Effect and Mechanism of Nongsuo Dangguiwan in Relieving Oxidative Stress in Premature Ovarian Insufficiency Rats Based on Nrf2/HO-1 Signaling Pathway

LUO Jiaqi; DU Xiaoli; CHEN Dongmei; CHEN Miao; HU Na; XING Shasha; LIU Wenzhao; TIAN Ruiying; YANG Li; WANG Jing; HE Rui; MA Huiming

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20230403

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

Effect and Mechanism of Nongsuo Dangguiwan in Relieving Oxidative Stress in Premature Ovarian Insufficiency Rats Based on Nrf2/HO-1 Signaling Pathway

更新时间：2023-06-02

- Effect and Mechanism of Nongsuo Dangguiwan in Relieving Oxidative Stress in Premature Ovarian Insufficiency Rats Based on Nrf2/HO-1 Signaling Pathway
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 29, Issue 13, Pages: 1-9(2023)
- 作者机构：
  
  1.宁夏医科大学，银川 750004
  2.宁夏医科大学生育力保持教育部重点实验室，银川 750004
  3.宁夏医科大学宁夏少数民族医药现代化教育部重点实验室，银川 750004
  4.宁夏区域高发病中西医结合防治研究重点实验室，银川 750004
  5.宁夏医科大学总医院宁夏干细胞与再生医学重点实验室，银川 750004
  6.宁夏医科大学基础医学院，银川 750004
  7.宁夏医科大学实验动物中心，银川 750004
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20230403
  CLC： R2-0;R22;R285.5;R289;R33
- Published：05 July 2023，
  
  Published Online：02 February 2023，
  
  Received：15 September 2022，
- 稿件说明：
扫描看全文
罗嘉琦,杜小利,陈冬梅等.基于Nrf2/HO-1信号通路探讨浓缩当归丸对缓解卵巢功能不全大鼠卵巢氧化应激损伤的影响[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(13):1-9.

LUO Jiaqi,DU Xiaoli,CHEN Dongmei,et al.Effect and Mechanism of Nongsuo Dangguiwan in Relieving Oxidative Stress in Premature Ovarian Insufficiency Rats Based on Nrf2/HO-1 Signaling Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(13):1-9.
罗嘉琦,杜小利,陈冬梅等.基于Nrf2/HO-1信号通路探讨浓缩当归丸对缓解卵巢功能不全大鼠卵巢氧化应激损伤的影响[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(13):1-9. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20230403.

LUO Jiaqi,DU Xiaoli,CHEN Dongmei,et al.Effect and Mechanism of Nongsuo Dangguiwan in Relieving Oxidative Stress in Premature Ovarian Insufficiency Rats Based on Nrf2/HO-1 Signaling Pathway[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(13):1-9. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20230403.

摘要

目的

探讨浓缩当归丸改善卵巢功能不全大鼠卵巢氧化应激损伤的作用及机制。

方法

36只成年雌性SD大鼠，随机分为正常组、模型组、雌二醇（E

）/地屈孕酮片组、浓缩当归丸高、中、低剂量组，每组6只。除正常组外，其余各组大鼠每日腹腔注射乙烯基环己烯（VCD）80 mg·kg

-1

造模，连续14 d。从第15天起，模型组灌胃生理盐水2 mL·kg

-1

；雌二醇/地屈孕酮片组灌胃芬吗通0.3 mg·kg

-1

；浓缩当归丸高、中、低剂量组灌胃浓缩当归丸2.08、4.16、8.32 g·kg

-1

，每日1次，连续给药28 d。测定大鼠卵巢指数；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测血清中相关激素E

、促卵泡激素（FSH）、卵泡刺激素（FSH）、促黄体生成素（LH）和抗缪勒管激素（AMH）水平，以及血清过氧化物歧化酶（SOD）活性、谷胱甘肽（GSH）含量；硫代巴比妥酸（TAB）法检测血清丙二醛（MDA）含量；苏木素-伊红（HE）染色法观察卵巢形态学变化；免疫组化法（IHC）检测卵巢组织中核因子E

相关因子2（Nrf2）、血红素氧合酶-1（HO-1）、SOD2、SOD1的表达；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测卵巢组织中Nrf2、HO-1、SOD2、SOD1蛋白的相对表达量。

