Chinese Herbal Medicine Feiyanning Prescription Regulates EMT to Reverse Cisplatin Resistance in Non-small Cell Lung Cancer

XIA Jinli; CAI Yuejiao; WU Xinhong; WANG Zhongqi; DENG Haibin

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.2022002024

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Chinese Herbal Medicine Feiyanning Prescription Regulates EMT to Reverse Cisplatin Resistance in Non-small Cell Lung Cancer

更新时间：2023-01-17

- Chinese Herbal Medicine Feiyanning Prescription Regulates EMT to Reverse Cisplatin Resistance in Non-small Cell Lung Cancer
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 29, Issue 4, Pages: 43-51(2023)
- 作者机构：
  
  上海中医药大学附属龙华医院，上海 200032
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.2022002024
  CLC： R22;R242;R2-031;R285.5
- Received：01 March 2022，
  
  Published Online：17 August 2022，
  
  Published：20 February 2023
- 稿件说明：
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夏尽力,蔡玥娇,吴新鸿等.肺岩宁方调控EMT逆转非小细胞肺癌顺铂耐药[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(04):43-51.

XIA Jinli,CAI Yuejiao,WU Xinhong,et al.Chinese Herbal Medicine Feiyanning Prescription Regulates EMT to Reverse Cisplatin Resistance in Non-small Cell Lung Cancer[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(04):43-51.
夏尽力,蔡玥娇,吴新鸿等.肺岩宁方调控EMT逆转非小细胞肺癌顺铂耐药[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(04):43-51. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.2022002024.

XIA Jinli,CAI Yuejiao,WU Xinhong,et al.Chinese Herbal Medicine Feiyanning Prescription Regulates EMT to Reverse Cisplatin Resistance in Non-small Cell Lung Cancer[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(04):43-51. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.2022002024.

摘要

目的

观察肺岩宁方（肺岩宁）对非小细胞肺癌顺铂耐药的影响，并探究其可能存在的机制。

方法

细胞增殖与活性检测（CCK-8）法观察顺铂（0、2.0、4.0、6.0、8.0、10.0 mg⋅L

-1

）对A549和A549/DDP（顺铂耐药）细胞细胞增殖能力的影响，肺岩宁（0、100、200、300、400、500、600 mg⋅L

-1

）对A549/DDP细胞增殖能力影响；免疫荧光染色、蛋白免疫印迹法（WB）观察A549和A549/DDP组上皮间质转化（EMT）相关蛋白表达；将A549/DDP细胞分为空白组、肺岩宁组（200 mg⋅L

-1

）、顺铂组（6.0 mg⋅L

-1

）和联合用药组［肺岩宁（200 mg⋅L

-1

）+顺铂（6.0 mg⋅L

-1

）］，并进行相应处理，侵袭小室（transwell）实验比较各组侵袭能力；WB检测各组EMT相关蛋白表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）和免疫荧光染色分别检测各组耐药因子mRNA和蛋白表达。

结果

与A549组比较，A549/DDP组对顺铂耐药性显著增高（

0.01）；E-钙黏蛋白（E-cadherin）蛋白表达降低，波形蛋白（Vimentin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、锌指转录因子（Snail）蛋白表达升高（

0.05，

0.01）。经肺岩宁、顺铂处理后，与空白组比较，肺岩宁可浓度依赖性抑制A549/DDP细胞增殖（

0.01）；肺岩宁组、顺铂组、联合用药组侵袭能力降低（

0.01）；与顺铂组比较，联合用药组侵袭能力显著降低（

0.01）。与空白组比较，肺岩宁组E-cadherin蛋白表达升高，N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达降低（

