Regulation of Danshen Zexie Decoction on AMPK/Nrf2 Signaling Pathway in Rats with Metabolic-associated Fatty Liver Disease

BIAO Yaning; CHU Xinqiao; ZHANG Muqing; LIU Chenxu; SHI Cheng; LI Sitong; ZHANG Yixin

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20222244

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Regulation of Danshen Zexie Decoction on AMPK/Nrf2 Signaling Pathway in Rats with Metabolic-associated Fatty Liver Disease

更新时间：2022-12-08

- Regulation of Danshen Zexie Decoction on AMPK/Nrf2 Signaling Pathway in Rats with Metabolic-associated Fatty Liver Disease
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 29, Issue 1, Pages: 67-74(2023)
- 作者机构：
  
  1.河北中医学院药学院，河北省中药资源利用与质量评价国际联合研究中心，河北省高校中药组方制剂应用技术研发中心，石家庄 050200
  2.中国中医科学院广安门医院，北京 100053
  3.河北省中医院，石家庄 050011
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20222244
  CLC： R2-0;R33;R289;R575
- Received：12 July 2022，
  
  Published Online：06 October 2022，
  
  Published：05 January 2023
- 稿件说明：
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彪雅宁,储心乔,张睦清等.丹参泽泻汤对代谢相关脂肪性肝病大鼠AMPK/Nrf2信号通路的调节作用[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(01):67-74.

BIAO Yaning,CHU Xinqiao,ZHANG Muqing,et al.Regulation of Danshen Zexie Decoction on AMPK/Nrf2 Signaling Pathway in Rats with Metabolic-associated Fatty Liver Disease[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(01):67-74.
彪雅宁,储心乔,张睦清等.丹参泽泻汤对代谢相关脂肪性肝病大鼠AMPK/Nrf2信号通路的调节作用[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(01):67-74. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20222244.

BIAO Yaning,CHU Xinqiao,ZHANG Muqing,et al.Regulation of Danshen Zexie Decoction on AMPK/Nrf2 Signaling Pathway in Rats with Metabolic-associated Fatty Liver Disease[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(01):67-74. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20222244.

摘要

目的

探讨丹参泽泻汤对代谢相关脂肪性肝病（MAFLD）大鼠的防治作用及其作用机制。

方法

60只SD大鼠随机分为正常组、模型组、易善复组（0.144 g·kg

-1

）和丹参泽泻汤低、中、高剂量组（1.16、2.32、4.64 g·kg

-1

），给予高脂饲料建立MAFLD模型。造模同时给予药物治疗，连续8周。检测血清中总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、丙氨酸氨基转移酶（ALT）、天冬氨酸氨基转移酶（AST）及肝组织中TC、TG、游离脂肪酸（FFA）、超氧化物歧化酶（SOD）、还原型谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）的含量或活性变化；苏木素-伊红（HE）染色和油红O染色观察肝组织病理形态学变化，并计算脂肪变性评分和油红染色面积；免疫荧光法检测肝组织中活性氧（ROS）含量；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测肝组织中腺苷酸活化蛋白激酶（AMPK）、磷酸化（p）-AMPK、核因子E

相关因子（Nrf2）、谷胱氨酸连接酶催化亚基（GCLC）、谷胱氨酸连接酶调节亚基（GCLM）和醌氧化还原酶1（NQO1）的蛋白表达情况。

结果

与正常组比较，模型组大鼠血清中TC、TG、ALT、AST及肝组织中TC、TG、FFA、MDA、ROS含量或活性均显著升高（

0.01），肝组织中SOD活性、GSH含量及p-AMPK、Nrf2、GCLC、GCLM和NQO1蛋白表达水平均明显降低（

0.05，

0.01），肝细胞内出现大量脂滴空泡和较多的气球样病变，脂肪变性评分和油红染色面积均显著升高（

0.01）。与模型组比较，丹参泽泻汤各剂量组均能显著降低大鼠血清中TC、TG、ALT、AST及肝组织中TC、TG、FFA、MDA、ROS含量或活性（

0.01），升高肝组织中SOD活性、GSH含量及p-AMPK、Nrf2、GCLC、GCLM和NQO1蛋白表达水平（

0.05，

0.01），明显改善肝组织脂肪变性（

0.05，

0.01）。

结论

丹参泽泻汤可能通过激活AMPK/Nrf2信号通路，抑制氧化应激，发挥防治MAFLD的作用。

Abstract

Objective

To explore

the efficacy and mechanism of Danshen Zexie decoction in treating the rats with metabolic-associated fatty liver disease （MAFLD）.

