Effect of Wenxin Prescription on G<sub>1</sub>/S Cell Cycle Transformation in Atherosclerosis Rats

Jin-xia LI; Wen-jing ZONG; Hong-xin CAO

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20211905

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Effect of Wenxin Prescription on G₁/S Cell Cycle Transformation in Atherosclerosis Rats

更新时间：2021-09-24

- Effect of Wenxin Prescription on G₁/S Cell Cycle Transformation in Atherosclerosis Rats
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 27, Issue 20, Pages: 38-45(2021)
- 作者机构：
  
  1.湖南中医药大学中医学院，中医诊断学湖南省重点实验室，长沙 410208
  2.首都医科大学中医药学院，北京 100069
  3.中华中医药学会，北京 100029
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20211905
  CLC： R2-0;R22;R285.5;R289;R33
- Received：27 May 2021，
  
  Published Online：12 August 2021，
  
  Published：20 October 2021
- 稿件说明：
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李金霞,宗文静,曹洪欣.温心方对动脉粥样硬化大鼠G₁/S细胞周期转换的调控作用[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(20):38-45.

LI Jin-xia,ZONG Wen-jing,CAO Hong-xin.Effect of Wenxin Prescription on G₁/S Cell Cycle Transformation in Atherosclerosis Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(20):38-45.
李金霞,宗文静,曹洪欣.温心方对动脉粥样硬化大鼠G₁/S细胞周期转换的调控作用[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(20):38-45. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211905.

LI Jin-xia,ZONG Wen-jing,CAO Hong-xin.Effect of Wenxin Prescription on G₁/S Cell Cycle Transformation in Atherosclerosis Rats[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(20):38-45. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20211905.

摘要

目的

观察温心方对动脉粥样硬化（AS）大鼠第一间歇期/合成期（G

/S）细胞周期转换关键靶点的作用，揭示温心方治疗AS的作用机制。

方法

无特定病原体（SPF）级Wistar大鼠90只，随机分为正常组6只和造模组84只，模型组给予高脂饲料（4%胆固醇，0.5%胆酸钠，0.2%丙基硫氧嘧啶，10%猪油，5%白糖，80.3%基础饲料）喂养60 d，每7 d腹腔注射40万U·kg

-1

维生素D

，连续3次。成模大鼠随机分为模型组、温心方高、中、低剂量组及瑞伐舒他汀组，每组6只，温心方高、中、低剂量组及瑞伐舒他汀组分别给予24，12，6 g·kg

-1

温心方水煎剂及1.8 mg·kg

-1

瑞舒伐他汀灌胃治疗30 d，模型组灌胃等量蒸馏水。治疗后观察各组大鼠一般情况，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C），低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C），总胆固醇（CHO），计算粥样硬化指数（AI），苏木素-伊红染色观察冠状动脉及主动脉病理形态，蛋白免疫印迹法（Western blot）及实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测主动脉E2F转录因子1（E2F1），磷酸化成视网膜细胞瘤蛋白（p-Rb），细胞分裂周期因子25（Cdc25），细胞周期素E（CyclinE），细胞周期素D

（CyclinD

）蛋白及mRNA表达。

结果

与正常组比较，模型组大鼠冠状动脉及主动脉内膜增厚，平滑肌增殖，粥样斑块形成，HDL-C水平显著降低（

0.01），LDL-C，CHO，AI水平显著升高（

0.01），主动脉E2F1，Cdc25，p-Rb，CyclinE，CyclinD

蛋白及基因表达均有所上升（

0.05）；与模型组比较，温心方各剂量组及瑞伐舒他汀组大鼠冠状动脉及主动脉内膜增生及管腔变窄不明显，LDL-C，CHO，AI水平显著降低（

0.01），主动脉E2F1，Cdc25，p-Rb，CyclinE，CyclinD

蛋白及基因表达均有不同程度的下降（

0.05）。

结论

温心方可显著抑制AS大鼠主动脉G

/S细胞周期关键调控蛋白及基因表达，调控G

/S细胞周期转换，减轻血管平滑肌及内膜增生。

Abstract

Objective

To observe the effects of Wenxin prescription on the key targets of gap 1/synthesis （G

/S） cell cycle transformation in rats with atherosclerosis （AS）， and reveal the mechanism of Wenxin prescription in the treatment of AS.

Method

Ninety SPF Wistar rats were randomly divided into a normal group （

=6） and a modeling group （

=84）. The rats in the modeling group were fed on a high-fat diet （4% cholesterol， 0.5% sodium cholate， 0.2% propyl thiouracil， 10% lard， 5% sugar， and 80.3% basal feed） for 60 days， and intraperitoneally injected with 400 000 U·kg

-1

vitamin D

， once a week for three weeks. The model rats were then randomly divided into a model group， high-dose （24 g·kg

-1

）， medium-dose （12 g·kg

-1

）， and low-dose （6 g·kg

-1

） Wenxin prescription groups， and a rosuvastatin （1.8 mg·kg

-1

） group. The groups with drug intervention were treated correspondingly by gavage for 30 days. The rats in the model group were administered with an equal volume of distilled water. The general condition of rats was observed after treatment. The levels of high-density lipoprotein cholesterol （HDL-C）， low-density lipoprotein cholesterol （LDL-C）， and total cholesterol （CHO） were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， and the atherosclerosis index （AI） was calculated. The pathological morphology of the coronary artery and aorta was observed by hematoxylin-eosin （HE） staining. The protein and mRNA expression of E2F transcription factor 1 （E2F1）， phosphorylated retinoblastoma protein （p-Rb）， cell division cycle 25 （Cdc25）， CyclinE， and CyclinD

was detected by Western blot and real-time fluorescence-based quantitative polymerase chain reaction （Real-time-PCR）， respectively.

Result

Compared with the normal group， the model group showed intima thickening， smooth muscle proliferation， and plaque formation in the coronary artery and aorta， decreased HDL-C （

0.01）， increased LDL-C， CHO， and AI （

0.01）， elevated protein and mRNA expression of E2F1， Cdc25， p-Rb， CyclinE and CyclinD

（

0.05）. Compared with the model group， the rosuvastatin group and the Wenxin prescription groups showed slight intimal hyperplasia and lumen narrowing of the coronary artery and aorta， decreased levels of LDL-C， CHO， and AI （

0.01）， and declining protein and mRNA expression of E2F1， Cdc25， p-Rb， CyclinE， and CyclinD

to varying degrees （

0.05）.

Conclusion

Wenxin prescription can significantly inhibit the expression of key proteins and genes of the G

/S cell cycle， regulate G

/S cell cycle transformation， and reduce vascular smooth muscle and intimal hyperplasia in AS rats.

关键词

Keywords

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