Protective Effect of Guilu Erxianjiao on Reproductive Injury in Diabetic Rats and Its Mechanism

Baowei LU; Lumei LIU; Neng WANG; Jing DING; Wen SHENG; Qinghu HE

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20221936

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Protective Effect of Guilu Erxianjiao on Reproductive Injury in Diabetic Rats and Its Mechanism

更新时间：2022-08-30

- Protective Effect of Guilu Erxianjiao on Reproductive Injury in Diabetic Rats and Its Mechanism
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 28, Issue 19, Pages: 1-8(2022)
- 作者机构：
  
  1.湖南中医药大学，长沙 410208
  2.广州中医药大学第七临床医学院附属宝安中医院，广东深圳 518100
  3.湖南医药学院，湖南怀化 418000
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20221936
  CLC： R2-0;R33;R289;R587.1
- Received：10 June 2022，
  
  Published Online：22 July 2022，
  
  Published：05 October 2022
- 稿件说明：
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陆包伟,刘露梅,王能等.龟鹿二仙胶对糖尿病大鼠生殖损伤的保护作用及机制[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(19):1-8.

LU Baowei,LIU Lumei,WANG Neng,et al.Protective Effect of Guilu Erxianjiao on Reproductive Injury in Diabetic Rats and Its Mechanism[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(19):1-8.
陆包伟,刘露梅,王能等.龟鹿二仙胶对糖尿病大鼠生殖损伤的保护作用及机制[J].中国实验方剂学杂志,2022,28(19):1-8. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221936.

LU Baowei,LIU Lumei,WANG Neng,et al.Protective Effect of Guilu Erxianjiao on Reproductive Injury in Diabetic Rats and Its Mechanism[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2022,28(19):1-8. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20221936.

摘要

目的

探索龟鹿二仙胶改善糖尿病大鼠生殖损伤的疗效及可能作用机制。

方法

将53只SD雄鼠随机分成5组，选取其中1组作为正常组，剩余4组合并成造模组用高脂饲料喂养联合30 mg·kg

-1

链脲佐菌素（STZ）腹腔注射建立糖尿病模型，以连续3次随机血糖均

16.7 mmol·L

-1

作为纳入糖尿病生殖损伤模型标准。将成模的大鼠按血糖高低随机分成模型组、龟鹿二仙胶组（2 g·kg

-1

）、维生素E组（0.03 g·kg

-1

）、五子衍宗丸组（0.6 g·kg

-1

），给予相应药物剂量灌胃，每天1次，连续治疗4周，每周测体质量和血糖。4周后取材进行指标检测，苏木素-伊红（HE）染色观察睾丸及附睾组织形态学变化，原位末端标记法（TUNEL）染色观察睾丸细胞凋亡情况；精液分析仪检测精子浓度和精子活力；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清卵泡刺激素（FSH）、黄体生成素（LH）、睾酮（T）水平；ELISA检测睾丸组织超氧化物歧化酶（SOD）、丙二醇（MDA）、活性氧（ROS）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）含量；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测睾丸组织Nrf2、HO-1、Bax、Bcl-2蛋白表达。

结果

与正常组比较，模型组大鼠睾丸组织萎缩，生精小管数量减少，附睾管壁增生，管腔狭窄；精子浓度和活力下降（

0.01）；血清T、FSH和LH水平降低（

0.01）；睾丸中ROS和MDA含量增加（

0.01），SOD和GSH-Px水平减少（

0.01）；Bax表达增加（

0.01），Nrf2、HO-1、Bcl-2表达降低（

0.01）。与模型组比较，龟鹿二仙胶组睾丸及附睾组织病变得到一定改善；精子浓度和活力提升（

0.05，

0.01）；血清T和LH含量上升（

0.05，

0.01），FSH含量差异无统计学意义；睾丸中ROS和MDA含量降低（

0.01），SOD和GSH-Px水平增加（

0.01）；Bax表达下降（

0.01），Nrf2、HO-1、Bcl-2表达上升（

0.05，

0.01）。

结论

龟鹿二仙胶能在一定程度上改善糖尿病大鼠生殖损伤，提升精子质量，其机制可能与改善氧化应激，抗凋亡作用有关。

Abstract

Objective

To explore the effect of Guilu Erxianjiao on improving reproductive injury in diabetic rats and its possible mechanism.

