Shoutaiwan Ameliorates Oxidative Damage of Human Chorionic Trophoblast Cells by Regulating Nrf2 Signaling Pathway to Treat Recurrent Abortion

SHEN Sinan; MU Zhenni; TANG Li; LEI Lei

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20222240

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

Shoutaiwan Ameliorates Oxidative Damage of Human Chorionic Trophoblast Cells by Regulating Nrf2 Signaling Pathway to Treat Recurrent Abortion

更新时间：2023-01-03

- Shoutaiwan Ameliorates Oxidative Damage of Human Chorionic Trophoblast Cells by Regulating Nrf2 Signaling Pathway to Treat Recurrent Abortion
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 29, Issue 3, Pages: 44-51(2023)
- 作者机构：
  
  湖南中医药大学中西医结合心脑疾病防治湖南省重点实验室，中西医结合学院，长沙 410208
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20222240
  CLC： R2-0;R33;R289;R714.21
- Received：02 July 2022，
  
  Published Online：22 September 2022，
  
  Published：05 February 2023
- 稿件说明：
移动端阅览
申思楠,牟珍妮,唐丽等.寿胎丸通过调控Nrf2信号通路减轻人绒毛膜滋养层细胞的氧化损伤治疗复发性流产[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(03):44-51.

SHEN Sinan,MU Zhenni,TANG Li,et al.Shoutaiwan Ameliorates Oxidative Damage of Human Chorionic Trophoblast Cells by Regulating Nrf2 Signaling Pathway to Treat Recurrent Abortion[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(03):44-51.
申思楠,牟珍妮,唐丽等.寿胎丸通过调控Nrf2信号通路减轻人绒毛膜滋养层细胞的氧化损伤治疗复发性流产[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(03):44-51. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20222240.

SHEN Sinan,MU Zhenni,TANG Li,et al.Shoutaiwan Ameliorates Oxidative Damage of Human Chorionic Trophoblast Cells by Regulating Nrf2 Signaling Pathway to Treat Recurrent Abortion[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(03):44-51. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20222240.

摘要

目的

研究寿胎丸含药血清通过核因子E

相关因子2（Nrf2）信号通路对过氧化氢（H

）损伤的人绒毛膜滋养层细胞（HTR-8/Svneo）的保护作用，并阐明其可能的机制。

方法

细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测不同浓度的H

溶液（25、50、100、200、400 μmol·L

-1

）对HTR-8/Svneo增殖的抑制作用，CCK-8法筛选含药血清的最佳浓度。将细胞分为空白组、模型组、地屈孕酮组、寿胎丸组，CCK-8法检测含药血清对H

诱导的HTR-8/Svneo细胞增殖活力的影响，酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组细胞内活性氧（ROS）含量；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测核Nrf2、血红素加氧酶-1（HO-1）、醌氧化还原酶1（NQO1）、胱天蛋白酶-3（Caspase-3）、B细胞淋巴瘤-2（Bcl-2）蛋白表达；细胞免疫荧光检测Nrf2、Bcl-2的表达；实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测Nrf2、Caspase-3、Bcl-2相关X蛋白（Bax）mRNA的表达。

结果

CCK-8法筛选H

最佳造模浓度为50 μmol·L

-1

，含药血清的最佳体积分数为10%。与空白组比较，模型组细胞的增殖活力显著降低（

0.01），细胞内ROS含量显著升高（

0.01），Nrf2、HO-1、NQO1、Bcl-2蛋白表达明显下降（

0.05，

0.01），Caspase-3、Bax蛋白表达显著上升（

0.01），Nrf2 mRNA表达显著降低（

0.01），Caspase-3、Bax mRNA的表达明显升高（

0.05，

0.01）；与模型组比较，寿胎丸组细胞的增殖活力显著上升（

0.01），细胞内ROS含量显著降低（

0.01），Nrf2、HO-1、NQO1、Bcl-2蛋白表达明显上升（

0.05，

0.01），Caspase-3、Bax蛋白表达明显下降（

0.05，

0.01），Nrf2 mRNA表达明显升高（

0.05），Caspase-3、Bax mRNA的表达明显降低（

0.05，

0.01）。

结论

寿胎丸含药血清可以通过激活Nrf2信号通路来抑制H

诱导的细胞凋亡，对人绒毛膜滋养层细胞具有一定的保护作用。

Abstract

Objective

To study the protective effect of Shoutaiwan-containing serum on the human chorionic trophoblast cells （HTR-8/Svneo） exposed to hydrogen peroxide （H