结果

与正常组比较，模型组大鼠卵巢中生长卵泡明显减少、卵泡颗粒层排列松散；大鼠体质量、卵巢指数和血清AMH、E

水平显著下降，LH、FSH水平均显著升高（

0.01）；SOD和GSH水平显著下降（

0.01），MDA水平显著升高（

0.01）。与模型组比较，E

/地屈孕酮片组和浓缩当归丸各组卵巢指数均明显增加（

0.05，

0.01），血清中E

水平明显升高（

0.05，

0.01），FSH、AMH、LH水平明显降低（

0.05，

0.01）；卵巢内生长卵泡数量增多；血清中SOD活性增强，GSH含量升高，MDA含量明显下降（

0.05，

0.01）；卵巢组织中Nrf2、HO-1、SOD2、SOD1蛋白表达水平明显上调（

0.05，

0.01）。

结论

浓缩当归丸能够调节血清激素水平，且增加卵巢组织中Nrf2、HO-1、SOD2、SOD1因子的表达，提高卵巢组织抗氧化能力抵抗氧化应激损伤，从而改善卵巢储备功能。

Abstract

Objective

To investigate the effect and mechanism of Nongsuo Dangguiwan in improving ovarian oxidative stress in rats with ovarian dysfunction.

Method

Thirty-six adult female SD rats were randomly divided into normal group， model group， positive drug group （Femoston， 0.3 mg·kg

-1

）， and high-， medium-， and low-dose groups of concentrated Nongsuo Dangguiwan （2.08， 4.16， 8.32 g·kg

-1

）， with six rats in each group. Rats， except for those in the normal group， were injected with 80 mg·kg

-1

vinyl cyclohexene dioxide （VCD） per day for 14 consecutive days to induce ovarian dysfunction. From the 15th day， rats were treated with corresponding drugs by gavage， while those in the model group received 2 mL·kg

-1

saline， once daily for 28 consecutive days. The ovarian index， levels of related hormones including estradiol （E

）， follicle-stimulating hormone （FSH）， luteinizing hormone （LH）， and anti-mullerian hormone （AMH） in serum， as well as superoxide dismutase （SOD） activity and glutathione （GSH） content in serum were measured by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）. The malondialdehyde （MDA） content in serum was detected by the thiobarbituric acid （TAB） method. Ovarian morphology was observed by hematoxylin-eosin （HE） staining. The expression of nuclear factor E

-related factor 2 （Nrf2）， heme oxygenase-1 （HO-1）， SOD2， and SOD1 in ovarian tissues was detected by immunohistochemistry （IHC） and Western blot.

Result

Compared with the normal group， the model group showed a significant reduction in growing follicles in the ovary， loose arrangement of granulosa cells in the follicle， decreased body weight， ovarian index， and serum AMH and E

levels， increased LH and FSH levels （

0.01）， reduced levels of SOD and GSH in serum （

0.01）， and increased MDA level （

0.01）. Compared with the model group， the groups with drug intervention showed increased ovarian index （

0.05，

0.01）， increased serum E

level （

0.05，

0.01）， decreased FSH， AMH， and LH levels （

0.05，

0.01）， increased number of growing follicles in the ovary， potentiated SOD activity in serum， increased GSH content， decreased MDA content （

0.05，

0.01）， and up-regulated expression levels of Nrf2， HO-1， SOD2， and SOD1 proteins in ovarian tissues （

0.05，

0.01）.

Conclusion

Nongsuo Dangguiwan can regulate serum hormone levels， increase the expression of Nrf2， HO-1， SOD2， and SOD1 in ovarian tissues， and improve ovarian antioxidant capacity to resist oxidative stress injury， thereby improving ovarian reserve function.

关键词

浓缩当归丸卵巢功能不全性激素活性氧

Keywords

Nongsuo Dangguiwanpremature ovarian insufficiencysex hormonesreactive oxygen species

references

陈峰荣，周彤，尚坤.二至丸对卵巢早衰大鼠治疗作用及机制的实验研究［J］.中华中医药学刊，2022，40（7）：145-149，后插13，15.

TSILIGIANNIS S，PANAY N，STEVENSON J C.Premature ovarian insufficiency and long-term health consequences［J］.Curr Vasc Pharmacol，2019，17（6）：604-609.

郭东艳，周桦，范妤，等.熟地黄汤对卵巢早衰大鼠卵巢保护作用及机制的实验研究［J］.中国中药杂志，2019，44（21）：4698-4703.