Method

Fifty-three SD male rats were randomly divided into 5 groups， with 1 group as the normal group and the other 4 groups as the modeling groups. Rats in the modeling groups were fed with a high-fat diet combined with 30 mg·kg

-1

streptozotocin （STZ） intraperitoneal injection to induce diabetes， with the random blood glucose

16.7 mmol·L

-1

for 3 consecutive times as the criteria for inclusion in the model of diabetic reproductive injury. The rats with diabetic reproductive injury were then randomly divided into a model group， a Guilu Erxianjiao group （2 g·kg

-1

）， a Vitamin E group （0.03 g·kg

-1

）， and a Wuzi Yanzong pill group （0.6 g·kg

-1

） according to the blood glucose level. The rats were given the corresponding drug dose intragastric administration， once a day for 4 weeks， and their body weight and blood glucose were measured weekly. After 4 weeks， samples were collected for index determination. Morphological changes in testis and epididymis were observed by hematoxylin-eosin （HE） staining， and apoptosis of testis cells was observed by

in situ

end labeling （TUNEL） staining. Sperm concentration and motility were detected by the semen analyzer. Serum levels of follicle-stimulating hormone （FSH）， luteinizing hormone （LH）， and testosterone （T） were determined by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. The content of superoxide dismutase （SOD）， propylene glycol （MDA）， reactive oxygen species （ROS）， and glutathione peroxidase （GSH-Px） in the testicular tissue was determined by ELISA. The expressions of nuclear respiratory factor-2 （Nrf2）， heme oxygenase 1 （HO-1）， B-cell lymphoma-2 （Bcl-2）， and Bcl-2 associated X protein （Bax） in the testicular tissue were detected by Western blot.

Result

As compared with the normal group， testicular tissue atrophy， decreased spermatogenic tubules， epididymal wall hyperplasia， and lumen stenosis were observed in the model group. Sperm concentration and motility decreased （

0.01）， and serum levels of T， FSH， and LH decreased （

0.01） in the model group. The content of ROS and MDA in the testis increased （

0.01）， while that of SOD and GSH-Px decreased （

0.01） in the model group. The expression of Bax increased （

0.01）， and the expressions of Nrf2， HO-1， and Bcl-2 decreased （

0.01） in the model group. As compared with the model group， the pathological changes in the testis and epididymis in the Guilu Erxianjiao group were improved to some extent. Sperm concentration and motility increased （

0.05，

0.01）. In the Guilu Erxianjiao group， serum levels of T and LH increased （

0.05，

0.01）， while FSH levels showed no significant difference. The content of ROS and MDA in the testis decreased （

0.01）， while that of SOD and GSH-Px increased （

0.01） in the Guilu Erxianjiao group. The expression of Bax decreased （

0.01）， and the expressions of Nrf2， HO-1， and Bcl-2 increased （

0.05，

0.01） in the Guilu Erxianjiao group.

Conclusion

Guilu Erxianjiao improves the reproductive injury and sperm quality of diabetic rats to a certain extent， and the mechanism may be related to the improvement of oxidative stress and anti-apoptosis.

关键词

Keywords

references

LI Y ， TENG D ， SHI X ， et al . Prevalence of diabetes recorded in mainland China using 2018 diagnostic criteria from the American Diabetes Association： National cross sectional study ［J］. BMJ ， 2020 ， doi： 10.1136/bmj.m997 http://dx.doi.org/10.1136/bmj.m997 .

HE Z ， YIN G ， LI Q Q ， et al . Diabetes mellitus causes male reproductive dysfunction：A review of the evidence and mechanisms ［J］. In Vivo ， 2021 ， 35 （ 5 ）： 2503 - 2511 .

马婧，邓佩佩，韩瑞钰，等 . 糖尿病与不育男性精液质量关系［J］. 中国计划生育学杂志， 2019 ， 27 （ 11 ）： 1537 - 1540，1543 .

宾东华，李玲，唐宇，等 . 谭新华基于“补、固、和”法运用龟鹿二仙胶治疗男科疾病经验［J］. 湖南中医药大学学报， 2021 ， 41 （ 6 ）： 903 - 906 .

黄小玲 . 龟鹿二仙胶汤治疗阴阳两虚型中晚期大肠癌癌因性疲乏患者的临床观察及对免疫功能的影响［D］. 福州：福建中医药大学， 2021 .

王玉涛，王琮，李牧婵，等 . 龟鹿二仙胶加减治疗肝硬化低蛋白血症30例临床观察［J］. 北京中医药， 2019 ， 38 （ 2 ）： 102 - 105 .

刘子毓，何清湖，孙贵香，等 . 两种剂型龟鹿二仙胶对于腺嘌呤诱导肾阳虚型少弱精子症大鼠的干预作用［J］. 世界科学技术—中医药现代化， 2021 ， 23 （ 5 ）： 1384 - 1389 .

