Application of Three Blood Stasis Models in Zebrafish in Evaluation of Anti-thrombosis and Anti-myocardial Hypoxia Activities of Notoginseng Radix et Rhizoma

Ming-li LI; Bo GAO; Sheng-ya GUO; Chuan LUO; Ming-zhu DAI; Wen-ya GAO; Bao-lin BIAN; Hong-jie WANG; Yan-yan ZHOU; Yong ZHANG; Hai-yu ZHAO

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20220301

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Application of Three Blood Stasis Models in Zebrafish in Evaluation of Anti-thrombosis and Anti-myocardial Hypoxia Activities of Notoginseng Radix et Rhizoma

更新时间：2021-12-31

- Application of Three Blood Stasis Models in Zebrafish in Evaluation of Anti-thrombosis and Anti-myocardial Hypoxia Activities of Notoginseng Radix et Rhizoma
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 28, Issue 3, Pages: 98-108(2022)
- 作者机构：
  
  1.中国中医科学院中药研究所，北京 100700
  2.安徽华润金蟾药业股份有限公司，安徽淮北 235000
  3.杭州环特生物科技有限公司，杭州 310051
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220301
  CLC： R2-0;R22;R285.5;R33
- Received：17 August 2021，
  
  Published Online：26 November 2021，
  
  Published：05 February 2022
- 稿件说明：
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李明利,高波,郭胜亚等.三种斑马鱼血瘀模型在三七抗血栓及抗心肌缺氧能力评价中的应用[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(03):98-108.

LI Ming-li,GAO Bo,GUO Sheng-ya,et al.Application of Three Blood Stasis Models in Zebrafish in Evaluation of Anti-thrombosis and Anti-myocardial Hypoxia Activities of Notoginseng Radix et Rhizoma[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(03):98-108.
李明利,高波,郭胜亚等.三种斑马鱼血瘀模型在三七抗血栓及抗心肌缺氧能力评价中的应用[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(03):98-108. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220301.

LI Ming-li,GAO Bo,GUO Sheng-ya,et al.Application of Three Blood Stasis Models in Zebrafish in Evaluation of Anti-thrombosis and Anti-myocardial Hypoxia Activities of Notoginseng Radix et Rhizoma[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(03):98-108. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220301.

摘要

目的

采用不同诱导剂建立3种斑马鱼血瘀模型，优选最适宜评价三七活血能力的模型。

方法

花生四烯酸（AA），普纳替尼（Ponatinib），异丙肾上腺素（ISO）分别建立斑马鱼血瘀模型，设置正常组、模型组、阳性药组、不同浓度三七水提物冻干粉组，计算心脏红细胞染色强度、心脏凋亡细胞荧光强度，评价三七的抗血栓作用和抗心肌缺氧能力。基于优选的评价三七活血化瘀活性的血瘀模型—AA，ISO诱导的斑马鱼血瘀模型，比对三七水提取物及70%甲醇提取物之间的活性，并采用UHPLC LTQ-Orbitrap MS/MS技术比对其化学成分差异。

结果

AA，Ponatinib诱导后斑马鱼心脏红细胞染色强度显著降低（

0.01），ISO诱导后心脏凋亡细胞荧光强度显著升高（

0.01），三七水提物冻干粉可以拮抗AA模型的血栓形成（

0.01）和ISO模型的心肌凋亡（

0.05），对Ponatinib模型血栓形成无显著改善作用。三七70%甲醇提取物冻干粉可以抑制ISO血瘀模型的心肌凋亡（

0.01），作用强于三七水提物冻干粉，其成分差别主要在于人参皂苷Re等部分皂苷类以及氨基酸类、炔醇等成分。

结论

AA，Ponatinib，ISO均可建立斑马鱼血瘀模型，其中AA和ISO模型可以用于评价三七水提物冻干粉的活血能力。水提和70%甲醇提取三七冻干粉化学成分差异较大，对ISO血瘀模型，70%甲醇提取三七冻干粉抗心肌缺氧能力更强，皂苷、炔醇类成分可能与其活血化瘀功效密切相关。

Abstract

Objective

To establish blood stasis models in zebrafish using three inducers and select the optimal model for evaluating the activity of Notoginseng Radix et Rhizoma in promoting blood circulation.

Method

Arachidonic acid （AA）， ponatinib， and isoprenaline （ISO） were used to induce blood stasis models in zebrafish. A normal group， a model group， a positive drug group， and Notoginseng Radix et Rhizoma water extract freeze-dried powder groups at different concentrations were set up. The staining intensity of cardiac erythrocytes and the fluorescence intensity of cardiac apoptotic cells were calculated， the anti-thrombotic effect and anti-myocardial hypoxia activity of Notoginseng Radix et Rhizoma were evaluated. The activities of water extract and 70% methanol extract of Notoginseng Radix et Rhizoma were compared based on the preferred AA- and ISO-induced blood stasis models in zebrafish and the difference in the chemical composition was analyzed by UHPLC LTQ-Orbitrap MS/MS.

