Inhibitory Effect and Mechanism of Jingulian Capsule on Human Breast Cancer MDA-MB-231 Cells

Jian-fei QIU; Jue YANG; Zhi-yin ZHANG; Wu-ling LIU; Hui SONG; Xiao-sen WU; Jing LI; Yan-mei LI

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20212424

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Inhibitory Effect and Mechanism of Jingulian Capsule on Human Breast Cancer MDA-MB-231 Cells

更新时间：2021-11-12

- Inhibitory Effect and Mechanism of Jingulian Capsule on Human Breast Cancer MDA-MB-231 Cells
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 27, Issue 24, Pages: 78-83(2021)
- 作者机构：
  
  1.贵州医科大学省部共建药用植物功效与利用国家重点实验室，贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室，贵阳 550014
  2.贵州医科大学大学城医院，贵阳 550025
  3.贵航贵阳医院，贵阳 550027
  4.湖南省湘西自治州烟草公司永顺县分公司，湖南湘西自治州 416000
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20212424
  CLC： R22;R242;R2-031;R285.5
- Received：31 August 2021，
  
  Published Online：26 October 2021，
  
  Published：20 December 2021
- 稿件说明：
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邱剑飞,杨珏,张知音等.金骨莲胶囊对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的抑制作用及机制[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(24):78-83.

QIU Jian-fei,YANG Jue,ZHANG Zhi-yin,et al.Inhibitory Effect and Mechanism of Jingulian Capsule on Human Breast Cancer MDA-MB-231 Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(24):78-83.
邱剑飞,杨珏,张知音等.金骨莲胶囊对人乳腺癌MDA-MB-231细胞的抑制作用及机制[J].中国实验方剂学杂志,2021,27(24):78-83. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20212424.

QIU Jian-fei,YANG Jue,ZHANG Zhi-yin,et al.Inhibitory Effect and Mechanism of Jingulian Capsule on Human Breast Cancer MDA-MB-231 Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2021,27(24):78-83. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20212424.

摘要

目的

研究金骨莲胶囊对人三阴性乳腺癌（TNBC）细胞MDA-MB-231增殖的影响，探讨金骨莲胶囊对TNBC的治疗作用机制。

方法

利用超高效液相色谱-质谱联用（UPLC-MS/MS）技术，对金骨莲胶囊的成分进行分析鉴定。通过用噻唑蓝（MTT）比色法观察金骨莲胶囊（0.125，0.25，0.5，1，2 g·L

-1

）对人乳腺癌细胞MDA-MB-231的增殖抑制作用。采用Hoechst 33258染色检测金骨莲胶囊处理MDA-MB-231细胞24 h后的细胞核凋亡形态学的变化。采用流式细胞仪检测金骨莲胶囊不同质量浓度和作用时间对MDA-MB-231细胞凋亡及周期分布情况。通过蛋白免疫印迹法（Western blot）检测各组细胞多聚二磷酸腺苷核糖聚合酶（PARP），原癌基因蛋白（c-Myc），细胞周期蛋白B

（cyclin B

）和磷酸化胞外信号调节激酶（p-ERK）的蛋白表达水平。

结果

该研究利用UPLC-MS/MS技术鉴定了金骨莲胶囊提取物中113个化合物成分。MTT比色法显示，与空白组比较，金骨莲胶囊组（0.125，0.25，0.5，1，2 g·L

-1

）细胞抑制率显著增加（

0.01），半数抑制浓度（IC

）为（0.13±0.02）g·L

-1

；流式细胞术结果显示，与空白组比较，金骨莲胶囊组（1 g·L

-1

）细胞凋亡率显著升高（

0.01），金骨莲胶囊组（0.5，1 g·L

-1

）细胞处于S期的数量明显增加（

0.05，

0.01）；Western blot结果显示，与空白组比较，金骨莲胶囊组（0.5，1 g·L

-1

）细胞中的PARP，c-Myc，cyclin B

蛋白表达水平显著降低（

0.01），金骨莲胶囊组（1 g·L

-1

）p-ERK蛋白表达水平显著降低（

0.01）。

结论

金骨莲胶囊可抑制MDA-MB-231细胞增殖，使细胞周期阻滞于S期，并诱导其凋亡，其机制可能与其抑制MDA-MB-231细胞MAPK信号通路有关。

Abstract

Objective

To observe effect of Jingulian capsule on the proliferation of human breast cancer MDA-MB-231 cells and investigate its action mechanism against triple negative breast cancer （TNBC）.

Method

The ingredients of Jingulian capsule were identified by ultra-performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry（UPLC-MS/MS）. The inhibitory effect of Jingulian capsule at different doses （0.125，0.25，0.5，1，and 2 g·L

-1

） against the proliferation of MDA-MB-231 cells were detected by methyl thiazolyl tetrazolium （MTT） assay. After treatment for 24 h， the morphological changes in nuclear apoptosis of MDA-MB-231 cells were detected by Hoechst 33258 staining. The effect of different concentrations of Jingulian capsule on the apoptosis and cycle of MDA-MB-231 cells after different treatment time were determined by flow cytometry. The protein expression levels of Poly-ADP-ribose polymeras （PARP）， proto-oncogene c-Myc， cyclin B

， and phosphorylated extracellular signal-regulated kinase （p-ERK） in each group were assayed by Western blot.

Result

A total of 113 compounds in Jingulian capsule were identified by UPLC-MS/MS. As revealed by MTT assay，compared with blank group，Jingulian capsule （0.125，0.25，0.5，1，2 g·L

-1

） significantly inhibited viability of MDA-MB-231 cells （

0.01）， with the half maximal inhibitory concentration （ IC

） of（0.13±0.02）g·L

-1

. According to flow cytometry，compared with the blank group，Jingulian capsule at 1 g·L

-1

significantly induced the apoptosis of MDA-MB-231 cells （

0.05）and Jingulian capsule at 0.5， 1 g·L

-1

obviously increased the number of MDA-MB-231 cells in S phase （

0.05，

0.01）. The results of Western blotting demonstrated that the protein expression levels of PARP，c-Myc，and cyclin B

in 0.5， 1 g·L

-1

Jingulian capsule groups were remarkably down-regulated as compared with those in the blank group（

0.01）， and the protein expression level of p-ERK in 1 g·L

-1

Jingulian capsule group was also down-regulated （

0.01）.

Conclusion

Jingulian capsule is able to inhibit the proliferation of MDA-MB-231 cells，induce S phase cell cycle arrest， and promote their apoptosis， which may be related to the inactivation of the MAPK signaling pathway.

关键词

Keywords

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