Effect of Salidroside on Proliferation， Migration， Invasion， and Apoptosis of HepG2 Cells

Bing JIANG; Tao YANG; Longfei FENG; Tao WANG; Haixiang SU

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20221421

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Effect of Salidroside on Proliferation， Migration， Invasion， and Apoptosis of HepG2 Cells

更新时间：2022-08-05

- Effect of Salidroside on Proliferation， Migration， Invasion， and Apoptosis of HepG2 Cells
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 28, Issue 17, Pages: 75-83(2022)
- 作者机构：
  
  1.甘肃中医药大学，兰州 730000
  2.甘肃省医学科学研究院，甘肃省肿瘤医院，兰州 730050
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221421
  CLC： R22;R242;R2-031;R285.5
- Received：02 February 2022，
  
  Published Online：29 April 2022，
  
  Published：05 September 2022
- 稿件说明：
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蒋兵,杨韬,封龙飞等.红景天苷对HepG2细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(17):75-83.

JIANG Bing,YANG Tao,FENG Longfei,et al.Effect of Salidroside on Proliferation， Migration， Invasion， and Apoptosis of HepG2 Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(17):75-83.
蒋兵,杨韬,封龙飞等.红景天苷对HepG2细胞增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(17):75-83. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221421.

JIANG Bing,YANG Tao,FENG Longfei,et al.Effect of Salidroside on Proliferation， Migration， Invasion， and Apoptosis of HepG2 Cells[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(17):75-83. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221421.

摘要

目的

红景天苷是从红景天的根茎部中提取得到的，是红景天中含量最高的天然活性化合物。该实验旨在研究红景天苷对人源性肝癌细胞（HepG2细胞）增殖、迁移、侵袭和凋亡的影响。

方法

选取未作任何处理的HepG2细胞作为空白组，以终浓度为20、40、80 μmol·L

-1

红景天苷处理的HepG2细胞作为红景天苷组。采用多功能细胞分析仪测定红景天苷对HepG2细胞增殖的影响，划痕实验测定红景天苷对HepG2细胞迁移能力的影响，Transwell小室实验测定红景天苷对HepG2细胞侵袭能力的影响，倒置显微镜观察红景天苷对HepG2细胞形态的影响，透射电镜观察红景天苷对HepG2细胞中线粒体的影响，流式细胞术分析红景天苷对HepG2细胞凋亡及周期分布的影响，实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）测定红景天苷对HepG2细胞相关凋亡基因的影响，蛋白免疫印迹法测定红景天苷对HepG2细胞相关迁移、侵袭及凋亡蛋白的影响。

结果

与空白组比较，红景天苷组（20、40、80 μmol·L

-1

）细胞指数均明显下降（

0.05），愈合面积均明显增加（

0.05），且呈时间和浓度依赖性；红景天苷组（20、80 μmol·L

-1

）中能够穿过Matrigel基质胶的HepG2细胞数量呈浓度依赖性减少；红景天苷组（20、40、80 μmol·L

-1

）总凋亡率呈浓度依赖性升高，且阻滞细胞于G

/M期（

0.05）；红景天苷组（20、80 μmol·L

-1

）上皮性钙黏附蛋白（E-cadherin）表达呈浓度依赖性升高（

0.05），神经钙黏附蛋白（N-cadherin）表达呈浓度依赖性降低（

0.05）。红景天苷组（20、40、80 μmol·L

-1

）胱天蛋白酶-3（Caspase-3）mRNA表达、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）相关X蛋白（Bax）、Caspase-3蛋白及胱天蛋白酶-9（Caspase-9）蛋白表达均呈浓度依赖性升高（

0.05），肌动蛋白结合蛋白（Girdin）及Bcl-2表达均呈浓度依赖性降低（

0.05）。

结论

红景天苷对HepG2细胞的增殖、迁移及侵袭均具有抑制作用，且通过线粒体途径诱导HepG2细胞凋亡。表明红景天苷可作为一种潜在的肝癌化疗候选药物。

Abstract

Objective

Salidroside is the most abundant natural active compound in the famous Chinese herbal medicine Rhodiolae Crenulatae Radix et Rhizoma. This study aims to explore the effect of salidroside on the proliferation， migration， invasion， and apoptosis of human hepatoma （HepG2） cells.

Method

The HepG2 cells without any treatment were selected as the blank group， and the HepG2 cells in the salidroside groups were treated with salidroside at final concentrations of 20， 40， 80 μmol·L

-1

， respectively. A multifunctional cell analyzer， scratch assay， and Transwell assay were employed to determine the proliferation， migration， and invasion of HepG2 cells， respectively. An inverted microscope was used to observe the morphology， and a transmission electron microscope to observe the mitochondria of HepG2 cells. Flow cytometry was employed to determine the apoptosis and cycle distribution of HepG2 cells. Real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction ( Real-time PCR ) and Western blot were employed to determine the expression of apoptosis-associated genes and migration-， invasion-， and apoptosis-associated proteins， respectively， in HepG2 cells.

Result

Compared with the blank group， salidroside （20， 40， 80 μmol·L

-1

） decreased the cell index and increased the healing area in a time- and dose-dependent manner （

0.05）. Compared with that in the blank group， the HepG2 cells that could pass through Matrigel reduced in the salidroside （20， 80 μmol·L

-1

） groups. Compared with the blank group， salidroside （20， 40， 80 μmol·L

-1

） increased the total apoptosis rate in a dose dependence manner and blocked the cells in the G

/M phase （

0.05）. Compared with the blank group， salidroside up-regulated the expression of epithelial-cadherin （E-cadherin） in a dose-dependent manner （

0.05） and down-regulated that of nerve-cadherin （N-cadherin） in the 20 and 80 μmol·L

-1

groups （

0.05）. Compared with the blank group， salidroside （20， 40， 80 μmol·L

-1

） up-regulated the mRNA level of cysteine-containing aspartate-specific protease -3 （Caspase-3） and the protein levels of B-cell lymphoma-2 （Bcl-2） associated X protein （Bax）， Caspase-3， and cysteine-containing aspartate-specific protease-9 （Caspase-9） in a dose-dependent manner （

0.05）， while it down-regulated the protein levels of the actin-binding protein Girdin and Bcl-2 in a dose-dependent manner （

0.05）.

Conclusion

Salidroside inhibited the proliferation， migration， and invasion and induced the apoptosis of HepG2 cells through the mitochondrial pathway. The results suggest that salidroside can be used as a potential chemotherapy candidate for liver cancer.

关键词

Keywords

references

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