Result

After induction by AA and ponatinib， the staining intensity of cardiac erythrocytes was reduced （

0.01）， and the fluorescence intensity of cardiac apoptotic cells increased after the induction by ISO （

0.01）. The freeze-dried powder of the water extract of Notoginseng Radix et Rhizoma could antagonize the thrombosis in the AA-induced model （

0.01） and the myocardial apoptosis in the ISO-induced model （

0.05）， while no significant improvement in the thrombosis was observed in the ponatinib-induced model. The freeze-dried powder of 70% methanol extract of Notoginseng Radix et Rhizoma

could inhibit myocardial apoptosis in the ISO-induced blood stasis model （

0.01）， and the effect was stronger than that of the freeze-dried powder of

Notoginseng Radix et Rhizoma

water extract. The difference in chemical composition lay in some saponins （such as ginsenoside Re）， amino acids， and acetylenic alcohols.

Conclusion

AA， ponatinib， and ISO all can serve as inducers for the blood stasis model in zebrafish. AA- and ISO-induced models can be used to evaluate the activity of freeze-dried powder of Notoginseng Radix et Rhizoma water extract in promoting blood circulation. The chemical compositions of the freeze-dried powders of Notoginseng Radix et Rhizoma extracted with water and 70% methanol are quite different. For the ISO-induced blood stasis model， the freeze-dried powder of Notoginseng Radix et Rhizoma extracted with 70% methanol has a stronger ability against myocardial hypoxia. Saponins and acetylenic alcohols may be closely related to the effects of promoting blood circulation and resolving blood stasis.

关键词

Keywords

references

王丽娟 . 中药三七药理药效分析及临床应用效果观察［J］. 世界最新医学信息文摘， 2019 ， 19 （ 5 ）： 195 ， 197 .

韩淑娴，游云 . 三七总皂苷心脑血管药理作用及其溶血反应［J］. 中国中药杂志， 2016 ， 41 （ 5 ）： 818 - 822 .

王海燕，容蓉，田景振 . 三七活性成分药理作用及临床应用概述［J］. 山东中医药大学学报， 2014 ， 38 （ 2 ）： 178 - 180 .

LYU J ， XIE Y ， SUN M ， et al . Efficacy and safety of Xueshuantong injection on acute cerebral infarction：clinical evidence and GRADE assessment ［J］. Front Pharmacol ， 2020 ， 11 ： 822 .

WANG F J ， WANG S X ， CHAI L J ， et al . Xueshuantong injection （lyophilized） combined with salvianolate lyophilized injection protects against focal cerebral ischemia/reperfusion injury in rats through attenuation of oxidative stress ［J］. Acta Pharmacol Sin ， 2018 ， 39 （ 6 ）： 998 - 1011 .

WANG T ， GUO R ， ZHOU G ， et al . Traditional uses，botany，phytochemistry，pharmacology and toxicology of Panax notoginseng （Burk.） F.H.Chen：a review ［J］. J Ethnopharmacol ， 2016 ， 188 ： 234 - 258 .

陈红艳，陈安，卢芳国，等 . 三七总皂苷的药理研究进展［J］. 湖南中医杂志， 2019 ， 35 （ 1 ）： 154 - 157 .

项昌培，周瑞，张毅，等 . 三七中皂苷类成分及其抗脑缺血分子机制研究进展［J］. 中国中药杂志， 2020 ， 45 （ 13 ）： 3045 - 3054 .

刘耀晨，张铁军，郭海彪，等 . 三七的研究进展及其质量标志物预测分析［J］. 中草药， 2021 ， 52 （ 9 ）： 2733 - 2745 .

黄加文，李倩，杨和金，等 . 三七止血和活血活性部位的筛选［J］. 云南中医学院学报， 2018 ， 41 （ 6 ）： 12 - 18 .

亓雨青 . 基于化学探针与斑马鱼模型的中药活性成分筛选方法研究［D］. 杭州：浙江大学， 2018 .

陈维武，白玛卓玛，郭胜亚，等 . 二十五味珍珠片对斑马鱼微血管功能的影响［J］. 中国实验方剂学杂志， 2019 ， 25 （ 13 ）： 49 - 54 .

樊娇娇，李发荣，赵崇军，等 . 盐酸肾上腺素诱导建立斑马鱼血栓模型的优化与适用性研究［J］. 环球中医药， 2017 ， 10 （ 6 ）： 663 - 668 .

ZHANG Y ， GUO S Y ， ZHU X Y ， et al . Arachidonic acid induced thrombosis in zebrafish larvae for assessing human anti-thrombotic drugs ［J］. JSM Cell Dev Biol ， 2017 ， 5 （ 1 ）： 1023 .

费倩倩，韦英杰，汪晶，等 . 基于代谢组学研究三七总皂苷在斑马鱼幼鱼中的急性毒性机制［J］. 中国中药杂志， 2019 ， 44 （ 17 ）： 3798 - 3805 .