） via the nuclear factor erythroid 2-related factor 2 （Nrf2） signaling pathway and to decipher the underlying mechanism.

Method

The H

solutions of 25， 50， 100， 200， 400 μmol·L

-1

were used to treated the HTR-8/Svneo cells. The cell counting kit-8 （CCK-8） was employed to measure the proliferation of the cells and further determine the optimal concentration of H

solution for modeling and the drug-containing serum. The cells were divided into a blank group， a model group， a dydrogesterone group， and a Shoutaiwan group. The effect of drug-containing serum on H

-induced proliferation of HTR-8/Svneo cells was detected by CCK-8 assay. The intracellular reactive oxygen species （ROS） in each group was determined by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. Western blot was employed to determine the protein levels of Nrf2， heme oxygenase-1 （HO-1）， quinone oxidoreductase 1 （NQO1）， cysteine-containing aspartate-specific protease-3 （Caspase-3）， and B cell lymphoma/leukemia-2 （Bcl-2）. Cellular immunofluorescence was employed to detect the expression of Nrf2 and Bcl-2. Real-time quantitative polymerase chain reaction （Real-time PCR） was carried out to examine the mRNA level of Nrf2， Caspase-3， and Bcl-2 associated X protein （Bax）.

Result

The optimal concentration of H

for modeling was 50 μmol·L

-1

， and the optimal concentration of drug-containing serum was 10%. Compared with the blank group， the modeling decreased the proliferation of cells （

0.01）， increased the intracellular ROS （

0.01）， down-regulated the protein levels of Nrf2， HO-1， NQO1， and Bcl-2 （

0.05，

0.01）， up-regulated the protein levels of Caspase-3 and Bax （P

0.01）， down-regulated the mRNA level of Nrf2 （

0.01）， and up-regulated the mRNA levels of Caspase-3 and Bax （

0.05，

0.01）. Compared with the model group， Shoutaiwan-containing serum increased the proliferation of cells （

0.01）， reduced the intracellular ROS （

0.01）， up-regulated the protein levels of Nrf2， HO-1， NQO1， and Bcl-2 （

0.01）， down-regulated the protein levels of Caspase-3 and Bax （

0.05，

0.01）， up-regulated the mRNA level of Nrf2 （

0.05）， and down-regulated the mRNA levels of Caspase-3 and Bax （

0.05，

0.01）.

Conclusion

Shoutaiwan-containing serum can inhibit H

-induced apoptosis by activating the Nrf2 signaling pathway and has protective effect on human chorionic trophoblast cells.

关键词

Keywords

references

中华医学会妇产科学分会产科学组 . 复发性流产诊治的专家共识［J］. 中华妇产科杂志， 2016 ， 51 （ 1 ）： 3 - 9 .

张宏展，余姝毅，陈现，等 . 复发性流产的病因分析［J］. 生殖医学杂志， 2017 ， 26 （ 9 ）： 932 - 935 .

SRINIVAS S K ， MA Y ， SAMMEL M D ， et al . Placental inflammation and viral infection are implicated in second trimester pregnancy loss ［J］. Am J Obstet Gynecol ， 2006 ， 195 （ 3 ）： 797 - 802 .

COHN D M ， GODDIJN M ， MIDDELDORP S ， et al . Recurrent miscarriage and antiphospholipid antibodies：Prognosis of subsequent pregnancy ［J］. J Thromb Haemost ， 2010 ， 8 （ 10 ）： 2208 - 2213 .

