Mechanism of Guishenwan on Thin Endometrium Rats Based on Network Pharmacology

Zhi-ruo SHAO; Yong-ge GUAN; Yang SONG; Yan LIU; Yue LI; Yan LYU

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20211113

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

Mechanism of Guishenwan on Thin Endometrium Rats Based on Network Pharmacology

Data Mining | 更新时间：2021-07-28

- Mechanism of Guishenwan on Thin Endometrium Rats Based on Network Pharmacology
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 27, Issue 17, Pages: 168-177(2021)
- 作者机构：
  
  1.广州中医药大学第三临床医学院，广州 510006
  2.广州中医药大学第三附属医院，广州 510000
  3.广州中医药大学护理学院，广州 510006
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211113
  CLC： R285;R289;R22;R2-031;R33
- Received：25 February 2021，
  
  Published Online：21 June 2021，
  
  Published：05 September 2021
- 稿件说明：
移动端阅览
邵芷若,关永格,宋阳等.基于网络药理学研究归肾丸对薄型子宫内膜大鼠的治疗作用机制[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(17):168-177.

SHAO Zhi-ruo,GUAN Yong-ge,SONG Yang,et al.Mechanism of Guishenwan on Thin Endometrium Rats Based on Network Pharmacology[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(17):168-177.
邵芷若,关永格,宋阳等.基于网络药理学研究归肾丸对薄型子宫内膜大鼠的治疗作用机制[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(17):168-177. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211113.

SHAO Zhi-ruo,GUAN Yong-ge,SONG Yang,et al.Mechanism of Guishenwan on Thin Endometrium Rats Based on Network Pharmacology[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(17):168-177. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211113.

摘要

目的

该研究通过网络药理学的方法探讨归肾丸治疗薄型子宫内膜的关键核心靶点及相关信号通路等作用机制，进一步运用动物实验加以验证所得靶点，验证归肾丸对薄型子宫内膜的影响。

方法

利用中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）数据库检索归肾丸中8味中药组成的有效化学成分、活性成分靶点和靶点简称；运用GeneCards数据库和在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）检索薄型子宫内膜相关的靶点基因；运用韦恩软件对归肾丸的药物靶点和薄型子宫内膜的疾病靶点进行取交集操作，将交集靶点导入STRING数据库及Cytoscape 3.7.2软件进行可视化分析获得“药物-疾病”的蛋白质-蛋白质相互作用（PPI）网络；再将交集靶点输入Enrichr数据库和David数据库分别进行基因本体（GO）富集分析及京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析。以得到的可能核心关键靶点作为理论基础，建立大鼠薄型子宫内膜模型，归肾丸及雌激素干预21 d后，通过苏木素-伊红（HE）染色法观察大鼠的内膜厚度；通过蛋白免疫印迹法（Western blot）和实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测表皮生长因子受体（EGFR），基质金属蛋白酶9（MMP9），白细胞介素1

（IL-1

），丝裂原激活蛋白激酶14（MAPK14）这4个核心关键靶点的蛋白和mRNA的表达水平。

结果

通过韦恩软件共获得130个交集靶点；将130个交集靶点导入STRING数据库和Cytoscape软件中，得到包括33个节点，107条边的蛋PPI网络；DAVID 6.8数据库进行GO分析中的功能注释分析，共涉及167个生物过程（BP），22个细胞组分（CC），39个分子功能（MF）；DAVID 6.8数据库进行KEGG富集分析，与薄型子宫内膜相关的通路共34条；Western blot和Real-time PCR分别对6组大鼠子宫内膜组织中的EGFR，MMP9，IL-1

，MAPK14蛋白和mRNA的表达结果进行分析，归肾丸能够增强EGFR，MMP9，IL-1

，MAPK14蛋白和mRNA在薄型子宫内膜上的表达。

结论

通过网络药理学的理论分析及动物实验的研究结果发现，归肾丸能够有效改善薄型子宫内膜的相关指标，并通过增加EGFR，MMP9，IL-1

，MAPK14蛋白和mRNA表达水平，促进内膜组织增殖，改善内膜偏薄的症状。

Abstract

Objective

This study explores the key core targets of Guishenwan in the treatment of thin endometrium and related signaling pathways through the method of network pharmacology，and further uses animal experiments to verify the obtained targets and verify that Guishenwan are effective for thin endometrium.

