Effect of Huangqi Guizhi Wuwutang on Diabetic Peripheral Neuropathy in MKR Mice via Regulating Endoplasmic Reticulum Stress

Fan XIAO; Cong ZHOU; Miao CAO; Yan TAN; Jinwei YANG; Qin XIANG; Xiu LIU; Rong YU

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20220807

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Effect of Huangqi Guizhi Wuwutang on Diabetic Peripheral Neuropathy in MKR Mice via Regulating Endoplasmic Reticulum Stress

更新时间：2022-07-14

- Effect of Huangqi Guizhi Wuwutang on Diabetic Peripheral Neuropathy in MKR Mice via Regulating Endoplasmic Reticulum Stress
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 28, Issue 16, Pages: 1-8(2022)
- 作者机构：
  
  1.湖南中医药大学，长沙 410208
  2.中医方证研究转化医学湖南省重点实验室，长沙 410208
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220807
  CLC： R2-0;R22;R285.5;R289;R33
- Received：27 November 2021，
  
  Published Online：18 February 2022，
  
  Published：20 August 2022
- 稿件说明：
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肖凡,周聪,曹淼等.黄芪桂枝五物汤通过调节内质网应激对MKR小鼠糖尿病周围神经病变的作用[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(16):1-8.

XIAO Fan,ZHOU Cong,CAO Miao,et al.Effect of Huangqi Guizhi Wuwutang on Diabetic Peripheral Neuropathy in MKR Mice via Regulating Endoplasmic Reticulum Stress[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(16):1-8.
肖凡,周聪,曹淼等.黄芪桂枝五物汤通过调节内质网应激对MKR小鼠糖尿病周围神经病变的作用[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(16):1-8. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220807.

XIAO Fan,ZHOU Cong,CAO Miao,et al.Effect of Huangqi Guizhi Wuwutang on Diabetic Peripheral Neuropathy in MKR Mice via Regulating Endoplasmic Reticulum Stress[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(16):1-8. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220807.

摘要

目的

探讨黄芪桂枝五物汤通过调控内质网应激c-Jun氨基末端激酶（JNK）信号通路相关蛋白治疗糖尿病周围神经病变的作用机制。

方法

8周龄骨骼肌特异性胰岛素样生长因子-1受体功能缺失小鼠（MKR小鼠）32只，雌雄各半，予高脂饲料喂养4周后，1%链脲佐菌素（STZ）连续腹腔注射5 d；血糖稳定后，每天将小鼠放入铺满冰袋的喂养笼，使其在冰上活动1 h，持续4周。将空腹血糖值≥11.1 mmol·L

-1

的小鼠随机分为模型组、黄芪桂枝五物汤原方剂量组（30 g·kg

-1

·d

-1

）、黄芪桂枝五物汤方剂学剂量组（6.25 g·kg

-1

·d

-1

）、阳性药物（甲钴胺）组（0.17 mg·kg

-1

·d

-1

）。另设同龄MKR鼠8只作为空白组；FVB鼠8只作为正常组。各组灌胃药物4周后，测定小鼠空腹血糖（FBG）的变化，苏木素-伊红（HE）染色和透射电镜对坐骨神经组织形态进行观察，免疫组化法、蛋白免疫印迹法（Western blot）检测坐骨神经组织内质网应激相关蛋白JNK、磷酸化c-Jun氨基末端激酶（p-JNK）与肌醇需求激酶1

蛋白（IRE1

）的表达变化。

结果

小鼠行为学与功能学检测显示，与正常组和空白组比较，模型组小鼠缩足舔足、甩尾时间显著缩短（

0.01），坐骨神经传导速度显著降低（

0.01）；与模型组比较，黄芪桂枝五物汤处理后，能够明显改善小鼠行为学与功能学检测指标（

0.05，

0.01）。免疫组化结果显示，与正常组和空白组比较，模型组小鼠JNK的表达明显升高（

0.05）；与模型组比较，黄芪桂枝五物汤处理后，JNK的表达明显降低（

0.05），但给药组之间差异无统计学意义。Western blot结果显示，与正常组和空白组比较，模型组小鼠坐骨神经IRE1

、p-JNK蛋白表达有不同程度的明显升高（

0.05，

0.01）；与模型组比较，黄芪桂枝五物汤可以相应下调模型小鼠坐骨神经IRE1

、p-JNK蛋白表达含量（

0.05，

0.01）；原方剂量组与教材剂量组比较，差异无统计学意义。

结论

黄芪桂枝五物汤可改善坐骨神经功能、减轻坐骨神经组织损伤，其机制可能与黄芪桂枝五物汤抑制坐骨神经的内质网应激反应水平有关。

Abstract

Objective

To investigate the mechanism of Huangqi Guizhi Wuwutang （HQGZWWT） in the treatment of diabetic peripheral neuropathy （DPN） in MKR mice via regulating endoplasmic reticulum （ER） stress.

