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Effect of Aqueous Extract of Trametes robiniophila on Proliferation of Human Prostate Cancer VCaP Cells

更新时间：2022-01-04

- Effect of Aqueous Extract of Trametes robiniophila on Proliferation of Human Prostate Cancer VCaP Cells
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 28, Issue 1, Pages: 79-84(2022)
- 作者机构：
  
  北京中医药大学中药学院中药现代研究中心，北京 100029
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220123
  CLC： R22;R242;R2-031;R285.5
- Received：15 September 2021，
  
  Published Online：04 November 2021，
  
  Published：05 January 2022
- 稿件说明：
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杨爱琳,刘亚鑫,黄惠铭等.槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞增殖的作用[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(01):79-84.

YANG Ai-lin,LIU Ya-xin,HUANG Hui-ming,et al.Effect of Aqueous Extract of Trametes robiniophila on Proliferation of Human Prostate Cancer VCaP Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(01):79-84.
杨爱琳,刘亚鑫,黄惠铭等.槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞增殖的作用[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(01):79-84. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220123.

YANG Ai-lin,LIU Ya-xin,HUANG Hui-ming,et al.Effect of Aqueous Extract of Trametes robiniophila on Proliferation of Human Prostate Cancer VCaP Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(01):79-84. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220123.

摘要

目的

2

观察槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞自噬的影响及对核纤层蛋白B

1

（Lamin B

1

）表达的调控作用，并探讨其在VCaP细胞增殖中发挥的作用。

方法

2

采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测0，2，4，6，8，10 g·L

-1

槐耳清膏在不同时间下对人前列腺癌VCaP细胞的增殖抑制作用。采用吖啶橙染色法分析槐耳清膏给药对VCaP细胞中自噬溶酶体形成的影响。借助蛋白免疫印迹法（Western blot）检测槐耳清膏给药后细胞中与自噬密切相关的蛋白微管相关蛋白Ⅰ轻链3（LC3），自噬相关蛋白3（Atg3），自噬相关蛋白5（Atg5），自噬相关蛋白7（Atg7）的表达。采用CCK-8法检测槐耳清膏与自噬抑制剂（Bafilomycin A

1

）联合给药及槐耳清膏单独给药对细胞增殖的作用。通过Western blot检测槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞中Lamin B

1

表达的影响，并采用RNA干扰技术探究Lamin B

1

在槐耳抗人前列腺癌VCaP细胞增殖中的作用。

结果

2

与空白组比较，槐耳清膏能抑制人前列腺癌VCaP细胞的增殖（

P<

0.01），且呈时间与浓度依赖性。槐耳清膏给药后可促进VCaP细胞中自噬溶酶体的生成。与空白组比较，槐耳清膏能上调VCaP细胞中与自噬进程密切相关的蛋白LC3-Ⅱ，Atg3，Atg5，Atg7表达水平（

P

<

0.05），槐耳清膏能够诱导VCaP细胞自噬的发生。进一步研究发现抑制自噬能够降低人前列腺癌VCaP细胞对槐耳清膏的敏感性（

P

<

0.05）。与空白组比较，槐耳清膏给药能够抑制人前列腺癌VCaP细胞中Lamin B

1

蛋白表达（

P

<

0.01），下调Lamin B

1

蛋白表达，在一定程度上也能够减弱VCaP细胞对槐耳清膏的敏感性（

P<

0.01）。

结论

2

自噬活化和Lamin B

1

表达下调可能参与了槐耳清膏对人前列腺癌VCaP细胞的增殖抑制作用，能够为槐耳临床应用提供一定的理论基础。

Abstract

Objective

2

To investigate effect of aqueous extract of

Trametes robiniophila

（TRM，Huaier） on autophagy of human prostate cancer VCaP cells and Lamin B

1

expression， so as to uncover its role in the proliferation of VCaP cells.

Method

2

The inhibitory effect of 0， 2， 4， 6， 8， 10 g·L

-1

TRM aqueous extract on the proliferation of human prostate cancer VCaP cells at different time points were determined by cell counting kit-8 （CCK-8） assay. Acridine orange staining was conducted for analyzing the effect of TRM aqueous extract on the formation of autolysosomes in VCaP cells. After medication， the expression of microtubule-associated protein Ⅰ light chain 3 （LC3）， autophagy-related protein 3 （Atg3）， autophagy-related protein 5 （Atg5）， and autophagy-related protein 7 （Atg7） in VCaP cells were detected by Western blot. The effect of TRM aqueous extract alone and its combination with autophagy inhibitor bafilomycin A

1

on the proliferation of VCaP cells were assayed by CCK-8 assay. RNA interference technology was used to explore the role of Lamin B

1

in anti-proliferation of VCaP cells by TRM.

Result

2

Compared with the blank group， TRM aqueous extract inhibited the proliferation of human prostate cancer VCaP cells in a time- and concentration-dependent manner （

P<

0.01）. Acridine orange staining showed that TRM aqueous extract promoted the formation of autolysosomes in VCaP cells. As revealed by Western blotting， TRM aqueous extract up-regulated the expression levels of LC3-Ⅱ， Atg3， Atg5， and Atg7 in contrast to those in the blank group （

P

<

0.05）. All these indicated that TRM aqueous extract induced the autophagy of VCaP cells. In addition， autophagy inhibition impaired the sensitivity of VCaP cells to TRM aqueous extract （

P

<

0.05）. The comparison with the blank group showed that TRM aqueous extract inhibited Lamin B

1

protein expression in VCaP cells （

P

<

0.01）， which in turns weakened the sensitivity of VCaP cells to TRM aqueous extract.

Conclusion

2

TRM aqueous extract inhibited the proliferation of human prostate cancer VCaP cells possibly by inducing autography and down-regulating Lamin B

1

expression. This study has provided a theoretical basis for the clinical application of TRM.

关键词

Keywords

references

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