Effect of Wuwei Xiaoduyin on NF-<italic style="font-style: italic">κ</italic>B Signaling Pathway in Lipopolysaccharide-induced Rat Mesangial Cells

ZHANG Yu; WANG Guang-wei; WANG Xin-ai; WANG Si-yu; JI Lan-ge; GUO Deng-zhou

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20220938

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Effect of Wuwei Xiaoduyin on NF-κB Signaling Pathway in Lipopolysaccharide-induced Rat Mesangial Cells

更新时间：2023-05-17

- Effect of Wuwei Xiaoduyin on NF-κB Signaling Pathway in Lipopolysaccharide-induced Rat Mesangial Cells
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 28, Issue 9, Pages: 16-22(2022)
- 作者机构：
  
  1.河北中医学院，石家庄 050091
  2.河北省中医院，石家庄 050011
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220938
  CLC： R2-0;R33;R289;R692
- Received：12 November 2021，
  
  Published Online：11 March 2022，
  
  Published：05 May 2022
- 稿件说明：
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张禹,王广伟,王新爱等.五味消毒饮对脂多糖诱导大鼠肾系膜细胞NF-κB信号通路的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(09):16-22.

ZHANG Yu,WANG Guang-wei,WANG Xin-ai,et al.Effect of Wuwei Xiaoduyin on NF-κB Signaling Pathway in Lipopolysaccharide-induced Rat Mesangial Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(09):16-22.
张禹,王广伟,王新爱等.五味消毒饮对脂多糖诱导大鼠肾系膜细胞NF-κB信号通路的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(09):16-22. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220938.

ZHANG Yu,WANG Guang-wei,WANG Xin-ai,et al.Effect of Wuwei Xiaoduyin on NF-κB Signaling Pathway in Lipopolysaccharide-induced Rat Mesangial Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(09):16-22. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20220938.

摘要

目的

观察五味消毒饮对脂多糖（LPS）诱导的大鼠肾系膜细胞（HBZY-1）核转录因子-

B（NF-

B）信号通路的影响，并探讨其作用机制。

方法

将大鼠肾系膜细胞随机分为正常组、模型组、贝那普利组（50 μmol·L

-1

）、五味消毒饮高、低剂量组（2.75、0.69 g·kg

-1

）。正常组、模型组、贝那普利组使用10%正常大鼠血清，五味消毒饮高、低剂量组使用10%含药血清。除正常组外，其余4组给予LPS（100 μg·L

-1

）以体外干预。倒置显微镜观察细胞形态的变化；免疫荧光法（IF）检测NF-

B p65的表达；噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞活力；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞中白细胞介素-1

（IL-1

）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、层粘连蛋白（LN）和纤连蛋白（FN）的含量；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测细胞中IL-1

、FN、NF-

B p65 mRNA的表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞中磷酸化NF-

B抑制蛋白激酶

（p-IKK

）、磷酸化NF-

B抑制蛋白

（p-I

）、NF-

B p65蛋白的表达。

结果

与正常组比较，模型组细胞增殖显著增多（

0.01），细胞上清中IL-1

、ICAM-1、LN、FN的含量显著增多（

0.01），IL-1

、FN、NF-

B p65 mRNA表达显著升高（

0.01），p-IKK

、p-I

、NF-

B p65蛋白表达显著升高（

0.01）。与模型组比较，各给药组细胞增殖明显降低（

0.05，

0.01），细胞上清中IL-1

、ICAM-1、LN、FN的含量明显减少（

0.05，

0.01），IL-1

、FN、NF-

B p65 mRNA的表达明显降低（

0.05，

0.01），p-IKK

、p-I

、NF-

B p65蛋白的表达显著降低（

0.05，

0.01）。

结论

五味消毒饮可减轻由LPS诱导的肾系膜细胞损伤，其作用机制可能与抑制NF-

B信号通路的启动有关。

Abstract

Objective

To study the effect and mechanism of Wuwei Xiaoduyin in treating rat renal mesangial cells （HBZY-1） induced by lipopolysaccharide （LPS） through the nuclear factor-

B （NF-

B） signaling pathway.

Method

Rat HBZY-1 cells were randomly assigned into the normal group， model group， benazepril （50 μmol·L

-1

） group， and high- and low-dose （2.75 and 0.69 g·kg

-1

） Wuwei Xiaoduyin groups. The normal group， model group， and benazepril group were treated with 10% normal rat serum， and the Wuwei Xiaoduyin groups with 10% medicated serum. Except the normal group， the other four groups were treated with LPS （100 ng·mL

-1

） for modeling

in vitro

. The changes of cell morphology were observed under optical microscope. The expression of NF-

B p65 was detected by immunofluorescence （IF） method. Methyl thiazolyl tetrazolium （MTT） colorimetry was employed to detect cytotoxicity and cell proliferation. The levels of interleukin-1

（IL-1

）， intercellular adhesion molecule-1 （ICAM-1）， laminin （LN）， and fibronectin （FN） in cell supernatant were determined by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. The mRNA levels of IL-1

， FN， and NF-

B p65 were measured by real-time fluorescence quantitative PCR. The protein levels of phosphorylated inhibitor of NF-

B kinase

（p-IKK

）， phosphorylated NF-

B inhibitor （p-I

）， and NF-

B p65 were determined by Western blot.

Result

Compared with the normal group， the modeling increased cell proliferation （

0.01）， elevated the levels of IL-1

， ICAM-1， LN， and FN in cell supernatant （

0.01）， and up-regulated the mRNA levels of IL-1

， FN， and NF-

B p65 （

0.01） and the protein levels of p-IKK

， p-I

， and NF-

B p65 （

0.01）. Such changes were recovered by benazepril and Wuwei Xiaoduyin （

0.05，

0.01）.

Conclusion

Wuwei Xiaoduyin can mitigate the inflammatory injury of renal mesangial cells induced by LPS by inhibiting the NF-

B signaling pathway.

关键词

Keywords

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Effect of Wuwei Xiaoduyin on NF-κB Signaling Pathway in Lipopolysaccharide-induced Rat Mesangial Cells

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20220938

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