Method

Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform（TCMSP） was used to retrieve the effective chemical components，active component targets and target abbreviations of the eight Chinese medicines in Guishenwan，the GeneCards database and Online Mendelian Inheritance in Man（OMIM）database were used to retrieve thin endometrial related targets gene.Use Wayne software to take the intersection of the drug target of Guishenwan and the disease target of the thin endometrium，and import the intersection target into the STRING database and Cytoscape 3.7.2 software for visual analysis to obtain the "drug-disease" protein protein interaction（PPI） network， then input the intersection target into Enrichr database and DAVID database for gene ontology（GO） enrichment analysis and Kyoto encyclopedia of genes and genomes（KEGG） enrichment analysis. Using the obtained possible core and key targets as the theoretical basis，a thin endometrial model in rats was established. After Guishenwan and estrogen intervention for 21 days，the endometrial thickness of rats was observed by hematoxylin-eosin staining（HE） staining. Western blot and quantitative real time polymerase chain reaction（Real-time PCR） detect the protein and mRNA expression levels of the four core key targets of epidermal growth factor receptor（EGFR），matrix metalloproteinase 9（MMP9），interleukin-1beita（IL-1

） and mitogen activated protein kinase 14（MAPK14）.

Result

The Venn software obtained 130 intersection targets in total， imported 130 intersection targets into the STRING database and Cytoscape database，and obtained a protein interaction network diagram including 33 nodes and 107 edges. DAVID 6.8 database for GO analysis. The function annotation analysis involving 167 biological processes（BP），22 cell components（CC），39 molecular functions（MF）. DAVID 6.8 database for KEGG enrichment analysis， and thin endometrium related A total of 34 pathways. Western blot and Real-time PCR were used to analyze the expression results of EGFR，MMP9，IL-1

，MAPK14 protein and genes in the endometrial tissues of the 6 groups of rats. Guishenwan can enhance the expression of EGFR，MMP9，IL-1

，MAPK14 protein and mRNA on the thin endometrium.

Conclusion

According to the theoretical analysis of network pharmacology and the results of animal experiments，it is found that Guishenwan can effectively improve the related indicators of thin endometrium，and promote the expression of EGFR，MMP9，IL-1

，MAPK14 protein and genes. The intimal tissue proliferates and improves the symptoms of thin intima.

关键词

Keywords

references

GROW D R ， IROMLOO K . Oral contraceptives maintain a very thin endometrium before operative hysteroscopy ［J］. Fertil Steril ， 2006 ， 85 （ 1 ）： 204 - 207 .

KUMBAK B ， ERDEN H F ， TOSUN S ， et al . Outcome of assisted reproduction treatment in patients with endometrial thickness less than 7 mm ［J］. Reprod Biomed Online ， 2009 ， 18 （ 1 ）： 79 - 84 .

SIMON A ， LAUFER N . Repeated implantation failure： clinical approach ［J］. Fertil Steril ， 2012 ， 97 （ 5 ）： 1039 - 1043 .

徐伊宁，孙晓溪 . 薄型子宫内膜的治疗进展［J］. 上海医学， 2019 ， 42 （ 2 ）： 107 - 112 .

MAEKAWA R ， TAKETANI T ， MIHARA Y ， et al . Thin endometrium transcriptome analysis reveals a potential mechanism of implantation failure ［J］. Reprod Med Biol ， 2017 ， 16 （ 2 ）： 206 - 227 .

王宝娟，夏天，苍荣 . 归肾丸的现代研究进展［J］. 湖北中医杂志， 2011 ， 33 （ 10 ）： 77 - 79 .

