Effect of Shufeng Tongluo Prescription on Eotaxin and CCR3 Protein Expression and ERK Phosphorylation Level of Asthma Mice

Chaowu LIU; Jie WANG; Wei XIONG; Yue WANG; Zhengang ZHU

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20220608

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Effect of Shufeng Tongluo Prescription on Eotaxin and CCR3 Protein Expression and ERK Phosphorylation Level of Asthma Mice

更新时间：2022-09-01

- Effect of Shufeng Tongluo Prescription on Eotaxin and CCR3 Protein Expression and ERK Phosphorylation Level of Asthma Mice
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 28, Issue 14, Pages: 54-60(2022)
- 作者机构：
  
  1.天津中医药大学第一附属医院，国家中医针灸临床医学研究中心，天津 300381
  2.唐山市中医院，河北唐山 063000
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220608
  CLC： R2-0;R22;R285.5;R284;R33
- Received：09 November 2021，
  
  Published Online：14 January 2022，
  
  Published：20 July 2022
- 稿件说明：
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刘超武,王洁,熊桅等.疏风通络方对哮喘小鼠模型Eotaxin、CCR3蛋白表达及ERK磷酸化的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(14):54-60.

LIU Chaowu,WANG Jie,XIONG Wei,et al.Effect of Shufeng Tongluo Prescription on Eotaxin and CCR3 Protein Expression and ERK Phosphorylation Level of Asthma Mice[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(14):54-60.
刘超武,王洁,熊桅等.疏风通络方对哮喘小鼠模型Eotaxin、CCR3蛋白表达及ERK磷酸化的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(14):54-60. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220608.

LIU Chaowu,WANG Jie,XIONG Wei,et al.Effect of Shufeng Tongluo Prescription on Eotaxin and CCR3 Protein Expression and ERK Phosphorylation Level of Asthma Mice[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(14):54-60. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220608.

摘要

目的

初步探讨疏风通络方通过影响哮喘小鼠模型血清嗜酸细胞活化趋化因子（Eotaxin）及肺组织CC类趋化因子受体3（CCR3）、细胞外信号调节激酶（ERK）磷酸化的表达水平进而抑制哮喘气道炎症的机制。

方法

将70只C57BL/6小鼠随机分成正常组、哮喘模型组、疏风通络方低、中、高剂量组（7.75、15.5、30 g·kg

-1

）、百日咳素（PTX）组、CCR3抑制剂（SB328437）组、磷脂酰肌醇3-激酶抑制剂（LY294002）组、p38蛋白激酶拮抗剂抑制剂（SB203580）组、ERK抑制剂（PD98059）组。采用卵清蛋白（OVA）、氢氧化铝［Al（OH）

］腹腔注射+OVA雾化建立小鼠哮喘模型（均为0.2 mL）。造模成功后，应用苏木素-伊红（HE）染色观察小鼠各组肺组织炎症浸润情况、酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组小鼠血清中的Eotaxin［CC类趋化因子11（CCL11）、CC类趋化因子24（CCL24）］的水平；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肺组织ERK磷酸化水平及CCR3含量。

结果

与正常组比较，模型小鼠支气管明显收缩，管腔狭窄，肺泡结构破坏，肺组织中可见大量炎性细胞浸润，支气管内可见黏液栓，气管黏膜下组织水肿，皱襞增多等表现，小鼠血清中CCL11、CCL24的含量显著增加（

0.01），肺组织中CCR3蛋白的表达量明显增高（

0.05），模型组、PTX组肺组织中的ERK水平明显升高（

0.05），模型组、疏风通络方低剂量组肺组织中磷酸化（p）-ERK的水平明显升高（

0.05）；与模型组比较，病理显示疏风通络方高剂量组肺组织病变明显减轻；疏风通络方高剂量组、SB328437组CCL11含量明显降低（

0.05），疏风通络方低、高剂量组、PTX组、SB203580组、PD98059组、SB328437组小鼠肺组织中CCR3蛋白的表达明显降低（

0.05）；疏风通络方高剂量组、PD98059组p-ERK的水平明显降低（

0.05）；PD98059组的ERK水平明显降低（

0.05）。

结论

疏风通络方可以抑制哮喘气道炎症，其机制可能与其通过下调CCR3蛋白、CCL11的表达及ERK磷酸化抑制嗜酸性粒细胞活化有关。

Abstract

Objective

To preliminarily explore the mechanism of Shufeng Tongluo prescription （SFTLP） in inhibiting airway inflammation in asthma mice by affecting the expression levels of eotaxin in the serum， CC type chemokine receptor 3 （CCR3）， and extracellular signal-regulated kinase （ERK） phosphorylation in lung tissues.

