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Intervention Mechanism of Xiaoluowan on Experimental Goiter Rats Based on PI3K/Akt/mTORC1 Pathway
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 28, Issue 8, Pages: 30-36(2022)
- 作者机构：
哈尔滨商业大学 药学院，哈尔滨 150076
- 作者简介：
- 基金信息：
DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220603
CLC： R2-0;R22;R285.5;R284;R33Received：27 September 2021，
Published Online：17 January 2022，
Published：20 April 2022
- 稿件说明：
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梁伟,孙禹,陈丽新等.消瘰丸基于PI3K/Akt/mTORC1通路对实验性甲状腺肿大鼠的干预机制[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(08):30-36.
LIANG Wei,SUN Yu,CHEN Li-xin,et al.Intervention Mechanism of Xiaoluowan on Experimental Goiter Rats Based on PI3K/Akt/mTORC1 Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(08):30-36.
梁伟,孙禹,陈丽新等.消瘰丸基于PI3K/Akt/mTORC1通路对实验性甲状腺肿大鼠的干预机制[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(08):30-36. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220603.
LIANG Wei,SUN Yu,CHEN Li-xin,et al.Intervention Mechanism of Xiaoluowan on Experimental Goiter Rats Based on PI3K/Akt/mTORC1 Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(08):30-36. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220603.
摘要
目的
2
通过观察消瘰丸对实验性甲状腺肿大鼠磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B（Akt）/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合物1（mTORC1）通路的影响，探究其对实验性甲状腺肿大鼠的治疗效果。
方法
2
购买60只5月龄SPF级SD大鼠，雌雄各半，其中10只作为正常组，其余大鼠灌服丙基硫氧嘧啶（PTU）溶液构建结节性甲状腺肿大鼠模型，建模成功后随机分为模型组、左甲状腺素钠片组、消瘰丸低、中、高剂量组各10只。左甲状腺素钠片组采用15 μg·kg
-1
的左甲状腺素钠片灌胃，消瘰丸低、中、高剂量组分别采用低剂量10 g·kg
-1
、中剂量20 g·kg
-1
、高剂量30 g·kg
-1
消瘰丸灌胃，正常组、模型组采用等体积0.9%氯化钠溶液灌胃。干预4周后采用5%苯巴比妥做常规腹腔注射麻醉后处死，显微镜观察大鼠病理组织学、采用罗氏电化学发光免疫分析仪检测血清甲状腺激素水平、酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清细胞生长因子、采用高效液相色谱仪检测神经递质、蛋白免疫印迹法（Western blot）检测PI3K/Akt/mTORC1信号通路蛋白表达量。
结果
2
与正常组比较，模型组碱性成纤维生长因子（bFGF）、血管内皮生长因子（VEGF）、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）、5-羟色胺（5-HT）、促甲状腺激素（TSH）水平、PI3K、Akt、mTORC1蛋白表达量升高，去甲肾上腺素（NE）、三碘甲腺原氨酸（T
3
）、四碘甲腺原氨酸（T
4
）、游离三碘甲状腺原氨酸（FT
3
）、游离甲状腺激素（FT
4
）水平降低（
P
<
0.05）；与模型组比较，左甲状腺素钠片组、消瘰丸低、中、高剂量组bFGF、VEGF、IGF-1、5-HT、TSH水平，PI3K、Akt、mTORC1蛋白表达量降低，NE、T
3
、T
4
、FT
3
、FT
4
水平升高（
P
<
0.05）；左甲状腺素钠片组比较，消瘰丸低、中、高剂量组bFGF、VEGF、IGF-1、5-HT、TSH水平，PI3K、Akt、mTORC1蛋白表达量降低，NE、T
3
、T
4
、FT
3
、FT
4
水平升高（
P
<
0.05）。
结论
2
消瘰丸可能作用于PI3K/Akt/mTORC1信号通路，发挥其治疗结节性甲状腺肿的作用，且表现为剂量依赖。
Abstract
Objective
2
By observing the effect of Xiaoluowan on phosphatidylinositol 3-kinase （PI3K）/protein kinase B （Akt）/mammalian target of rapamycin complex 1 （mTORC1） pathway in experimental goiter rats， this study aims to explore its therapeutic effect on experimental goiter rats.
Method
2
Sixty 5-month-old SD rats of SPF grade were purchased， half males and half females， of which 10 were used as a normal group， and the remaining rats were administrated with propylthiouracil （PTU） solution to induce nodular goiter. After successful modeling， rats were randomly divided into a model group， levothyroxine sodium tablets group， Xiaoluowan low-dose group， medium-dose group， and high-dose group， ten rats each. The levothyroxine sodium tablets group was given 15 μg·kg
-1
levothyroxine sodium tablets by gavage. The Xiaoluowan low-， medium-， and high-dose groups were given （
ig
） Xiaoluowan low-dose （10 g·kg
-1
）， medium-dose （20 g·kg
-1
）， and high-dose （30 g·kg
-1
） Xiaoluowan， and the normal group and model group were administered （
ig
） with the same volume of 0.9% sodium chloride solution. Four weeks after the intervention， rats were sacrificed by routine intraperitoneal anesthesia using 5% phenobarbital. Subsequently， the histopathology was observed under a microscope， and serum thyroid hormone levels were measured using a Roche electrochemiluminescence immunoassay analyzer. Serum cytokines were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）， and neurotransmitters were measured using a high-performance liquid chromatograph. The protein level of PI3K/Akt/mTORC1 pathway was determined by Western blot.
Result
2
As compared with the normal group， the levels of basic fibroblast growth factor （bFGF）， vascular endothelial growth factor （VEGF）， insulin-like growth factor （IGF-1）， 5-hydroxytryptamine （5-HT）， and thyroid stimulating hormone （TSH） were increased， and PI3K， Akt， and mTORC1 protein levels were up-regulated in the model group， while the levels of norepinephrine （NE）， triiodothyronine （T
3
）， tetraiodothyronine （T
4
）， free triiodothyronine （FT
3
）， and free thyroid hormone （FT
4
） were decreased （
P
<
0.05）. Compared with the model group， the levothyroxine sodium tablets group， and Xiaoluowan low-， medium-， and high-dose groups exhibited reduced levels of bFGF， VEGF， IGF-1， 5-HT， and TSH， and down-regulated PI3K， Akt， and mTORC1 protein levels， and increased NE， T
3
， T
4
， FT
3
， and FT
4
levels （
P
<
0.05）.
Conclusion
2
Xiaoluowan may act on the PI3K/Akt/mTORC1 signaling pathway to play its role in the treatment of nodular goiter， and it is dose-dependent.
关键词
Keywords
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