai-yu CUI; Zhuo MA; Wei-feng YANG

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20210605

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Study on Sub-minimal Inhibitory Concentration of Tanreqing Injection in Inhibiting Hemolytic Activity of Staphylococcus aureus α-hemolysin

Pharmacology | 更新时间：2021-04-02

- Study on Sub-minimal Inhibitory Concentration of Tanreqing Injection in Inhibiting Hemolytic Activity of Staphylococcus aureus α-hemolysin
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 27, Issue 9, Pages: 86-93(2021)
- 作者机构：
  
  1.湖北工业大学，武汉 430068
  2.中国中医科学院医学实验中心，北京 100700
  3.吉林农业大学，长春 130118
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20210605
  CLC： R2-0;R22;R285.5;R289;R33
- Received：15 December 2020，
  
  Published Online：10 March 2021，
  
  Published：05 May 2021
- 稿件说明：
移动端阅览
童倩,王毅,周金鹤等.亚抑菌浓度痰热清注射液抑制金黄色葡萄球菌α-溶血素溶血活力[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(09):86-93.

TONG Qian,WANG Yi,ZHOU Jin-he,et al.Study on Sub-minimal Inhibitory Concentration of Tanreqing Injection in Inhibiting Hemolytic Activity of Staphylococcus aureusα-hemolysin[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(09):86-93.
童倩,王毅,周金鹤等.亚抑菌浓度痰热清注射液抑制金黄色葡萄球菌α-溶血素溶血活力[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(09):86-93. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20210605.

TONG Qian,WANG Yi,ZHOU Jin-he,et al.Study on Sub-minimal Inhibitory Concentration of Tanreqing Injection in Inhibiting Hemolytic Activity of Staphylococcus aureusα-hemolysin[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(09):86-93. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20210605.

摘要

目的

研究痰热清注射液（TRQ）在亚抑菌浓度下是否抑制金黄色葡萄球菌

-溶血素的产生、释放，进而缓解感染过程中机体损伤，为更好地指导临床用药提供实验依据。

方法

微孔板法和时间-生长曲线首先测定TRQ对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC）和对细菌生长的影响；而后不同亚抑菌浓度TRQ与细菌或细菌上清共培养，再与脱纤维兔血共孵育，检测TRQ对金黄色葡萄球菌

-溶血素的抑制和中和作用；细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测TRQ对金黄色葡萄球菌感染介导的人肺泡上皮细胞（A549）损伤的保护作用；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测亚抑菌浓度TRQ对金黄色葡萄球菌

-溶血素调控基因hla，agrA mRNA表达的影响。

结果

TRQ对金黄色葡萄球菌的MIC为1/8原液，亚抑菌浓度（1/64MIC~1/16MIC）TRQ不影响细菌生长；1/64MIC~1/16MIC浓度TRQ具有抑制和中和

-溶血素溶血活力的作用，且对金黄色葡萄球菌感染介导的A549细胞损伤具有保护作用；其对

-溶血素的抑制作用与抑制hla，agrA mRNA表达密切相关。

结论

亚抑菌浓度TRQ能抑制和中和金黄色葡萄球菌的

-溶血素溶血活力，对金黄色葡萄球菌感染介导的A549细胞损伤具有保护作用，其抑制

-溶血素的机制与干扰agr调控系统密切相关。

Abstract

Objective

To study whether Tanreqing injection （TRQ） can alleviate the body injury in the process of infection by inhibiting the production and release of

-hemolysin of

Staphylococcus aureus

under sub-minimal inhibitory concentration， and to provide experimental basis for better guidance of clinical medication.

Method

The effects of TRQ on the minimum inhibitory concentration （MIC） and bacterial growth of

S.aureus

were determined firstly by microplate method and time-growth curve. The different sub-minimal inhibitory concentrations of TRQ were co-cultured with bacteria or bacterial supernatants， and then co-incubated with defibrillated rabbit blood to detect the inhibitory and neutralizing effects of TRQ on

S.aureus

-hemolysin. Cell counting kit-8 （CCK-8） cell viability assay was used to detect the protective effect of TRQ on

S. aureus

-mediated damage to human alveolar epithelial cells （A549）. Real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction （Real-time PCR） was used to detect the effect of sub-minimal inhibitory concentration of TRQ on the mRNA expression of

S.aureus

-hemolysin regulatory genes hla and agrA.

Result

The MIC of TRQ to

S.aureus

was 1/8 of the stock solution， and the sub-minimal inhibitory concentration （1/64MIC-1/16MIC） TRQ used in this study did not affect the growth of bacteria. 1/64MIC-1/16 MIC TRQ had the effect of inhibiting and neutralizing the hemolytic activity of

-hemolysin， with a protective effect on

S.aureus

supernatant-mediated A549 cell damage， and its inhibitory effect on

-hemolysin was closely related to the inhibition of hla and agrA mRNA expression.

Conclusion

The sub-minimal inhibitory concentration TRQ can inhibit and neutralize the hemolytic activity of

-hemolysin of

S.aureus

， with a protective effect on A549 cell damage mediated by

S.aureus

infection， and its mechanism of inhibiting

-hemolysin is closely related to the interference with agr regulatory system.

关键词

Keywords

references

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