李铭源.基于斑马鱼平台结合多种模型系统研究三七花皂苷促血管新生作用及机制［Z］. 2016 .

朱晓宇，李春启 . 建立斑马鱼血栓模型的方法及筛选抗栓/致栓药物的方法：浙江， CN102266313A ［P］. 2011-12-07 .

KOSSACK M ， HEIN S ， JUERGENSEN L ， et al . Induction of cardiac dysfunction in developing and adult zebrafish by chronic isoproterenol stimulation ［J］. J Mol Cell Cardiol ， 2017 ， 108 ： 95 - 105 .

JIA L ， ZUO T ， ZHANG C ， et al . Simultaneous profiling and holistic comparison of the metabolomes among the flower buds of Panax ginseng ， Panax quinquefolius ，and Panax notoginseng by UHPLC/IM-QTOF-HDMSE-based metabolomics analysis ［J］. Molecules ， 2019 ， 24 （ 11 ）： 2188 .

赵静，秦振娴，彭冰，等 . 基于UPLC-Q-TOF MS技术的三七中皂苷类成分质谱裂解规律研究［J］. 质谱学报， 2017 ， 38 （ 1 ）： 97 - 108 .

姜志胜 . 心血管病理生理学［M］. 北京：人民卫生出版社， 2020 .

CHEN X ， ZHAO X ， COOPER M ， et al . The roles of GRKs in hemostasis and thrombosis ［J］. Int J Mol Sci ， 2020 ， 21 （ 15 ）： 5345 .

DI CERA E . Thrombin as an anticoagulant ［J］. Prog Mol Biol Transl Sci， 2011 ， 99 ： 145 - 184 .

XU Z ， XU Y ， XIE X ， et al . Anti-platelet aggregation of Panax notoginseng triol saponins by regulating GP1BA for ischemic stroke therapy ［J］. Chin Med ， 2021 ， 16 （ 1 ）： 12 .

VANHOUTTE P M . COX-1 and vascular disease ［J］. Clin Pharmacol Ther ， 2009 ， 86 （ 2 ）： 212 - 215 .

BIJAK M ， SALUK-BIJAK J . Flavonolignans inhibit the arachidonic acid pathway in blood platelets ［J］. BMC Complement Altern Med ， 2017 ， 17 （ 1 ）： 396 .

TROSTCHANSKY A ， MOORE-CARRASCO R ， FUENTES E . Oxidative pathways of arachidonic acid as targets for regulation of platelet activation ［J］. Prostaglandins Other Lipid Mediat ， 2019 ， 145 ： 106382 .

LINA B ， GEMMA V ， BIANCA R ， et al . The key contribution of platelet and vascular arachidonic acid metabolism to the pathophysiology of atherothrombosis ［J］. Cardiovasc Res ， 2021 ， 117 （ 9 ）： 2001 - 2015 .

邹彬镔，石庆之 . 第三代BCR-ABL酪氨酸激酶抑制剂普纳替尼［J］. 中国新药与临床杂志， 2014 ， 33 （ 5 ）： 329 - 333 .

张锦华，郭军 . 心肌细胞损伤模型构建及应用的研究进展［J］. 中南大学学报：医学版， 2020 ， 45 （ 10 ）： 1223 - 1227 .

MEERAN M ， PRINCE P . Protective effects of N-acetyl cysteine on lipid peroxide metabolism on isoproterenol-induced myocardial infarcted rats ［J］. J Biochem Mol Toxicol ， 2011 ， 25 （ 3 ）： 151 - 157 .

秦小妹，郭帅杰，李悦，等 . 斑马鱼模型在中药心血管药理学研究中的应用［J］. 世界中医药， 2021 ， 16 （ 15 ）： 2358 - 2361 .

高维明，周原，任小宇 . 三七茎叶皂苷对异丙肾上腺素诱导大鼠急性心肌缺血的保护作用［J］. 现代药物与临床， 2019 ， 34 （ 6 ）： 1615 - 1619 .

ZOU X ， LIU Q ， GUO S ， et al . A novel zebrafish larvae hypoxia/reoxygenation model for assessing myocardial ischemia/reperfusion injury ［J］. Zebrafish ， 2019 ， 16 （ 5 ）： 434 - 442 .

MENG Y ， DU Z ， LI Y ， et al . The synergistic mechanism of total saponins and flavonoids in Notoginseng Safflower pair against myocardial ischemia uncovered by an integrated metabolomics strategy ［J］. Biomed Pharmacother ， 2020 ， 130 ： 110574 .

LIU X W ， LU M K ， ZHONG H T ， et al . Panax notoginseng saponins attenuate myocardial ischemia-reperfusion injury through the HIF-1 α /BNIP3 pathway of autophagy ［J］. J Cardiovasc Pharmacol ， 2019 ， 73 （ 2 ）： 92 - 99 .

王全伟 . 人参皂苷Re对异丙肾上腺素诱导大鼠心肌缺血损伤的保护作用及机制［D］. 长春：吉林大学， 2020 .

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