0.01），顺铂组E-cadherin、N-cadherin、Vimentin蛋白表达降低，Snail蛋白表达升高（

0.05，

0.01）；联合用药组E-cadherin、N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达降低（

0.01）；与顺铂组比较，联合用药组E-cadherin蛋白表达升高，N-cadherin、Vimentin、Snail蛋白表达降低（

0.01）。与空白组比较，肺岩宁组肺耐药相关蛋白（LRP）、多药耐药因子1（MDR1）蛋白和mRNA表达降低，拓扑异构酶Ⅱ

（TOPO Ⅱ

）蛋白和mRNA表达升高（

0.01）；顺铂组LRP、MDR1、TOPO Ⅱ

蛋白和mRNA表达升高（

0.01）；联合用药组LRP蛋白和mRNA表达无明显改变，MDR1、TOPO Ⅱ

蛋白和mRNA表达升高（

0.01）；与顺铂组比较，肺岩宁组、联合用药组LRP、MDR1蛋白和mRNA表达降低，TOPO Ⅱ

蛋白和mRNA表达升高（

0.01）；与肺岩宁组比较，联合用药组LRP、MDR1、TOPO Ⅱ

蛋白和mRNA表达升高（

0.01）。

结论

肺岩宁方能够逆转非小细胞肺癌顺铂耐药，其机制可能与调控EMT进程相关。

Abstract

Objective

To observe the effect of Feiyanning prescription （FYN） on cisplatin （DDP） resistance in non-small cell lung cancer （NSCLC） and explore the underlying mechanism.

Method

Cell counting kit-8 （CCK-8） assay was used to detect the proliferation of A549 and A549/DDP （DDP-resistant） cells treated by DDP （0， 2.0， 4.0， 6.0， 8.0， 10.0 mg⋅L

-1

） and the proliferation of A549/DDP cells treated by FYN （0， 100， 200， 300， 400， 500， 600 mg⋅L

-1

）. Based on immunofluorescence staining and Western blot （WB）， the expression of epithelial mesenchymal transition （EMT）-related proteins in A549 and A549/DDP groups was observed. A549/DDP cells were classified into control group， FYN group （200 mg⋅L

-1

）， DDP group （6.0 mg⋅L

-1

）， and combination group ［FYN （200 mg⋅L

-1

） + DDP （6.0 mg⋅L

-1

）］ and respectively treated with corresponding drugs. Then， invasion ability of each group was examined by transwell assay， and the expression of EMT-related proteins in each group by WB. Moreover， real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction（Real-time PCR） and immunofluorescence staining were separately applied to detect the mRNA and protein expression of drug resistance-related factors in each group， respectively.

Result

Compared with A549 group， A549/DDP group showed high resistance to DDP （

0.01）， low expression of E-cadherin， and high protein expression of Vimentin， N-cadherin， and Snail （

0.05，

0.01）. As compared with the control group， FYN inhibited the proliferation of A549/DDP cells in a concentration-dependent manner （

0.01）， and the FYN group， DDP group， and combination group demonstrated low invasion ability （

0.01）. In addition， the invasion ability in the combination group was particularly lower than that in the DDP group （

0.01）. The expression of E-cadherin protein was higher and the protein expression of N-cadherin， Vimentin， and Snail was lower in the in FYN group than in the control group （

0.01）. The protein expression of E-cadherin， N-cadherin， and Vimentin was lower and the expression of Snail was higher in the DDP group than in the control group （

0.05，

0.01）. The protein expression of E-cadherin， N-cadherin， Vimentin， and Snail in the combination group decreased as compared with that in the control group （

0.01）. Compared with the DDP alone， the combination raised the expression of E-cadherin and lowered the protein expression of N-cadherin， Vimentin， and Snail （

0.01）. The protein and mRNA expression of lung resistance-related protein （LRP） and multidrug resistance 1 （MDR1） was lower and the protein and mRNA expression of topoisomerase Ⅱ

（TOPO Ⅱ

） was higher in the FYN group than in the control group （

0.01）. The protein and mRNA expression of LRP， MDR1， and TOPO Ⅱ

was higher in the DDP group than in the control group （

0.01）. The expression of LRP protein and mRNA showed no significant variation， but the protein and mRNA expression of MDR1 and TOPO Ⅱ

increased in the combination group compared with those in the control group （

0.01）. Compared with the DDP group， FYN group and combination group showed low protein and mRNA expression of LRP and MDR1 and high protein and mRNA expression of TOPO Ⅱ

（

0.01）. Compared with FYN， the combination elevated the protein and mRNA expression of LRP， MDR1， and TOPO Ⅱ

（

0.01）.