Method

Thirty-two 8-week-old MKR mice （half were male and half were female） were fed with a high-fat diet for four weeks， and then 1% streptozotocin （STZ） was injected intraperitoneally for five days. After the blood glucose was stabilized， the mice were housed in the cage covered with ice bags for another one hour stimulation per day for four weeks. Mice with fasting blood glucose （FBG） value ≥11.1 mmol·L

-1

were randomly divided into model group ， Huangqi Guizhi Wuwutang in original dosage group （30 g·kg

-1

·d

-1

）， Huangqi Guizhi Wuwutang in formula dosage group （6.25 g·kg

-1

·d

-1

）， and positive drug group （mecobalamin tablets， 0.17 mg·kg

-1

·d

-1

）. Another eight MKR mice of the same age were set as blank group and eight FVB mice were normal group. After four weeks of intragastric administration in each group， the change in FBG was tested， and hematoxylin and eosin （HE） staining and transmission electron microscope were used for observing the morphology of sciatic nerve tissue. In addition， the expression of c-Jun

-terminal kinase （JNK）， phosphorylated c-Jun

-terminal kinase （p-JNK） and inositol requiring enzyme 1

（IRE1

） proteins was determined by immunohistochemical test and Western blot （WB）.

Result

Compared with the conditions in the normal group and blank group， the time of paw withdrawal， paw licking and tail flick in the model group was shortened （

0.01）， and the conduction velocity of sciatic nerve was decreased （

0.01）. Compared with the conditions in the model group， the behavioral and functional indicators were improved by HQGZWWT （

0.05，

0.01）. The immunohistochemical test revealed the JNK expression was elevated in the model group compared with the conditions in the normal group and blank group （

0.05）， while that was lowered by HQGZWWT compared with the condition in the model group （

0.05）. However， there was no difference among the treatment groups. According to the WB， the expression of IRE1

and p-JNK in the model group was enhanced compared with the conditions in the normal group and blank group （

0.05，

0.01）， while that was decreased by HQGZWWT compared with the condition in the model group （

0.05，

0.01）. No difference was observed between the HQGZWWTO and HQGZWWTF groups.

Conclusion

HQGZWWT can improve the neurophysiological function and pathological damage of sciatic nerve， which may be related to its delaying the ER stress response of sciatic nerve.

关键词

Keywords

references

ZAKIN E ， ABRAMS R ， SIMPSON D M . Diabetic neuropathy ［J］. Semin Neurol ， 2019 ， 39 （ 5 ）： 560 - 569 .

IQBAL Z ， AZMI S ， YADAV R ， et al . Diabetic peripheral neuropathy：Epidemiology，diagnosis，and pharmacotherapy ［J］. Clin Ther ， 2018 ， 40 （ 6 ）： 828 - 849 .

张美珍，郝晓晖，李晓文，等 . 益气活血通络法治疗糖尿病周围神经病变Meta分析［J］. 世界中医药， 2021 ， 16 （ 5 ）： 708 - 716，720 .

田君义，尤鲁山，张文广 . 中药补气活血方离子导入配合穴位按摩治疗糖尿病周围神经病变效果观察［J］. 世界中医药， 2020 ， 15 （ 1 ）： 116 - 119 .

魏文静，陈秋 . 黄芪桂枝五物汤治疗糖尿病周围神经病变的研究概况［J］. 广西中医药大学学报， 2020 ， 23 （ 3 ）： 73 - 75 .

赵天宇，郭敬，王明琦，等 . 仝小林以黄芪为主药辨治糖尿病并发症经验［J］. 山东中医杂志， 2015 ， 34 （ 11 ）： 871 - 873 .

田晓玲，华川，张艳，等 . 黄芪桂枝五物汤对糖尿病周围神经病变作用机制研究进展［J］. 辽宁中医药大学学报， 2021 ， 23 （ 7 ）： 58 - 62 .

安学冬，金德，段丽云，等 . 仝小林论治痛性糖尿病周围神经病变［J］. 吉林中医药， 2021 ， 41 （ 1 ）： 31 - 34 .

丁欣悦 . 王凡教授活用黄芪桂枝五物汤治疗糖尿病周围神经病变临证经验［J］. 亚太传统医药， 2018 ， 14 （ 4 ）： 126 - 127 .

陈聪，陈家旭，喻嵘，等 . 左归降糖清脂方对2型糖尿病合并非酒精性脂肪性肝病MKR鼠肝组织PI3K信号通路的影响［J］. 中华中医药杂志， 2021 ， 36 （ 1 ）： 106 - 111 .

杨金伟，喻嵘，吴勇军，等 . 一种小鼠2型糖尿病合并动脉粥样硬化模型的构建方法及评价［J］. 中国病理生理杂志， 2021 ， 37 （ 7 ）： 1338 - 1344 .

