Effect of Guben Jiedu Prescription-medicated Serum on Epithelial-mesenchymal Transition of Lung Cancer A549 Cells： Based on PI3K/Akt Signaling Pathway

ZHU Dongju; PIAO Bingkui; QIN Tengteng; YANG Chen; BAI Jianqi; ZHU Hongwei; ZHANG Ping

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20221329

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Effect of Guben Jiedu Prescription-medicated Serum on Epithelial-mesenchymal Transition of Lung Cancer A549 Cells： Based on PI3K/Akt Signaling Pathway

更新时间：2022-10-18

- Effect of Guben Jiedu Prescription-medicated Serum on Epithelial-mesenchymal Transition of Lung Cancer A549 Cells： Based on PI3K/Akt Signaling Pathway
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 28, Issue 22, Pages: 93-99(2022)
- 作者机构：
  
  1.中国中医科学院望京医院，北京 100102
  2.中国中医科学院广安门医院，北京 100053
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221329
  CLC： R22;R242;R2-031;R285.5
- Received：26 January 2022，
  
  Published Online：29 April 2022，
  
  Published：20 November 2022
- 稿件说明：
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朱冬菊,朴炳奎,秦腾腾等.基于PI3K/Akt信号通路探讨固本解毒方含药血清对肺癌A549细胞EMT的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(22):93-99.

ZHU Dongju,PIAO Bingkui,QIN Tengteng,et al.Effect of Guben Jiedu Prescription-medicated Serum on Epithelial-mesenchymal Transition of Lung Cancer A549 Cells： Based on PI3K/Akt Signaling Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(22):93-99.
朱冬菊,朴炳奎,秦腾腾等.基于PI3K/Akt信号通路探讨固本解毒方含药血清对肺癌A549细胞EMT的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(22):93-99. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221329.

ZHU Dongju,PIAO Bingkui,QIN Tengteng,et al.Effect of Guben Jiedu Prescription-medicated Serum on Epithelial-mesenchymal Transition of Lung Cancer A549 Cells： Based on PI3K/Akt Signaling Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(22):93-99. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221329.

摘要

目的

观察固本解毒方对肺癌A549细胞上皮间质转化（EMT）的影响，从磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）信号通路探讨其作用机制。

方法

制备固本解毒方含药血清，噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞存活率并筛选固本解毒方浓度用于后续实验。分为空白组、固本解毒方组（2.5%、5%、10%含药血清）、PI3K/Akt通路激活剂（SC79）组、固本解毒方+SC79组。划痕实验检测细胞迁移力，蛋白免疫印迹法（Western blot）检测E-钙黏蛋白（E-cadherin）、N-钙黏蛋白（N-cadherin）、波形蛋白（Vimentin）、蛋白激酶B（Akt）、磷酸化（p）-Akt、糖原合成酶激酶-3

（GSK-3

）、p-GSK-3

蛋白表达，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测N-cadherin、Vimentin mRNA表达。

结果

与空白组比较，固本解毒方组含药血清（2.5%、5%、10%、20%、40%）A549细胞活力降低（

0.05），选择固本解毒方含药血清10%、5%、2.5%作为高、中、低浓度进行后续实验。与空白组比较，固本解毒方组A549细胞迁移力降低。Real-time PCR结果显示，与空白组比较，固本解毒方组A549细胞N-cadherin、Vimentin mRNA表达显著降低（

0.01）。Western blot结果显示，与空白组比较，固本解毒方组（含药血清5%、10%）A549细胞E-cadherin蛋白表达显著升高（

0.01），固本解毒方组N-cadherin、Vimentin、p-Akt、p-GSK-3

蛋白表达显著降低（

0.01），p-Akt/Akt、p-GSK-3

/GSK-3

表达明显降低（

0.05，

0.01）。与SC79组比较，固本解毒方组（含药血清10%）E-cadherin蛋白表达显著升高（

0.01），N-cadherin、Vimentin、p-Akt、p-GSK-3

β、

p-Akt/Akt、p-GSK-3

/GSK-3

表达显著降低（

0.01）。与固本解毒方组（含药血清10%）比较，固本解毒方+SC79组（含药血清10%）E-cadherin蛋白表达显著降低（

0.01），N-cadherin、Vimentin、p-Akt、p-GSK-3

β、

p-Akt/Akt、p-GSK-3

/GSK-3

蛋白表达显著升高（

0.01）。

结论

固本解毒方可抑制肺癌A549细胞迁移和EMT，其机制与调控PI3K/Akt信号通路有关。

Abstract

Objective

To observe the effect of Guben Jiedu prescription （GBJ） on the epithelial-mesenchymal transition （EMT） of lung cancer A549 cells and to explore the mechanism based on phosphoinositide 3-kinase （PI3K）/protein kinase B （Akt） signaling pathway.