周新艳 . 归肾丸加味治疗子宫内膜偏薄不孕症的临床效果观察［J］. 中国医药指南， 2018 ， 16 （ 16 ）： 197 - 198 .

赵威 . 评价归肾丸加味治疗子宫内膜偏薄不孕症40例临床疗效［J］. 北方药学， 2017 ， 14 （ 5 ）： 194 - 195 .

许春燕 . 基于miR-135a调控作用探讨归肾丸治疗肾虚—薄型子宫内膜大鼠的机制研究［D］. 广州：广州中医药大学， 2016 .

张若楠 . 通心络抑制血管内膜增生的作用和机制研究［D］. 石家庄：河北医科大学， 2014 .

SUN Y ， LIU W Z ， LIU T ， et al . Signaling pathway of mapk/erk in cell proliferation， differentiation， migration， senescence and apoptosis ［J］. J Recept Signal Transduct Res ， 2015 ， 35 （ 6 ）： 600 - 604 .

UPADHYA D ， OGATA M ， RENEKER L W . Mapk1 is required for establishing the pattern of cell proliferation and for cell survival during lens development ［J］. Development ， 2013 ， 140 （ 7 ）： 1573 - 1582 .

胡红梅 . ESR1经SDF-1/CXCR4轴介导的BMSCs归巢与迁移在薄型子宫内膜中的作用及机制［D］. 重庆：重庆医科大学， 2016 .

HOFMANN G E ， RAO C V ， BARROWS G H ， et al . Binding sites for epidermal growth factor in human uterine tissues and leiomyomas ［J］. J Clin Endocrinol Metab ， 1984 ， 58 （ 5 ）： 880 - 884 .

GARGIULO A R ， FICHOROVA R N ， POLITCH J A ， et al . Detection of implan-tation-related cytokines in cervicovaginal secretions and peripher-al blood of fetile women during ovulatory menstrual cycles ［J］. Fertil Steril ， 2004 ， 8 （ 2 ）： 1226 - 1234 .

盛威 . 雌激素对子宫内膜异位症子宫内膜细胞EGF、EGFR基因及蛋白表达的影响［D］. 天津：天津医科大学， 2013 .

SEQUEIRA K ， ESPEJEL-NUNEZ A ， VEGA-HERNANDEZ E ， et al . An increase in IL-1B concentrations in embryo culture-conditioned media obtained by invitro fertilization on day 3 is related to successful implanatation ［J］. Assist Reprod Genet ， 2015 ， 32 （ 11 ）： 1623 - 1627 .

KARAR J ， MAITY A . PI3K/AKT/m TOR Pathway in Angiogenesis ［J］. Front Mol Neurosci ， 2011 ， 31 （ 4 ）： 51 - 55 .

刘卓，董相丽，连方，等 . 补肾中药对子宫内膜容受性影响的临床观察［J］. 世界中西医结合杂志， 2019 ， 14 （ 2 ）： 242 - 245 .

尹晓丹，薛晓鸥，杨维，等 . 阻断Wnt/ β -catenin信号通路对补肾活血中药作用后薄型子宫内膜干细胞标志物的影响［J］. 标记免疫分析与临床， 2018 ， 25 （ 10 ）： 1425 - 1430 .

王慧，谢波，陈小平，等 . 补肾中药对药物流产大鼠子宫内膜修复作用的研究［J］. 新中医， 2017 ， 49 （ 2 ）： 1 - 3 .

孔文娟，苏先芝，刘一斐，等 . 加减归肾丸对卵巢储备功能减退模型小鼠卵巢组织PI3K/AKT/mTOR信号通路的影响［J］. 中医杂志， 2020 ， 61 （ 12 ）： 1085 - 1089 .

刘伟杰，刘玉芹 . 自拟中药方对剖宫产术后恶露及子宫内膜MMP-9、TIMP-1的影响［J］. 长春中医药大学学报， 2018 ， 34 （ 3 ）： 550 - 553 .

SEHATZ F ， KRIKUN G ， RUNIC R ， et al . Implixations of decidualization-associated protease expression in implantation and menstruation ［J］. Semin Reprod Endoerinol ， 1999 ，17（l）：3- 12 .