Conclusion

FYN prescription can reverse the DDP resistance of NSCLC by modulating EMT.

关键词

Keywords

references

REBECCA L S ， KIMBERLY M D ， AHMEDIN J . Cancer statistics， 2020 ［J］. CA Cancer J Clin ， 2020 ， 70 （ 1 ）： 7 - 30 .

MAKOVEC T . Cisplatin and beyond： Molecular mechanisms of action and drug resistance development in cancer chemotherapy ［J］. Radiol oncol ， 2019 ， 53 （ 2 ）： 148 - 158 .

MONISH R M ， ALOK R ， VANI T ， et al . Cancer stem cells： Road to therapeutic resistance and strategies to overcome resistance ［J］. Biochim Biophys Acta Mol Basis Dis ， 2020 ， 18 （ 66 ）： 33 - 39 .

BOWEN D ， SUP S J . Targeting epithelial-mesenchymal transition （EMT） to overcome drug resistance in cancer ［J］. Molecules ， 2016 ， 21 （ 7 ）： 960 - 965 .

DEVARAJAN N ， MANJUNATHAN R ， GANESAN S K . Tumor hypoxia： The major culprit behind cisplatin resistance in cancer patients ［J］. Crit Rev Oncol Hematol ， 2021 ， 162 ： 103327 .

ASHRAFIZADEH M ， MIRZAEI S ， HASHEMI F ， et al . New insight towards development of paclitaxel and docetaxel resistance in cancer cells： EMT as a novel molecular mechanism and therapeutic possibilities ［J］. Biomed Pharmacother ， 2021 ， 141 ： 111824 .

WANG Y F ， DONG C F ， ZHOU B H . Metabolic reprogram associated with epithelial-mesenchymal transition in tumor progression and metastasis ［J］. Genes Dis ， 2020 ， 7 （ 2 ）： 172 - 184 .

WU Y P ， LIN L J ， WANG X ， et al . Over expression of Krüppel-like factor 4 suppresses migration and invasion of non-small cell lung cancer through c-Jun-NH2-terminal kinase/epithelial-mesenchymal transition signaling pathway ［J］. Front Pharmacol ， 2019 ， 10 （ 1 ）： 151 - 152 .

JIANG G B ， FANG H Y ， TAO D Y ， et al . COX-2 potentiates cisplatin resistance of non-small cell lung cancer cells by promoting emt in an Akt signaling pathway-dependent manner ［J］. Eur Rev Med Pharmacol Sci ， 2019 ， 23 （ 9 ）： 3838 - 3846 .

BERGER W ， ELBLING L ， MICKSCHE M . Expression of the major vault protein LRP in human non-small-cell lung cancer cells：Activation by shortterm exposure to antineoplastic drugs ［J］. Int J Cancer ， 2000 ， 88 （ 2 ）： 293 - 300 .

ZAWADZKA I ， JELEŃ A ， PIETRZAK J ， et al . The impact of ABCB1 gene polymorphism and its expression on non-small-cell lung cancer development， progression and therapy - preliminary report ［J］. Sci Rep ， 2020 ， 10 （ 1 ）： 61 - 88 .

SUN Y ， ZHANG J ， ZHOU J ， et al . Synergistic effect of cucurbitacin B in combination with curcumin via enhancing apoptosis induction and reversing multidrug resistance in human hepatoma cells ［J］. Eur J Pharmacol ， 2015 ， 76 （ 8 ）： 28 - 40 .

王煜霞，王雷，常海敏 . Topo-Ⅱ蛋白与p53蛋白在非小细胞肺癌耐药性中的表达［J］. 新乡医学院学报， 2012 ， 29 （ 01 ）： 36 - 39 .

郭亚楠，蒋兵，郭红云，等 . 非小细胞肺癌耐药机制及其逆转耐药的研究进展［J］. 甘肃医药， 2020 ， 39 （ 10 ）： 871 - 875 .

GONG Y B ， XU Z Y ， JIN C J ， et al . Treatment of advanced non-small-cell lung cancer with Qi-nourishing essence-replenishing chinese herbal medicine combined with chemotherapy ［J］. Biol Proced Online ， 2018 ， 20 （ 1 ）： 74 - 79 .