梁欢，付楝.石窑当归提取物对卵巢早衰大鼠的改善作用及Rictor/mTORC2信号通路的影响［J］.广西医学，2020，42（11）：1394-1398.

LU J，WANG Z，CAO J，et al.A novel and compact review on the role of oxidative stress in female reproduction［J］.Reprod Biol Endocrinol，2018，16（1）：80.

梁程程，杨红，齐聪，等.氧化应激对卵巢储备功能下降的影响及中西医抗氧化治疗研究进展［J］.中国中西医结合杂志，2021，41（7）：885-889.

刘雪玲，胡春艳，刘港，等.卵巢早衰发病机制及相关治疗机制的最新研究进展［J］.江苏大学学报：医学版，2021，31（6）：541-548.

CAI L，ZONG D K，TONG G Q，et al.Apoptotic mechanism of premature ovarian failure and rescue effect of traditional Chinese medicine： A review［J］.J Tradit Chin Med，2021，41（3）：492-498.

赵翔凤，相光鑫，王加锋，等.当归功效主治及用药禁忌的本草考证［J］.中华中医药杂志，2020，35（5）：2479-2482.

李伟霞，泥文娟，王晓艳，等.当归化学成分、药理作用及其质量标志物（Q-marker）的预测分析［J］.中华中医药学刊，2022，40（6）：40-47，274.

陈燕霞.补肾促卵方调控PI3K和Nrf2信号通路保护卵巢储备功能低下的机制研究［D］.北京：中国中医科学院，2020.

REIS F M，PESTANA-OLIVEIRA N，LEITE C M，et al.Hormonal changes and increased anxiety-like behavior in a perimenopause-animal model induced by 4-vinylcyclohexene diepoxide （VCD） in female rats［J］.Psychoneuroendocrinology，2014，49：130-140.

KAPPELER C J，HOYER P B.4-vinylcyclohexene diepoxide： A model chemical for ovotoxicity［J］.Syst Biol Reprod Med，2012，58（1）：57-62.

何啸兰，王鹍鹏，周月希，等.毓麟珠对卵巢早衰大鼠SIRT1-FoxO1-自噬通路的调控作用［J］.中国病理生理杂志，2022，38（6）：1091-1104.

吴芸，王皓，王喆，等.人脐带间充质干细胞卵巢原位注射对大鼠卵巢早衰的治疗作用［J］.中国细胞生物学学报，2021，43（12）：2334-2343.

KIRSHENBAUM M，ORVIETO R.Premature ovarian insufficiency （POI） and autoimmunity-an update appraisal［J］.J Assist Reprod Genet，2019，36（11）：2207-2215.

李祖昂，崔晓萍，马瑞，等.卵巢早衰证候分类学的研究进展［J］.长春中医药大学学报，2021，37（4）：920-923.

陈营营.基于中医传承辅助平台分析卵巢早衰的中医证候分布及用药规律［D］.兰州：甘肃中医药大学，2019.

李莉，卢鹏，高霞.当归多糖通过Akt/FOXO3通路调节免疫性卵巢早衰小鼠内分泌功能［J］.基因组学与应用生物学，2019，38（07）：3268-3272.

HOYER P B，SIPES I G.Assessment of follicle destruction in chemical-induced ovarian toxicity［J］.Annu Rev Pharmacol Toxicol，1996，36：307-331.

HOYER P B，DEVINE P J，HU X，et al.Ovarian toxicity of 4-vinylcyclohexene diepoxide： A mechanistic model［J］.Toxicol Pathol，2001，29（1）：91-99.

APPT S E，KAPLAN J R，CLARKSON T B，et al.Destruction of primordial ovarian follicles in adult cynomolgus macaques after exposure to 4-vinylcyclohexene diepoxide： A nonhuman primate model of the menopausal transition［J］.Fertil Steril，2006，86（4Suppl）：1210-1216.

MAYER L P，DEVINE P J，DYER C A，et al.The follicle-deplete mouse ovary produces androgen［J］.Biol Reprod，2004，71（1）：130-138.

靳琦，尹平，郑慧敏.早发性卵巢功能不全动物模型研究概述［J］.中华中医药杂志，2022，37（1）：305-308.

王蕾，马欣原，冯欣，等.辅酶Q10片联合雌二醇片/雌二醇地屈孕酮片治疗早发性卵巢功能不全所致不孕症的临床研究［J］.药物评价研究，2022，45（3）：538-543.

