Effect of Hirsutine on Proliferation， Apoptosis， Metastasis， and Invasion of Human Cervical Cancer Ca Ski Cells

Ya-wei LI; Lei XIE; Na WANG

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20220323

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Effect of Hirsutine on Proliferation， Apoptosis， Metastasis， and Invasion of Human Cervical Cancer Ca Ski Cells

更新时间：2022-01-13

- Effect of Hirsutine on Proliferation， Apoptosis， Metastasis， and Invasion of Human Cervical Cancer Ca Ski Cells
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 28, Issue 4, Pages: 109-115(2022)
- 作者机构：
  
  河北医科大学第一医院，石家庄 050000
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220323
  CLC： R22;R242;R2-031;R285.5
- Received：09 October 2021，
  
  Published Online：26 November 2021，
  
  Published：20 February 2022
- 稿件说明：
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李亚威,谢磊,王娜.毛钩藤碱对人宫颈癌Ca Ski细胞增殖、凋亡、转移及侵袭的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(04):109-115.

LI Ya-wei,XIE Lei,WANG Na.Effect of Hirsutine on Proliferation， Apoptosis， Metastasis， and Invasion of Human Cervical Cancer Ca Ski Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(04):109-115.
李亚威,谢磊,王娜.毛钩藤碱对人宫颈癌Ca Ski细胞增殖、凋亡、转移及侵袭的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(04):109-115. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220323.

LI Ya-wei,XIE Lei,WANG Na.Effect of Hirsutine on Proliferation， Apoptosis， Metastasis， and Invasion of Human Cervical Cancer Ca Ski Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(04):109-115. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220323.

摘要

目的

探讨毛钩藤碱对人宫颈癌Ca Ski细胞增殖、凋亡、转移、侵袭的影响及机制。

方法

细胞活性与增殖检测（CCK-8）法检测细胞增殖活性，Hoechst 33258染色及流式细胞术检测细胞凋亡，实时荧光定量聚合酶链式反应检测B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2），Bcl-2相关X蛋白（Bax），p53 mRNA表达，划痕实验检测细胞转移能力，Transwell小室实验检测细胞侵袭能力，酶联免疫吸附测定（ELISA）检测纤连蛋白（FN），基质金属蛋白酶-2（MMP-2）及基质金属蛋白酶-9（MMP-9）含量，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测蛋白表达。

结果

与空白组比较，毛钩藤碱可以呈剂量及时间依赖性的抑制Ca Ski细胞的增殖；8.0，16.0，32.0 μmol·L

-1

毛钩藤碱组细胞凋亡率，Bax，p53 mRNA表达增加（

0.05，

0.01），Bcl-2 mRNA及磷酸化Src（p-Src），磷酸化信号转导和转录活化因子3（p-STAT3）蛋白表达降低（

0.05，

0.01）。与空白组比较，1.0，2.0，4.0 μmol·L

-1

毛钩藤碱组细胞迁移率，穿膜细胞数，FN，MMP-2，MMP-9含量及缺氧诱导因子-1

（HIF-1

），波形蛋白（Vimentin），N-钙黏蛋白（N-cadherin）表达降低（

0.05，

0.01），E-钙黏蛋白（E-cadherin）表达增加（

0.01）。

结论

毛钩藤碱可以抑制人宫颈癌Ca Ski细胞的增殖、转移及侵袭，并能诱导凋亡，作用机制与调控Src/STAT3及HIF-1

/上皮间充质转化（EMT）信号通路有关。

Abstract

Objective

To investigate the effects of hirsutine on proliferation， apoptosis， metastasis， and invasion of human cervical cancer Ca Ski cells and its action mechanism.

Method

The cell proliferation was determined by cell counting kit-8 （CCK-8） assay and the cell apoptosis by Hoechst 33258 staining and flow cytometry. The mRNA expression levels of B cell lymphoma-2 （Bcl-2）， Bcl-2-associated X protein （Bax）， and p53 were detected by real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction. The scratch test was conducted to detect the cell mobility， followed by the detection of cell invasion ability using a Transwell chamber. The contents of fibronectin （FN）， matrix metalloproteinase-2 （MMP-2）， and matrix metalloproteinase-9 （MMP-9） were measured by enzyme linked immunosorbent assay （ELISA）， and their protein expression levels were assayed by Western blot.

Result

Compared with the control group， hirsutine inhibited the proliferation of Ca Ski cells in a dose- and time-dependent manner. The apoptosis rates and Bax and p53 mRNA expression levels in the 8.0， 16.0， 32.0 μmol·L

-1

hirsutine groups rose （

0.05，

0.01）， while the Bcl-2 mRNA expression and phosphorylated Src （p-Src） and phosphorylated signal transducer and activator of transcription factor 3 （STAT3） protein expression declined （

0.05，

0.01）. Compared with the control group， the 1.0， 2.0， 4.0 μmol·L

-1

hirsutine groups exhibited lowered cell mobility， number of transmembrane cells， FN， MMP-2 and MMP-9 contents， and hypoxia inducible factor-1

（HIF-1

）， Vimentin， and N-cadherin protein expression （

0.05，

0.01）， but elevated E-cadherin protein expression （

0.01）.

Conclusion

Hirsutine inhibits the proliferation， metastasis， and invasion of human cervical cancer Ca Ski cells and induces their apoptosis， which may be related to its regulation of Src/STAT3 and HIF-1

/epithelial mesenchymal transformation （EMT） signaling pathways.

关键词

Keywords

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