程莉娟，成细华，喻嵘，等 . 内质网应激相关基因在2型糖尿病合并脂肪肝小鼠肝脏中的表达变化［J］. 中国老年学杂志， 2015 ， 35 （ 2 ）： 415 - 418 .

王璇，徐斌 . 2型糖尿病周围神经病变动物模型的建立及检测指标分析［J］. 中国医学科学院学报， 2020 ， 42 （ 5 ）： 658 - 666 .

O'BRIEN P D ， HINDER L M ， SAKOWSKI S A ， et al . ER stress in diabetic peripheral neuropathy：A new therapeutic target ［J］. Antioxid Redox Signal ， 2014 ， 21 （ 4 ）： 621 - 633 .

丁宇，赵殿臣，赏楠 . 黄芪保心汤对慢性心力衰竭模型大鼠心室重构及内质网应激凋亡的抑制作用［J］. 世界中医药， 2021 ， 16 （ 18 ）： 2714 - 2718 .

LUPACHYK S ， WATCHO P ， STAVNIICHUK R ， et al . Endoplasmic reticulum stress plays a key role in the pathogenesis of diabetic peripheral neuropathy ［J］. Diabetes ， 2013 ， 62 （ 3 ）： 944 - 952 .

AMIN-WETZEL N ， NEIDHARDT L ， YAN Y ， et al . Unstructured regions in IRE1 α specify BiP-mediated destabilisation of the luminal domain dimer and repression of the UPR ［J］. Elife ， 2019 ， doi： 10.7554/eLife.50793 http://dx.doi.org/10.7554/eLife.50793 .

ADAMS C J ， KOPP M C ， LARBURU N ， et al . Structure and molecular mechanism of ER stress signaling by the unfolded protein response signal activator IRE1 ［J］. Front Mol Biosci ， 2019 ， doi： 10.3389/fmolb.2019.00011 http://dx.doi.org/10.3389/fmolb.2019.00011 .

ZHOU Z ， WANG Q ， MICHALAK M . Inositol requiring enzyme （IRE），a multiplayer in sensing endoplasmic reticulum stress ［J］. Anim Cells Syst （Seoul）， 2021 ， 25 （ 6 ）： 347 - 357 .

HUANG R ， HUI Z ， WEI S ， et al . IRE1 signaling regulates chondrocyte apoptosis and death fate in the osteoarthritis ［J］. J Cell Physiol ， 2022 ， 237 （ 1 ）： 118 - 127 .

CROWN E D ， YE Z ， JOHNSON K M ， et al . Increases in the activated forms of ERK 1/2，p38 MAPK，and CREB are correlated with the expression of at-level mechanical allodynia following spinal cord injury ［J］. Exp Neurol ， 2006 ， 199 （ 2 ）： 397 - 407 .

AGELLON L B ， MICHALAK M . Avoiding raising the ire of IRE1 α ［J］. Cell Calcium ， 2019 ， 83 ， 102056 .

CHENG Y C ， CHIU Y M ， DAI Z K ， et al . Loganin ameliorates painful diabetic neuropathy by modulating oxidative stress，inflammation and insulin sensitivity in streptozotocin-nicotinamide-induced diabetic rats ［J］. Cells ， 2021 ， 10 （ 10 ）： 2688 .

喻嵘，成细华，胡伟，等 . 骨骼肌特异性胰岛素样生长因子1及胰岛素双受体功能缺失鼠糖尿病发病及其相关炎症因子的变化［J］. 中国组织工程研究与临床康复， 2007 ， 11 （ 45 ）： 9075 - 9078 .

冯圣钰，杨华，邹冉，等 . 中医治疗糖尿病周围神经病变的研究进展［J］. 世界临床药物， 2021 ， 42 （ 9 ）： 751 - 756 .

朱翠翠，张社峰 . 糖尿病周围神经病变中医临床研究进展［J］. 中医研究， 2020 ， 33 （ 6 ）： 75 - 78 .

周强，彭智平，赵锡艳，等 . 仝小林基于"络病"理论运用黄芪桂枝五物汤治疗糖尿病周围神经病变经验［J］. 安徽中医学院学报， 2013 ， 32 （ 2 ）： 44 - 46 .

王秀阁，倪青，庞国明 . 糖尿病周围神经病变病证结合诊疗指南［J］. 中医杂志， 2021 ， 62 （ 8 ）： 1648 - 1656 .

李国菁，全红，冯兴中 . 黄芪桂枝五物汤治疗糖尿病周围神经病变探微［J］. 北京中医药， 2018 ， 37 （ 11 ）： 1034 - 1035 .

李杰辉，雒晓东 . 基于黄煌医案的黄芪桂枝五物汤方证研究［J］. 中医杂志， 2017 ， 58 （ 3 ）： 217 - 219 .

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