杨利娟，李昱颉，曹瑾，等.氧化应激参与针刺调节抑郁症的机理研究［J］.世界科学技术—中医药现代化，2016，18（8）：1334-1341.

李仲康，郑嘉华，田彦鹏，等.间充质干细胞治疗卵巢早衰的最新进展及机制［J］.中国组织工程研究，2022，26（1）：141-147.

HAYES J D，DINKOVA-KOSTOVA A T.The Nrf2 regulatory network provides an interface between redox and intermediary metabolism［J］.Trends Biochem Sci，2014，39（4）：199-218.

马广明，刘骥，姜鑫，等.辣木叶多糖对过氧化氢诱导奶牛乳腺上皮细胞氧化损伤的保护作用［J］.动物营养学报，2021，33（1）：350-358.

陈慧琴，李玺，权乾坤，等.龟龄集胶囊对SAMP8 小鼠不同组织MDA、SOD、GSH-Px及端粒酶的影响［J］.现代中医药，2022，42（3）：67-71.

李慧，杨林.Nrf2抗氧化的分子调控机制［J］.生物信息学，2018，16（1）：1-6.

梅杰，吕美，曾佳，等.金银花提取物对热应激奶山羊生产性能、乳成分、血清生化指标和抗氧化能力的影响［J］.动物营养学报，2022，34（9）：5995-6002.

KONRAD F M，KNAUSBERG U，HÖNE R，et al.Tissue heme oxygenase-1 exerts anti-inflammatory effects on LPS-induced pulmonary inflammation［J］.Mucosal Immunol，2016，9（1）：98-111.

黄新宇，刘永林.白藜芦醇激活Nrf2/ARE信号通路降低心肌缺血再灌注损伤大鼠炎症和氧化应激［J］.中华中医药学刊，2017，35（6）：1516-1520.

宋玲玲，王君明，关月晨，等.基于Nrf2/HO-1通路探讨炮制降低雷公藤心毒性的作用机制［J］.中国中药杂志，2022，47（3）：668-675.

WANG J，HU X，JIANG H.The Nrf-2/ARE-HO-1 axis： An important therapeutic approach for attenuating myocardial ischemia and reperfusion injury-induced cardiac remodeling［J］.Int J Cardiol，2015，184：263-264.

AKINO N，WADA-HIRAIKE O，TERAO H，et al.Activation of Nrf2 might reduce oxidative stress in human granulosa cells［J］.Mol Cell Endocrinol，2018，470：96-104.

DU Y，HANG H，XU Y，et al.Association among genetic polymorphisms of GSTP1， HO-1， and SOD-3 and chronic obstructive pulmonary disease susceptibility［J］.Int J Chron Obstruct Pulmon Dis，2019，14：2081-2088.

Views

下载量

CSCD

Alert me when the article has been cited

提交

Tools

Publicity Resources

Biological Mechanism of Drought Improving Quality of Rhizoma Atractylodis Chinensis

Effect of H₂O₂ on Secondary Metabolism in Atractylodes chinensis and Its Mechanism

Brusatol Suppresses Proliferation of Human Gastric Cancer HGC-27 Cells Through Inducing Ferroptosis via Nrf2/HO-1 Pathway

Efficacy and Mechanism of Yishen Shengjing Prescription in Treatment of Oligoasthenospermia

Effect of Danggui Buxuetang on Podocyte Pyroptosis in Diabetic Kidney Disease Rats： An Exploration Based on TXNIP/NLRP3/GSDMD Signaling Pathway

Related Author

ZHAO Kai

YAO Jie

YU Pengcheng

SONG Xiaowen

YAO Yao

HE Luwen

MENG Xiangcai

LIU Sijia

Related Institution

Heilongjiang University of Chinese Medicine

Changhai Hospital， Naval Medical University

Key Laboratory of Famous Doctors and Famous Prescriptions of National Administration of TCM

Beijing Research Institute of Chinese Medicine， Beijing University of Chinese Medicine

School of Traditional Chinese Medicine （TCM）， Beijing University of Chinese Medicine

Postal code：100700
Tel：010-84076882 Email：syfjx_2010@188.com
Technical support is provided by Beijing Founder electronics co., LTD 京ICP备11006657号-10 京公网安备11010802024621
It is recommended to read the content of this site in Chrome&IE9+. Please switch to extreme mode in browser 360.
Cookies We use cookies to help provide and enhance our service and tailor content. By continuing, you agree to the use of cookies.

⁰