丁劲，何清湖，周兴，等 . 基于网络药理学和分子对接探讨龟鹿二仙胶治疗少、弱精子症作用机制［J］. 世界科学技术—中医药现代化， 2021 ， 23 （ 12 ）： 4490 - 4504 .

SRINIVASAN K ， VISWANAD B ， ASRAT L ， et al . Combination of high-fat diet-fed and low-dose streptozotocin-treated rat：A model for type 2 diabetes and pharmacological screening ［J］. Pharmacol Res ， 2005 ， 52 （ 4 ）： 313 - 320 .

HE W ， LIU H ， HU L ， et al . Icariin improves testicular dysfunction via enhancing proliferation and inhibiting mitochondria-dependent apoptosis pathway in high-fat diet and streptozotocin-induced diabetic rats ［J］. Reprod Biol Endocrinol ， 2021 ， 19 （ 1 ）： 168 .

黄继汉，黄晓晖，陈志扬，等 . 药理试验中动物间和动物与人体间的等效剂量换算［J］. 中国临床药理学与治疗学， 2004 ， 9 （ 9 ）： 1069 - 1072 .

中华医学会糖尿病学分会 . 中国2型糖尿病防治指南（2020年版）［J］. 国际内分泌代谢杂志， 2021 ， 41 （ 5 ）： 482 - 548 .

胡海林 . 鹿角胶对阳虚少弱精子症大鼠的改善作用及CFTR蛋白表达影响的实验研究［D］. 长沙：湖南中医药大学， 2021 .

盛文 . 基于Bcl-2/Bax通路及线粒体功能探讨龟甲胶治疗肾阴亏虚型少弱精子症的作用机制［D］. 长沙：湖南中医药大学， 2021 .

阎茹玉，吴宿慧，方亚影，等 . 原人参二醇延缓衰老及抗氧化应激作用的机制研究［J］. 中药药理与临床， 2022 ， 38 （ 1 ）： 56 - 62 .

邱树磊，胡国柱，陈玉库，等 . 枸杞多糖的提取纯化及体内外抗氧化活性研究［J］. 动物医学进展， 2021 ， 42 （ 10 ）： 56 - 61 .

ZHANG P ， LI T ， WU X ， et al . Oxidative stress and diabetes：Antioxidative strategies ［J］. Front Med ， 2020 ， 14 （ 5 ）： 583 - 600 .

GHAFARIZADEH A A ， MALMIR M ， NADERI NOREINI S ， et al . The effect of vitamin E on sperm motility and viability in asthenoteratozoospermic men： In vitro study ［J］. Andrologia ， 2021 ， 53 （ 1 ）： e13891 .

李浩，俞旭君，阳方，等 . 五子衍宗丸治疗男性不育症64例临床研究［J］. 中国性科学， 2020 ， 29 （ 10 ）： 123 - 126 .

LEI X ， HUO P ， WANG Y ， et al . Lycium barbarum polysaccharides improve testicular spermatogenic function in streptozotocin-induced diabetic rats ［J］. Front Endocrinol （Lausanne）， 2020 ， 11 ： 164 .

ÖZTIN H ， ÇAĞILTAY E ， ÇAĞLAYAN S ， et al . Kisspeptin levels in idiopathic hypogonadotropic hypogonadism diagnosed male patients and its relation with glucose-insulin dynamic ［J］. Gynecol Endocrinol ， 2016 ， 32 （ 12 ）： 991 - 994 .

胡善明，王亚楠，许正茂，等 . Bcl-2家族分子在细胞凋亡中的作用研究进展［J］. 动物医学进展， 2021 ， 42 （ 10 ）： 85 - 89 .

NNA V U ， BAKAR A ， AHMAD A ， et al . Diabetes-induced testicular oxidative stress，inflammation，and caspase-dependent apoptosis：The protective role of metformin ［J］. Arch Physiol Biochem ， 2020 ， 126 （ 5 ）： 377 - 388 .

GIBB Z ， GRIFFIN R A ， AITKEN R J ， et al . Functions and effects of reactive oxygen species in male fertility ［J］. Anim Reprod Sci ， 2020 ， 220 ： 106456 .

BISWAS C ， SHAH N ， MUTHU M ， et al . Nuclear heme oxygenase-1 （HO-1） modulates subcellular distribution and activation of Nrf2，impacting metabolic and anti-oxidant defenses ［J］. J Biol Chem ， 2014 ， 289 （ 39 ）： 26882 - 26894 .

WANG Y ， ZHANG Z ， GUO W ， et al . Sulforaphane reduction of testicular apoptotic cell death in diabetic mice is associated with the upregulation of Nrf2 expression and function ［J］. Am J Physiol Endocrinol Metab ， 2014 ， 307 （ 1 ）： 14 - 23 .

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