Method

Sixty male SD rats were randomized into control group， model group， essentiale （polyene phosphatidylcholine capsules， 0.144 g·kg

-1

） group， and low-， medium-， and high-dose Danshen Zexie decoction （1.16， 2.32， and 4.64 g·kg

-1

， respectively） groups. The rat model of MAFLD was established with high fat diet， and 8-week therapy started at the induction of MAFLD. The serum levels of total cholesterol （TC）， triglyceride （TG）， alanine aminotransferase （ALT）， and aspartate aminotransferase （AST）， as well as the liver levels of TC， TG， free fatty acid （FFA）， superoxide dismutase （SOD）， glutathione （GSH）， and malondialdehyde （MDA）， were measured. The pathological changes of liver were observed by hematoxylin-eosin （HE） staining and oil red O staining， and the steatosis score and oil red O staining area were calculated. The level of reactive oxygen species （ROS） in the liver was detected by immunofluorescence. The protein levels of adenosine monophosphate-activated protein kinase （AMPK）， p-AMPK， nuclear factor E

-related factor 2 （Nrf2）， glutamate-cysteine ligase catalytic subunit （GCLC）， glutamate-cysteine ligase modifier subunit （GCLM）， and nicotinamide adenine dinucleotide phosphate： quinine oxidoreductase （NQO1） in the liver were determined by Western blot.

Result

Compared with control group， the modeling of MAFLD elevated the levels of TC， TG， ALT， and AST in the serum and TC， TG， FFA， MDA， and ROS in the liver （

0.01）， lowered the levels of SOD and GSH and down-regulated the protein levels of phosphorylation（p）-AMPK， Nrf2， GCLC， GCLM， and NQO1 in the liver （

0.05，

0.01）. Further， a large number of lipid droplet vacuoles and balloon-like lesions appeared in the hepatocytes， and the steatosis score and oil red O staining area increased in the model group （

0.01）. Compared with model group， Danshen Zexie decoction lowered the levels of TC， TG， ALT， and AST in the serum and TC， TG， FFA， MDA， and ROS in the liver （

0.01）， increased the levels of SOD and GSH and up-regulated the protein levels of p-AMPK， Nrf2， GCLC， GCLM， and NQO1 in the liver （

0.05，

0.01）. Moreover， the decoction alleviated the degree of liver steatosis （

0.05，

0.01）.

Conclusion

Danshen Zexie decoction protects against MAFLD by activating AMPK/Nrf2 signaling pathway and suppressing oxidative stress.

关键词

Keywords

references

LE J M ， JIA W P ， SUN Y N . Sennoside A protects mitochondrial structure and function to improve high-fat diet-induced hepatic steatosis by targeting VDAC1 ［J］. Biochem Biophys Res Commun ， 2018 ， 500 （ 2 ）： 484 - 489 .

YOUNOSSI Z M ， KOENIG A B ， ABDELATIF D ， et al . Global epidemiology of nonalcoholic fatty liver disease-Meta-analytic assessment of prevalence，incidence，and outcomes ［J］. Hepatology ， 2016 ， 64 （ 1 ）： 73 - 84 .

ZHOU J ， ZHOU F ， WANG W ， et al . Epidemiological features of NAFLD from 1999 to 2018 in China ［J］. Hepatology ， 2020 ， 71 （ 5 ）： 1851 - 1864 .

ESTES C ， ANSTEE Q M ， ARIAS-LOSTE M T ， et al . Modeling NAFLD disease burden in China，France，Germany，Italy，Japan，Spain，United Kingdom，and United States for the period 2016-2030 ［J］. J Hepatol ， 2018 ， 69 （ 4 ）， 896 - 904 .