LYONS J G . Interleukin-1beta and transforming growth factor-aαepiderma l growth factor induced exprssion of M r 95000 type Ⅳ gelatinase and intersititial fibroblast-type gelatinase by rat mucosal keratinocytes ［J］. J Clin Endocrinol Metab ， 1996 ， 81 （ 8 ）： 3091 - 3096 .

ROSSI M ， SHARKEY A M ， VIGANO P ， et al . Identification of genes regulated by interleukin-1beta in human endometrial stromal cells ［J］. Reproduction ， 2005 ， 130 （ 5 ）： 721 - 729 .

BOUCHER A ， KHARFI A ， et al . Cycle-dependent expression of interleukin-1 receptor type Ⅱ in the human endometrium ［J］. Bio Reprod ， 2001 ， 65 （ 3 ）： 890 - 898 .

LANDEROS R V ， JOBE S O ， ARANDA-PINO G ， et al . Convergent ERK1/2，p38 and JNK mitogen activated protein kinases（MAPKs）signalling mediate catecholoestradiol-induced proflieration of ovine uterine artery endothelial cells ［J］. J Phyfsiol ， 2017 ， 595 （ 14 ）： 4663 - 4676 .

何金英，朱素芳，莎如拉，等 . MAPK/ERK1/2对乳酸杆菌介导的子宫内膜上皮细胞增殖的影响［J］. 中国生物制品学杂志， 2020 ， 33 （ 2 ）： 152 - 156 .

KYRIAKIS J M ， AVRUCH J . Mammalian mitogen-activated pro-tein kinase signal transduction pathways activated by stress and in-flammation ［J］. Physiol Rev ， 2001 ， 81 （ 2 ）： 807 - 869 .

VALLEJO G ， BALLARE C ， BARANAO J L ， et al . Progestin activation of nongenomic pathways via cross talk of progesterone receptor with estrogen receptor beta induces proliferation of endometrial stromal cells ［J］. Mol Endocrinol ， 2005 ， 19 （ 12 ）： 3023 - 3025 .

许春燕，宋阳，李坤寅，等 . 薄型子宫内膜模型的动物选择及其造模方法改进［J］. 中国实验动物学报， 2016 ， 24 （ 2 ）： 217 - 220 .

Views

下载量

CSCD

Alert me when the article has been cited

提交

Tools

Publicity Resources

Mechanisms of Action of Dendrobium officinale Against Non-alcoholic Fatty Liver Disease Base on Its Components in Blood

Proteomics and Network Pharmacology Reveal Mechanism of Xiaoer Huatan Zhike Granules in Treating Allergic Cough

Mechanism of Action of Kaixinsan in Ameliorating Alzheimer's Disease

Efficacy Evaluation of Ethyl Acetate Fraction of Ipomoea muricatum in Prevention and Treatment of Alcoholic Gastric Ulcer

Mechanism of Dried Fruiting Bodies of Fomes officinalis Against Alzheimer's Disease： Based on Network Pharmacology and In Vitro Experimental Verification

Related Author

ZHANG Jilei

FENG Lei

XU Yumei

YAO Heyan

ZHANG Yanmei

ZHANG Shunzhen

WANG Jiao

DU Youqi

Related Institution

Yunnan University of Chinese Medicine

Yunnan Provincial Key Laboratory of Sustainable Utilization of Southern Medicines

Guizhou Medical University

Guizhou Kehui Pharmaceutical Co Ltd.

Liaoning University of Traditional Chinese Medicine（TCM）

AI问答

Postal code：100700
Tel：010-84076882 Email：syfjx_2010@188.com
Technical support is provided by Beijing Founder electronics co., LTD 京ICP备11006657号-10 京公网安备11010802024621
It is recommended to read the content of this site in Chrome&IE9+. Please switch to extreme mode in browser 360.
Cookies We use cookies to help provide and enhance our service and tailor content. By continuing, you agree to the use of cookies.

⁰