XU Z Y ， JIN C J ， ZHOU C C ， et al . Treatment of advanced non-small-cell lung cancer with Chinese herbal medicine by stages combined with chemotherapy ［J］. J Cancer Res Clin Oncol ， 2011 ， 137 （ 7 ）： 1117 - 1122 .

ZHAO X Z ， WU Z H ， XU Z Y ， et al . Effects of Feiyanning on the expression of epithelial-mesenchymal factors in highly metastatic lung cancer cells 95-D ［J］. Chin J Lung Cancer ， 2011 ， 14 （ 6 ）： 467 - 471 .

ZHENG Z ， MA Y ， WANG L F ， et al . Chinese herbal medicine Feiyanning cooperates with cisplatin to enhance cytotoxicity to non-small-cell lung cancer by inhibiting protective autophagy ［J］. J Ethnopharmacol ， 2021 ， 27 （ 6 ）： 11419 - 11426 .

李冬云，许晶，侯丽等 . 中医药抗肿瘤多药耐药领域的守正创新研究［J］. 医学研究杂志， 2021 ， 50 （ 11 ）： 1 - 4，15 .

张铭，徐振晔，姜唯洁 . 肺岩宁方对晚期非小细胞肺癌患者血清调节性T细胞CD4 + CD25 + 的影响［J］. 辽宁中医杂志， 2006 ， 33 （ 8 ）： 916 - 917 .

张铭，项怡，徐振晔 . 益气养精法结合化疗治疗中晚期老年非小细胞肺癌的临床疗效观察及生存期影响因素分析［J］. 上海中医药杂志， 2013 ， 47 （ 1 ）： 35 - 38 .

殷红梅，王磊，龚伟珏，等 . 中药肺岩宁颗粒调节晚期肺癌患者Th17/Treg失衡的作用［J］. 中医药导报， 2017 ， 23 （ 1 ）： 34 - 38 .

张颖，王淳，于丹，等 . 黄芪多糖抑制肺腺癌A549/DDP细胞移植瘤裸鼠EMT改善顺铂耐药的机制［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 6 ）： 79 - 85 .

周忠光，宫铭海，王晓慧，等 . 黄精多糖药理作用及机制研究进展［J］. 辽宁中医药大学学报， 2021 ， 23 （ 12 ）： 1 - 4 .

梁慧超，唐晖，魏莲 . 灵芝三萜对卵巢癌多耐药蛋白表达的影响［J］. 广东医学， 2013 ， 34 （ 12 ）： 1829 - 1831 .

SHIBUE T ， WEINBERG R A . EMT， CSCs and drug resistance， the mechanistic link and clinical implications ［J］. Nat Rev Clin Oncol ， 2017 ， 14 （ 10 ）： 611 - 629 .

URAMOTO H ， IWATA T ， ONITSUKA T ， et al . Epithelial-mesenchymal transition in EGFR-TKI acquired resistant lung adenocarcinoma ［J］. Anticancer Res ， 2010 ， 30 （ 7 ）： 2513 - 2517 .

王红艳，张雅洁 . 顺铂间歇性干预对A549中干细胞及EMT相关基因表达的影响［J］. 现代肿瘤医学， 2015 ， 23 （ 2 ）： 162 - 165 .

冯征，祖超，张天翼，等 . EMT参与人非小细胞肺癌A549细胞多西紫杉醇耐药性的发生［J］. 现代肿瘤医学， 2015 ， 23 （ 23 ）： 3371 - 3376 .

CATHERINE W ， KATRINA N ， DAISY B et al . Overcoming EMT-associated resistance to anti-cancer drugs via Src/FAK pathway inhibition ［J］. Oncotarget ， 2014 ， 5 （ 17 ）： 7328 - 7341 .

陆怡，张鑫杰，张闰哲，等 . 姜黄素体内外逆转结肠癌的5-氟尿嘧啶耐药研究及机制探讨［J］. 中国现代应用药学， 2020 ， 37 （ 15 ）： 1793 - 1800 .

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