ZHAO Z ， WANG C ， ZHANG L ， et al . Lactobacillus plantarum NA136 improves the non-alcoholic fatty liver disease by modulating the AMPK/Nrf2 pathway ［J］. Appl Microbiol Biotechnol ， 2019 ， 103 （ 14 ）： 5843 - 5850 ．

许琼梅，高雅，李梓萌，等 . 龙胆苦苷对非酒精性脂肪肝TLR-4/NF- κ B和AMPK/Nrf2通路的影响［J］. 天然产物研究与开发， 2020 ， 32 （ 10 ）： 1652 - 1658 .

张金付 . 橘丹汤治疗痰瘀互结证型非酒精性脂肪肝临床疗效观察［J］. 中医临床研究， 2021 ， 13 （ 35 ）： 53 - 54 .

李爱珍 . 泽泻汤治疗高脂血症的临床疗效［J］. 临床合理用药杂志， 2018 ， 11 （ 12 ）： 114 - 115 .

蒋元烨，敬梦辉，陆娟，等 . 泽泻汤联合多烯磷脂胆碱治疗非酒精性脂肪肝痰湿内阻证的临床研究［J］. 现代中西医结合杂志， 2018 ， 27 （ 27 ）： 2969 - 2971，2975 .

韩雪，张睦清，常冰，等 . 泽泻汤对高脂血症大鼠脂代谢及PPAR α 和ACO基因和蛋白表达的影响［J］. 中国药理学通报， 2017 ， 33 （ 12 ）： 1761 - 1765 .

路帅，郭建利，彪雅宁，等 . 丹参、泽泻对非酒精性脂肪肝大鼠氧化应激和血管内皮的影响［J］. 亚太传统医药， 2020 ， 16 （ 10 ）： 37 - 40 .

陈奇 . 中药药理研究方法学［M］. 3版 . 北京：人民卫生出版社， 2011 ： 1261 - 1262 ．

姚笑睿，夏凡，唐外姣，等 . 护肝清脂片对非酒精性脂肪肝大鼠肝脏中AMPK通路激活及NF- κ B-p65蛋白的影响［J］. 南方医科大学学报， 2017 ， 37 （ 1 ）： 56 - 62 .

刘波，翟玉荣，丁汀汀，等 . 苦瓜皂苷改善非酒精性脂肪肝大鼠中氧化应激的作用研究［J］. 中药药理与临床， 2017 ， 33 （ 4 ）： 49 - 52 ．

金玲，杨钦河，张玉佩，等 . 参苓白术散对NAFLD大鼠肝组织Nrf2/ARE信号通路的影响［J］. 中药新药与临床药理， 2016 ， 27 （ 3 ）： 327 - 332 .

WAZ S ， HEEBA G H ， HASSANIN S O ， et al . Nephroprotective effect of exogenous hydrogen sulfide donor against cyclophosphamide-induced toxicity is mediated by Nrf2/HO-1/NF- κ B signaling pathway ［J］. Life Sci ， 2021 ， 264 ： 118630 .

WU W Y ， CUI Y K ， HONG Y X ， et al . Doxorubicin cardiomyopathy is ameliorated by acacetin via Sirt1-mediated activation of AMPK/Nrf2 signal molecules ［J］. J Cell Mol Med ， 2020 ， 24 （ 20 ）： 12141 - 12153 .

XU Z ， FENG W ， SHEN Q ， et al . Rhizoma Coptidis and berberine as a natural drug to combat aging and aging-related diseases via anti-oxidation and AMPK activation ［J］. Aging Dis ， 2017 ， 8 （ 6 ）： 760 - 777 .

PARK J S ， LEEM Y H ， PARK J E ， et al . Neuroprotective effect of β -Lapachone in MPTP-induced Parkinson's disease mouse model：Involvement of astroglial p-AMPK/Nrf2/HO-1 signaling pathways ［J］. Biomol ， 2019 ， 27 （ 2 ）： 178 - 184 .