Method

The GBJ-medicated serum was prepared. Cell viability was detected by methyl thiazolyl tetrazolium （MTT） assay to screen the optimal doses of GBJ-medicated serum for further experiment. A549 cells were classified into normal serum group， low-， medium-， and high-dose GBJ-medicated serum groups （2.5%， 5%， and 10% GBJ-medicated serum）， PI3K/Akt pathway activator SC79 group， and high-dose GBJ-medicated serum + SC79 group. Cell migration ability was measured by wound-healing assay. The protein expression of E-cadherin， N-cadherin， vimentin， Akt， phosphorylated Akt （p-Akt）， glycogen synthase kinase-3

（GSK-3

）， and phosphorylated GSK-3

（p-GSK-3

） was detected by Western blotting， and the mRNA expression of N-cadherin and vimentin by Real-time PCR.

Result

Compared with the normal serum， GBJ-medicated serum （2.5%， 5%， 10%， 20%， 40%） decreased the viability of A549 cells （

0.05）， and 10%， 5%， 2.5% GBJ-medicated serum was respectively selected for the follow-up experiment. The migration ability of cells in the high-， medium-， and low-dose GBJ-medicated serum groups was lower than that in the normal serum group. The expression of N-cadherin mRNA and Vimentin mRNA in A549 cells in the three GBJ-medicated serum groups was significantly lower than that in the normal serum group （

0.01）. The protein expression of E-cadherin was higher in the high- and medium-dose GBJ-medicated serum groups than in the normal serum group （

0.01）. The three GBJ-medicated serum groups showed lower protein expression of N-cadherin， vimentin， p-Akt， and p-GSK-3

（

0.01） and lower expression of p-Akt/Akt， p-GSK-3

/GSK-3

（

0.05，

0.01） than normal serum group. Compared with the SC79 group， the high-dose GBJ-medicated serum group demonstrated high protein expression of E-cadherin （

0.01） and low expression of N-cadherin， vimentin， p-Akt， p-GSK-3

， and p-Akt/Akt， p-GSK-3

/GSK-3

（

0.01）. Compared with the high-dose GBJ-medicated serum group， high-dose GBJ-medicated serum + SC79 group showed low protein expression of E-cadherin （

0.01） and high protein expression of N-cadherin， vimentin， p-Akt， p-GSK-3

， p-Akt/Akt， and p-GSK-3

/GSK-3

（

0.01）.

Conclusion

GBJ can inhibit the migration and EMT of lung cancer A549 cells by regulating the PI3K/Akt signaling pathway.

关键词

Keywords

references

THE L . Lung cancer： Some progress， but still a lot more to do ［J］. Lancet ， 2019 ， 394 （ 10212 ）： 1880 .

TRAVIS W D ， BRAMBILLA E ， NICHOLSON A G ， et al . The 2015 World health organization classification of lung tumors： Impact of genetic， clinical and radiologic advances since the 2004 classification ［J］. J Thorac Oncol ， 2015 ， 10 （ 9 ）： 1243 - 1260 .

DAVID E A ， CLARK J M ， COOKE D T ， et al . The role of thoracic surgery in the therapeutic management of metastatic non-small cell lung cancer ［J］. J Thorac Oncol ， 2017 ， 12 （ 11 ）： 1636 - 1645 .

ETTINGER D S ， WOOD D E ， AISNER D L ， et al . Non-small cell lung cancer， version 5.2017， NCCN clinical practice guidelines in oncology ［J］. J Natl Compr Canc Netw ， 2017 ， 15 （ 4 ）： 504 - 535 .

ETTINGER D S ， WOOD D E ， AGGARWAL C ， et al . NCCN guidelines insights： Non-small cell lung cancer， version 1.2020 ［J］. J Natl Compr Canc Netw ， 2019 ， 17 （ 12 ）： 1464 - 1472 .