DEAN D D ， AGARWAL S ， MIDDELDORP S . Defining the role of FMR1 gene in unexplained recurrent spontaneous abortion ［J］. J Assist Reprod Genet ， 2019 ， 36 （ 11 ）： 2245 - 2250 .

AL-SHEIKH Y A ， GHNEIM H K ， ALHARBI A F ， et al . Molecular and biochemical investigations of key antioxidant/oxidant molecules in Saudi patients with recurrent miscarriage ［J］. Exp Ther Med ， 2019 ， 18 （ 6 ）： 4450 - 4460 .

BURRUEL V ， KLOOSTER K ， BARKER C M ， et al . Abnormal early cleavage events predict early embryo demise：Sperm oxidative stress and early abnormal cleavage ［J］. Sci Rep ， 2014 ， 4 ： 6598 - 6607 .

JAUNIAUX E ， HEMPSTOCK J ， GREENWOLD N ， et al . Trophoblastic oxidative stress in relation to temporal and regional differences in maternal placental blood flow in normal and abnormal early pregnancies ［J］. Am J Pathol ， 2003 ， 162 （ 1 ）： 115 - 125 .

邓永丽，黄月颖，桑晓庆，等 . 寿胎丸联合桃红四物汤在不孕症患者治疗期间对妊娠质量和免疫因子的影响［J］. 中药材， 2021 ， 44 （ 7 ）： 1767 - 1769 .

付笑笑，褚楚，黑国真，等 . 寿胎丸靶向miR-374c-5p/ATG12信号轴减轻滋养细胞自噬治疗原因不明复发性自然流产［J］. 中国免疫学杂志， 2022 ， 38 （ 3 ）： 358 - 364 .

赖裕玲，张莹轩，曾丽华，等 . 减味寿胎丸对流产模型大鼠子宫蜕膜脂质过氧化及铁死亡蛋白表达的影响［J］. 中医杂志， 2021 ， 62 （ 21 ）： 1917 - 1922，1929 .

ZHANG D D ， CHAPMAN E . The role of natural products in revealing NRF2 function ［J］. Nat Prod Rep ， 2020 ， 37 （ 6 ）： 797 - 826 .

HUSSAIN T ， TAN B ， LIU G ， et al . Modulatory mechanism of polyphenols and Nrf2 signaling pathway in LPS challenged pregnancy disorders ［J］. Oxid Med Cell Longev ， 2017 ， 2017 ： 8254289 .

汤同娟，王翔，左梦雨，等 . 苓桂术甘汤含药血清通过PI3K/Akt信号通路保护H 2 O 2 诱导的H9c2细胞损伤［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 13 ）： 1 - 9 .

乔宗惠，申思楠，邓敦，等 . 寿胎丸对脂多糖诱导的人绒毛外滋养细胞氧化应激及焦亡的调节作用［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 17 ）： 17 - 24 .

WANG X ， FALCONE T ， ATTARAN M ， et al . Vitamin C and vitamin E supplementation reduce oxidative stress-induced embryo toxicity and improve the blastocyst development rate ［J］. Fertil Steril ， 2002 ， 78 （ 6 ）： 1272 - 1277 .

KITAGAWA Y ， SUZUKI K ， YONEDA A ， et al . Effects of oxygen concentration and antioxidants on the in vitro developmental ability，production of reactive oxygen species （ROS），and DNA fragmentation in porcine embryos ［J］. Theriogenology ， 2004 ， 62 （ 7 ）： 1186 - 1197 .

GAO J M ， LI R ， ZHANG L ， et al . Cuscuta chinensis seeds water extraction protecting murine osteoblastic MC3T3-E1 cells against tertiary butyl hydroperoxide induced injury ［J］. J Ethnopharmacol ， 2013 ， 148 （ 2 ）： 587 - 595 .