SHUKLA K ， SONOWAL H ， SAXENA A ， et al . Aldose reductase inhibitor，fidarestat regulates mitochondrial biogenesis via Nrf2/HO-1/AMPK pathway in colon cancer cells ［J］. Cancer Lett ， 2017 ， 411 （ 1 ）： 57 - 63 .

潘水珍，蔡月琴，张利棕，等 . VitE对非酒精性脂肪性肝炎大鼠肝脏Nrf2、HO-1、NQO1表达的影响［J］. 浙江中医药大学学报， 2014 ， 38 （ 11 ）： 1253 - 1257 .

金玲，杨钦河，张玉佩，等 . 参苓白术散对NAFLD大鼠肝组织Nrf2/ARE信号通路的影响［J］. 中药新药与临床药理， 2016 ， 27 （ 3 ）： 327 - 332 .

张悦，周晓玲，李泽鹏，等 . 基于Keap1/Nrf2/ARE信号通路探讨理中汤对非酒精性脂肪性肝炎大鼠抗氧化应激及其作用机制研究［J］. 辽宁中医杂志， 2021 ， 48 （ 12 ）： 10 - 14，223 .

GONZÁLEZ-BURGOS E ， FERNÁNDEZ-MORIANO C ， LOZANO R ， et al . Ginsenosides Rd and Re co-treatments improve rotenone-induced oxidative stress and mitochondrial impairment in SH-SY5Y neuroblastoma cells ［J］. Food Chem Toxicol ， 2017 ， 109 （ Pt 1 ）： 38 - 47 .

高原，于文慧，张美君，等 . Nrf2/HO-1信号通路与缺血再灌注损伤的研究进展［J］. 中国中西医结合外科杂志， 2020 ， 26 （ 4 ）： 776 - 778 .

ZHANG J ， HOSOYA T ， MARUYAMA A ， et al . Nrf2 Neh5 domain is differentially utilized in the transactivation of cytoprotective genes ［J］. Biochem J ， 2007 ， 404 （ 3 ）： 459 - 466 .

张天雅，张志红，张冬，等 . 从氧化应激角度探讨补阳还五汤对糖尿病周围神经病变大鼠的治疗作用［J］. 中国实验方剂学杂志， 2022 ， 28 （ 13 ）： 10 - 18 .

LANGSTON W ， LI W ， HARRISON L ， et al . Activation of promoter activity of the catalytic subunit of γ -glutamylcysteine ligase （GCL） in brain endothelial cells by insulin requires antioxidant response element 4 and altered glycemic status：Implication for GCL expression and GSH synthesis ［J］. Free Radic Biol Med ， 2011 ， 51 （ 9 ）： 1749 - 1757 ．

徐燕，吴毅，王胜强，等 . 植物乳杆菌对非酒精性脂肪肝小鼠的肝保护机制［J］. 基因组学与应用生物学， 2020 ， 39 （ 4 ）： 1845 - 1851 ．

吴展兴，许林勇 . 依达拉奉对一氧化碳中毒后大鼠脑组织HO-1和NRF-2表达的影响［J］. 中国老年学杂志， 2018 ， 38 （ 1 ）： 47 - 49 .

QIU M Y ， XIAO F Q ， WANG T N ， et al . Protective effect of Hedansanqi Tiaozhi Tang against non-alcoholic fatty liver disease in vitro and in vivo through activating Nrf2/HO-1 antioxidant signaling pathway ［J］. Phytomedicine ， 2020 ， 67 ， 153140 .

刘波，翟玉荣，丁汀汀，等 . 苦瓜皂苷改善非酒精性脂肪肝大鼠中氧化应激的作用研究［J］. 中药药理与临床， 2017 ， 33 （ 4 ）： 49 - 52 .

李晓东，陈芝芸，俞建顺，等 . 山楂叶总黄酮对非酒精性脂肪性肝炎大鼠组织COX-2/Nrf2表达的影响［J］. 中国中药杂志， 2016 ， 41 （ 4 ）： 711 - 715 .

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