Method

Seventy C57BL/6 mice were randomly divided into a blank group， a model group， low-， medium-， and high-dose SFTLP groups （7.75， 15.5， 30 g·kg

-1

）， a pertussis toxin （PTX） group， a CCR3 inhibitor （SB328437） group， a phosphoinositide 3-kinase （PI3K） inhibitor （LY294002） group， a p38 protein kinase antagonist inhibitor （SB203580） group， and an ERK inhibitor （PD98059） group. The asthma model was induced in mice by intraperitoneal injection of ovalbumin （OVA） and aluminum hydroxide ［Al（OH）

］ combined with OVA atomization （0.2 mL for all）. After modeling， hematoxylin-eosin staining （HE staining） was used to observe the inflammatory infiltration of lung tissues in mice. Enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA） was used to detect the serum levels of eotaxin ［CC chemokine ligand （CCL） 11 and CCL24） in each group. Western blot was used to detect the levels of ERK phosphorylation and CCR3 in lung tissues.

Result

Compared with the blank group， the model group showed obvious bronchial constriction， lumen stenosis， damaged alveolar structure， massive inflammatory cell infiltration in lung tissues， mucous plug in the bronchus， edema in the submucosal tissues of the trachea， increased folds， increased serum levels of CCL11 and CCL24 （

0.01）， and increased expression of CCR3 protein in lung tissues （

0.05）. The ERK levels in lung tissues of the model group and the PTX group increased （

0.05）. The level of p-ERK in lung tissues of the model group and the low-dose SFTLP group increased （

0.05）. As revealed by pathological results， compared with the model group， the high-dose SFTLP group showed relieved lung lesions. The high-dose SFTLP group and the SB328437 group showed reduced CCL11 content （

0.05）. The low- and high-dose SFTLP group， the PTX group， the SB203580 group， the PD98059 group， and the SB328437 group showed decreased CCR3 protein expression in lung tissues （

0.05）. The high-dose SFTLP group and the PD98059 group showed reduced p-ERK level （

0.05）. The PD98059 group showed reduced ERK level （

0.05）.

Conclusion

SFTLP can inhibit airway inflammation in asthma， and the mechanism may be related to the inhibition of eosinophil activation by down-regulating CCR3 and CCL11 expression and ERK phosphorylation.

关键词

Keywords

references

KEWU H ， TING Y ， JIANYING X ， et al . Prevalence， risk factors， and management of asthma in China： A national cross-sectional study ［J］. Lancet ， 2019 ， 394 （ 10196 ）： 407 - 418 .

贲素琴，沈华浩 . 趋化性细胞因子与支气管哮喘气道内嗜酸粒细胞的募集与活化［J］. 国外呼吸杂志， 2006 ， 26 （ 5 ）： 337 - 340 .

王硕，王真奎，张婉莹，等 . 小鼠哮喘发作过程中相关炎症因子的动态变化［J］. 现代生物医学进展， 2019 ， 19 （ 18 ）： 3428 - 3431 .

林江涛，王文巧，周新，等 . 我国30个省市城区门诊支气管哮喘患者控制水平的调查结果［J］. 中华结核和呼吸杂志 2017 ， 40 （ 7 ）： 494 - 498 .

OZLEM C ， DOGUS V ， EBRU A Y ， et al . Evidence of hypothalamic-pituitary-adrenal axis suppression during moderate-to-high-dose inhaled corticosteroid use ［J］. Eur J Pediatr ， 2015 ， 174 （ 11 ）： 1421 - 1423 .

张慧琪，刘桂颖，尹新中，等 . 疏风通络方对哮喘大鼠不同时相外周血和肺泡灌洗液嗜酸细胞数量变化的影响［J］. 中华中医药学刊， 2013 ， 11 ： 2365 - 2368 .

刘贵颖，张慧琪，尹新中，等 . 疏风通络方对哮喘大鼠嗜酸细胞跨膜迁移相关因子VCAM-1/PI3K/Rac-1/NOX2/NOX4/SHP-2表达影响的研究［J］. 天津中医药， 2013 ， 3 ： 159 - 163 .

张慧琪，刘贵颖，尹新中，等 . 疏风通络方对哮喘大鼠肺组织嗜酸细胞浸润影响随机平行对照研究［J］. 实用中医内科杂志， 2013 ， 6 ： 76 - 79 .