XIANG Y ， GUO Z ， ZHU P ， et al . Traditional Chinese medicine as a cancer treatment： Modern perspectives of ancient but advanced science ［J］. Cancer Med ， 2019 ， 8 （ 5 ）： 1958 - 1975 .

LUO H ， VONG C T ， CHEN H ， et al . Naturally occurring anti-cancer compounds： shining from Chinese herbal medicine ［J］. Chin Med ， 2019 ， doi： 10.1186/s13020-019-0270-9 http://dx.doi.org/10.1186/s13020-019-0270-9 .

张曦文，朴炳奎，花宝金，等 . 基于信息挖掘技术分析朴炳奎肺癌对症治疗用药与处方规律［J］. 世界中西医结合杂志， 2020 ， 15 （ 6 ）： 1002 - 1008 .

周雍明，朴炳奎，郑红刚，等 . 肺瘤平膏及其拆方含药血清对人外周血树突状细胞迁移功能影响及机制研究［J］. 中国实验方剂学杂志， 2010 ， 16 （ 6 ）： 152 - 155 .

蒋士卿，孙宏新，朴炳奎 . 益肺清化膏对荷瘤小鼠瘤组织CD44、CD44v6、E-cad等mRNA表达水平的影响［J］. 中医学报， 2010 ， 25 （ 1 ）： 17 - 20 .

NAIR A B ， JACOB S . A simple practice guide for dose conversion between animals and human ［J］. J Basic Clin Pharm ， 2016 ， 7 （ 2 ）： 27 - 31 .

TAMURA T ， KURISHIMA K ， NAKAZAWA K ， et al . Specific organ metastases and survival in metastatic non-small-cell lung cancer ［J］. Mol Clin Oncol ， 2015 ， 3 （ 1 ）： 217 - 221 .

ZHOU Q ， ZU L ， LI L ， et al . Screening and establishment of human lung cancer cell lines with organ-specific metastasis potential ［J］. Chin J Lung Cancer ， 2014 ， 17 （ 3 ）： 175 - 182 .

郑红刚，花宝金，朴炳奎 . 朴炳奎辨治肺癌学术思想与经验探析［J］. 中医杂志， 2010 ， 51 （ 4 ）： 304 - 306 .

李黎，周雍明，朴炳奎 . 朴炳奎治疗恶性肿瘤“和其不和”学术思想探究［J］. 中国中医药图书情报杂志， 2018 ， 42 （ 3 ）： 67 - 69 .

STEEG P S . Tumor metastasis： mechanistic insights and clinical challenges ［J］. Nat Med ， 2006 ， 12 （ 8 ）： 895 - 904 .

LAMOUILLE S ， XU J ， DERYNCK R . Molecular mechanisms of epithelial-mesenchymal transition ［J］. Nat Rev Mol Cell Biol ， 2014 ， 15 （ 3 ）： 178 - 196 .

MICALIZZI D S ， FARABAUGH S M ， FORD H L . Epithelial-mesenchymal transition in cancer： parallels between normal development and tumor progression ［J］. J Mammary Gland Biol Neoplasia ， 2010 ， 15 （ 2 ）： 117 - 134 .

李龙妹，廖桂雅，吴万垠 . 扶正抗癌方通过M2型巨噬细胞来源的外泌体途径抑制95D细胞转移的作用机制研究［J］. 中国中医药信息杂志， 2021 ， 28 （ 12 ）： 50 - 55 .

钟晓丹，文彬，孙海涛，等 . 鳖甲煎丸通过NF- κ B信号通路抑制肝癌细胞上皮间质转化的作用机制［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 1 ）： 24 - 32 .

ZHANG J ， TIAN X J ， XING J . Signal transduction pathways of EMT induced by TGF-beta， SHH， and WNT and their crosstalks ［J］. J Clin Med ， 2016 ， 5 （ 4 ）： 41

MANNING B D ， TOKER A . Akt/PKB signaling： Navigating the Network ［J］. Cell ， 2017 ， 169 （ 3 ）： 381 - 405 .

BARCELLOS-HOFF M H ， LYDEN D ， WANG T C . The evolution of the cancer niche during multistage carcinogenesis ［J］. Nat Rev Cancer ， 2013 ， 13 （ 7 ）： 511 - 518 .

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