Guiqi Dingnian Prescription Delays Senescence of Mouse Mesangial Cells by Regulating JAK2/STAT Pathway Activity

Wen-ping SUN; Zhi-wei WU; Na XUE

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20211292

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Guiqi Dingnian Prescription Delays Senescence of Mouse Mesangial Cells by Regulating JAK2/STAT Pathway Activity

Pharmacology | 更新时间：2021-06-25

- Guiqi Dingnian Prescription Delays Senescence of Mouse Mesangial Cells by Regulating JAK2/STAT Pathway Activity
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 27, Issue 12, Pages: 67-73(2021)
- 作者机构：
  
  1.甘肃省肿瘤医院，兰州 730000
  2.甘肃中医药大学，兰州 730000
  3.甘肃省高校重大疾病分子医学与中医药防治研究重点实验室，兰州 730000
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211292
  CLC： R2-0;R22;R285.5;R289
- Received：19 January 2021，
  
  Published Online：16 April 2021，
  
  Published：20 June 2021
- 稿件说明：
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孙文平,伍志伟,薛娜.归芪定年方通过调节JAK2/STAT通路活性延缓小鼠肾系膜细胞衰老[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(12):67-73.

SUN Wen-ping,WU Zhi-wei,XUE Na.Guiqi Dingnian Prescription Delays Senescence of Mouse Mesangial Cells by Regulating JAK2/STAT Pathway Activity[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(12):67-73.
孙文平,伍志伟,薛娜.归芪定年方通过调节JAK2/STAT通路活性延缓小鼠肾系膜细胞衰老[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(12):67-73. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211292.

SUN Wen-ping,WU Zhi-wei,XUE Na.Guiqi Dingnian Prescription Delays Senescence of Mouse Mesangial Cells by Regulating JAK2/STAT Pathway Activity[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(12):67-73. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211292.

摘要

目的

探讨归芪定年方（GDP）对

-半乳糖（

-gal）诱导致衰型小鼠肾系膜细胞中Janus酪氨酸蛋白激酶2（JAK2）/信号转导与转录激活因子（STAT）信号通路相关分子表达水平的影响。

方法

以

-gal 10 g·L

-1

诱导复制小鼠肾系膜细胞衰老模型，经GDP 40 mg·L

-1

水煎剂处理3 d后，衰老相关

-半乳糖苷酶（SA-

-gal）染色测定细胞衰老状态，流式细胞术检测细胞周期，细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测细胞存活率，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测肿瘤坏死因子-

（TNF-

），白细胞介素-6（IL-6），核转录因子-

B（NF-

B）和白细胞介素-1

（IL-1

） mRNA表达水平，蛋白免疫印迹法（Western blot）测定细胞中JAK2/STAT信号通路相关分子STAT1，磷酸化STAT1（p-STAT1），STAT3，p-STAT3蛋白水平。

结果

CCK-8结果显示GDP最佳药物质量浓度为40 mg·L

-1

。与空白组比较，模型组SA-

-gal细胞阳性率显著升高（

0.01），G

期细胞百分数明显升高（

0.05），G

/M期和S期细胞百分数显著降低（

0.01），TNF-

，IL-6，NF-

B和IL-1

mRNA表达水平显著上调（

0.01）， STAT1，p-STAT1，STAT3和p-STAT3蛋白水平显著升高（

0.01）；与模型组比较，模型+GDP组SA-

-gal细胞阳性率明显降低（

0.05），G

期百分数明显降低（

0.05），G

/M期和S期细胞百分数显著增加（

0.01），TNF-

，IL-6，NF-

B和IL-1

mRNA表达水平明显下调（

0.05），STAT1，p-STAT1，STAT3和p-STAT3蛋白水平明显降低（

0.05）。

结论

GDP可延缓小鼠肾系膜细胞衰老的进程，其作用机制可能与下调细胞JAK2/STAT通路相关因子的表达水平相关。

Abstract

Objective

To investigate the effects of Guiqi Dingnian prescription （GDP） on the expression of related molecules in Janus tyrosine kinase 2 （JAK2）/signal transducer and activator of transcription （JAK2/STAT） signaling pathway of

-galactose （

-gal）-induced senescent mesangial cells.

Method

The senescent mouse mesangial cells induced by 10 g·L

-1

-gal were continuously treated with 40 mg·L

-1

GDP for three days. The senescence of the treated cells was determined by senescence-associated （SA）-

-gal staining. The cell cycle was detected by flow cytometry. The cell viability was analyzed using the cell counting kit-8 （CCK-8）. The mRNA expression levels of tumor necrosis factor-

（TNF-

）， interleukin-6 （IL-6）， nuclear transcription factor-

B （NF-

B）， and IL-1

were detected by real-time polymerase chain reaction （Real-time PCR）. The protein expression levels of STAT1， phosphorylated STAT1 （p-STAT1）， STAT3， and p-STAT3 in the JAK2/STAT signaling pathway were determined by Western blot.

Result

CCK-8 results showed that the optimal concentration of GDP was 40 mg·L

-1

. Compared with the blank group， the positive rate of SA-

-gal in the model group was significantly higher（

0.01）， the percentage of cells in G

phase was significantly increased（

0.05）， the percentage of cells in G

/M and S phase was significantly decreased（

0.01）. The mRNA expression levels of TNF-

，IL-6，NF-

B and IL-1

were significantly increased（

0.01）. Compared with the model group， the model + GDP group exhibited significantly decreased SA-

-gal-positive cells （

0.05）， reduced cells in the G

phase （

0.05）， increased cells in the G

/M and S phases （

0.01）， and down-regulated TNF-

， IL-6， NF-

B， and IL-1

mRNA expression （

0.05） and STAT1， p-STAT1， STAT3， and p-STAT3 protein expression （

0.05）.

Conclusion

GDP delays the senescence of mouse mesangial cells possibly by down-regulating the expression of related molecules in the JAK2/STAT pathway.

关键词

Keywords

references

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