Effect of Hedysarum Polysaccharides on Bcl-2/Caspase-3 Signaling Pathway of Schwann Cells Cultured in High Glucose

Yan-xu CHEN; Zhi-sheng JIN; Liu HE; Chang-qing XU; Cai-yun JIN; Lei ZHANG; Xiao-xue JIANG; Peng-fei HUAN

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20220694

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Effect of Hedysarum Polysaccharides on Bcl-2/Caspase-3 Signaling Pathway of Schwann Cells Cultured in High Glucose

更新时间：2022-02-15

- Effect of Hedysarum Polysaccharides on Bcl-2/Caspase-3 Signaling Pathway of Schwann Cells Cultured in High Glucose
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 28, Issue 6, Pages: 71-78(2022)
- 作者机构：
  
  1.甘肃中医药大学，兰州 730000
  2.贵州中医药大学第二附属医院，贵阳 550000
  3.上海中医药大学，上海 200000
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220694
  CLC： R22;R242;R285.5;R2-031;R966;R587.1
- Received：04 June 2021，
  
  Published Online：10 January 2022，
  
  Published：20 March 2022
- 稿件说明：
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陈彦旭,金智生,何流等.红芪多糖对高糖培养下雪旺细胞Bcl-2/Caspase-3信号通路的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(06):71-78.

CHEN Yan-xu,JIN Zhi-sheng,HE Liu,et al.Effect of Hedysarum Polysaccharides on Bcl-2/Caspase-3 Signaling Pathway of Schwann Cells Cultured in High Glucose[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(06):71-78.
陈彦旭,金智生,何流等.红芪多糖对高糖培养下雪旺细胞Bcl-2/Caspase-3信号通路的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(06):71-78. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220694.

CHEN Yan-xu,JIN Zhi-sheng,HE Liu,et al.Effect of Hedysarum Polysaccharides on Bcl-2/Caspase-3 Signaling Pathway of Schwann Cells Cultured in High Glucose[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(06):71-78. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220694.

摘要

目的

通过观察红芪多糖（HPS）对高糖培养下雪旺细胞（SCs）B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶-3（Caspase-3）、Bcl-2相关X蛋白（Bax）信号通路的影响，探讨HPS在治疗糖尿病周围神经病变（DPN）过程中可能的作用机制。

方法

选取出生5~7 d的SD乳鼠4只，随机分为正常组、高糖组、HPS+高糖组、

α-

硫辛酸（

-LA）+高糖组，从坐骨神经部位提取SCs，放入37 ℃，5% CO

培养箱中培养，待细胞达整瓶的80%后，细胞增殖与活性检测（CCK-8）法筛适宜高糖，HPS及

-LA干预的实验浓度，蛋白免疫印迹法（Western blot），实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测Bcl-2、Bax、Caspase-3蛋白与mRNA的表达情况，膜联蛋白V-异硫氰酸荧光素（Annexin V-FITC）/碘化丙锭（PI）法流式细胞术检测各组SCs的凋亡率。

结果

Western blot，Real-time PCR检测结果显示，与正常组比较，高糖组Bcl-2蛋白及mRNA表达水平降低，Bax、Caspase-3蛋白及mRNA表达水平升高，差异有统计学意义（

0.01）；与高糖组比较，HPS+高糖组、

-LA+高糖组的Bcl-2蛋白及mRNA表达水平明显升高，Bax、Caspase-3蛋白及mRNA表达水平明显降低，差异有统计学意义（

0.01）。Annexin V/PI法流式细胞术检测结果显示，与正常组比较，高糖组SCs凋亡率明显增加；与高糖组比较，HPS+高糖组和

-LA+高糖组SCs凋亡率显著降低，差异有统计学意义（

0.01）。

结论

HPS可以减轻SCs凋亡反应状态，其作用机制可能与抑制Bcl-2/Caspase-3信号通路激活有关。

Abstract

Objective

To observe the effects of Hedysarum polysaccharides（HPS）on the signaling pathways of B-cell lymphoma 2 （Bcl-2）， cysteinyl aspartate-specific protease 3 （Caspase-3）， and Bcl-2-associated X protein （Bax） in Schwann cells（SCs）cultured in high glucose，and explore the possible mechanism of HPS against diabetic peripheral neuropathy（DPN）.

Method

Four SD suckling mice aged 5-7 days were randomly divided into a normal group，a high-glucose group，an HPS + high-glucose group，and an

-lipoic acid（

-LA）+ high-glucose group. SCs were extracted from the sciatic nerve and cultured in a 37 ℃，5% CO

incubator. After the cells reached 80% confluence，Cell Counting Kit-8（CCK-8）was used to screen the experimental concentrations suitable for high glucose，HPS， and α-LA interventions. Western blot and Real-time polymerase chain reaction （Real-time PCR）were used to detect the protein and mRNA expression of Bcl-2，Bax，and Caspase-3. The apoptosis rate of SCs was detected by flow cytometry using Annexin V-fluorescein isothiocyanate （FITC）/propidium iodide （PI）.

Result

As revealed by Western blot and real-time PCR，compared with the normal group，the high-glucose group showed reduced protein and mRNA expression of Bcl-2 and increased protein and mRNA expression of Bax and Caspase-3（

0.01）. Compared with the high-glucose group，the HPS + high-glucose group and the

-LA + high-glucose group showed increased protein and mRNA expression of Bcl-2 and decreased protein and mRNA expression of Bax and Caspase-3（

0.01）. As displayed by the results of flow cytometry using Annexin V/PI， compared with the normal group，the high-glucose group showed increased apoptosis rate；compared with the high-glucose group，the HPS + high-glucose group and the

-LA + high-glucose group showed reduced apoptosis rate（

0.01）.

Conclusion

HPS can alleviate the apoptotic response of SCs，and its mechanism may be related to the inhibition of the activation of the Bcl-2/Caspase-3 signaling pathway.

关键词

Keywords

references

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