HUAHAO S . Eosinophil：Central mediator of allergic asthma？［J］. Chin Med J （Engl）， 2005 ， 118 （ 1 ）： 4 - 5 .

FRICKER M ， MCDONALD V M ， WINTER N A ， et al . Molecular markers of type 2 airway inflammation are similar between eosinophilic severe asthma and eosinophilic chronic obstructive pulmonary disease ［J］. Allergy ， 2021 ， 76 （ 7 ）： 2079 - 2089 .

NELSON R K ， BUSH A ， STOKRS J ， et al . Eosinophilic asthma ［J］. J Allergy Clin Immunol Pract ， 2020 ， 8 （ 2 ）： 465 - 473 .

VAN H G ， BUREAU F ， DESMET C J . Eosinophils as drivers of severe eosinophilic asthma：Endotypes or plasticity？［J］. Int J Mol Sci ， 2021 ， 22 （ 18 ）： 10150 .

HEANEY L G ， PEREZ DE LLANO L ， AL-AHMAD M ， et al . Eosinophilic and noneosinophilic asthma：An expert consensus framework to characterize phenotypes in a global real-life severe asthma cohort ［J］. Chest ， 2021 ， 160 （ 3 ）： 814 - 830 .

WELLEMANS V ， BENHASSOU H A ， FUSELIER E ， et al . Role of CCR3 in respiratory syncytial virus infection of airway epithelial cells ［J］. iScience ， 2021 ， 24 ： 103433 .

GANZALO J A ， JIA G Q ， AGUIRRE V ， et al . Mouse Eotaxin expression parallels eosinophil accumulation during lung allergic inflammation but it is not restricted to a Th2-type response ［J］. Immunity ， 1996 ， 4 （ 1 ）： 1 - 14 .

王丽娜，付英霞，张风林，等 . 成人哮喘患者血清Periostin、Eotaxin、STAT3水平与气道高反应性的相关性研究［J］. 检验医学与临床， 2017 ， 14 （ 2 ）： 249 - 251 .

徐淑云 . 药理实验方法学［M］. 北京：人民卫生出版社， 2002 .

马子风，尹磊淼，冉君，等 . 小鼠过敏性哮喘模型制备的特点分析［J］. 东南大学学报：医学版， 2014 （ 5 ）： 650 - 655 .

中华医学会呼吸病学分会哮喘学组 . 支气管哮喘防治指南［J］. 中华结核和呼吸杂志， 2016 ， 39 （ 9 ）： 675 - 697 .

HOGAN M B ， WEISSMAN D N ， HUBBS A F ， et al . Regulation of eosinophilopoiesis in a murine model of asthma ［J］. J Immunol ， 2003 ， 171 （ 5 ）： 2644 - 2651 .

TEAL S H ， YING L ， WILLIAM R H ， et al . Epithelial regulation of eicosanoid production in asthma ［J］. Pulm Pharmacol Ther ， 2012 ， 25 （ 6 ）： 432 - 437 .

李红丽，唐雪春，任珍翠，等 . 哮喘中医证候与外周血及气道嗜酸性粒细胞的相关性研究［J］. 广州中医药大学学报， 2021 ， 38 （ 2 ）： 241 - 245 .

WECHSLER M E ， MUNITZ A ， ACKERMAN S J ， et al . Eosinophils in health and disease：A state-of-the-art review ［J］. Mayo Clin Proc ， 2021 ， 96 （ 10 ）： 2694 - 2707 .

王利玲，吴强鹏，程黎 . 抗菌肽LL-37激活嗜酸性粒细胞释放炎性递质对哮喘的发病机制研究［J］. 医学研究生学报， 2017 ， 30 （ 1 ）： 70 - 76 .

HELENE F R ， SIMON P ， PAUL S F ， et al . Eosinophil trafficking in allergy and asthma ［J］. J Allergy Clin Immunol ， 2007 ， 119 （ 6 ）： 1303 - 1310 .

李中燕，邓俊，熊彬，等 . 麻黄碱对TNF- α 诱导人支气管上皮细胞eotaxin表达的影响［J］. 重庆医学， 2016 ， 45 （ 8 ）： 1016 - 1018 .

韩超，杨柳，张秋玲，等 . 黄芩苷对哮喘大鼠气道重塑作用的实验研究［J］. 中国临床药理学与治疗学， 2017 ， 22 （ 7 ）： 749 - 754 .

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