华一琍，吴慧平，张融瑞，等 . 桑寄生的降脂作用和抗脂质过氧化反应的研究［J］. 中国医药学报， 1995 ， 1 ： 40 - 41 .

WAZ S ， HEEBA G H ， HASSANIN S O ， et al . Nephroprotective effect of exogenous hydrogen sulfide donor against cyclophosphamide-induced toxicity is mediated by Nrf2/HO-1/NF- κ B signaling pathway ［J］. Life Sci ， 2021 ， 264 （ 5 ）： 118630 - 118638 .

KWEIDER N ， HUPPERTZ B ， WRUCK C J ， et al . A role for Nrf2 in redox signalling of the invasive extravillous trophoblast in severe early onset IUGR associated with preeclampsia ［J］. PLoS One ， 2012 ， 7 （ 10 ）： e47055 .

LUAN X ， YAN Y ， ZHENG Q ， et al . Excessive reactive oxygen species induce apoptosis via the APPL1-Nrf2/HO-1 antioxidant signalling pathway in trophoblasts with missed abortion ［J］. Life Sci ， 2020 ， 254 ： 117781 - 117793 .

PORTER A G ， JÄNICKE R U . Emerging roles of Caspase-3 in apoptosis ［J］. Cell Death Differ ， 1999 ， 6 （ 2 ）： 99 - 104 .

KALAGATUR N K ， ABD ALLAH E F ， PODA S ， et al . Quercetin mitigates the deoxynivalenol mycotoxin induced apoptosis in SH-SY5Y cells by modulating the oxidative stress mediators ［J］. Saudi J Biol Sci ， 2021 ， 28 （ 1 ）： 465 - 477 .

CUI J ， PLACZEK W J . Post-transcriptional regulation of anti-apoptotic Bcl-2 family members ［J］. Int J Mol Sci ， 2018 ， 19 （ 1 ）： 308 - 329 .

严伟伟，李国辉，贾仰民，等 . 芍药苷对醋酸铅诱导海马神经元凋亡及Bcl-2/Bax蛋白表达的影响［J］. 中国现代应用药学， 2022 ， 39 （ 6 ）： 730 - 737 .

Views

下载量

CSCD

Alert me when the article has been cited

提交

Tools

Publicity Resources

Intervention of Acute Lung Injury by Traditional Chinese Medicine via Regulating Oxidative Stress： A Review

Mechanism of Culuan Heji in Regulating AMPK/mTOR/HIF-1/VEGF Pathway to Improve Oxidative Stress and Apoptosis in Rats with Follicular Maldevelopment

Regulation of Nrf2 Pathway by Traditional Chinese Medicine in Prevention and Treatment of Alzheimer's Disease： A Review

Da Chengqitang in Treatment of Sepsis： A Review

Related Author

SHEN Sinan

MU Zhenni

TANG Li

LEI Lei

LI Ang'ang

LIANG Xiao

LI Junmei

PENG Qing

Related Institution

College of Integrated Chinese and Western Medicine， Key Laboratory of Hunan Province for Integrated Traditional Chinese and Western Medicine on Prevention and Treatment of Cardio-Cerebral Diseases， Hunan University of Chinese Medicine， Changsha 410208， China

Chinese Medicine Research Institute，Guangdong Pharmaceutical University

Beijing Key Laboratory of Pharmacology of Chinese Materia Medica，Institute of Basic Medical Sciences of Xiyuan Hospital，China Academy of Chinese Medical Sciences

Fujian University of Traditional Chinese Medicine（TCM）

Research Base of TCM Syndrome of Fujian University of TCM

AI问答

Postal code：100700
Tel：010-84076882 Email：syfjx_2010@188.com
Technical support is provided by Beijing Founder electronics co., LTD 京ICP备11006657号-10 京公网安备11010802024621
It is recommended to read the content of this site in Chrome&IE9+. Please switch to extreme mode in browser 360.
Cookies We use cookies to help provide and enhance our service and tailor content. By continuing, you agree to the use of cookies.

⁰