Traditional Chinese Medicine Intervenes in Atherosclerosis by Regulating TLR/NLRP3 Pathway via TRPV1/TRPA1

ZHAO Peizhang; YANG Zhen; CHEN Xiangyun; TAO Xuguang; QI Yujie; HE Zhanzhan; CHU Ce; YUAN Yulu; DING Wei; ZHANG Yuxin; XU Yongqi; ZHAO Hongxia; WANG Wenlai

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20231239

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

Traditional Chinese Medicine Intervenes in Atherosclerosis by Regulating TLR/NLRP3 Pathway via TRPV1/TRPA1

更新时间：2023-09-21

- Traditional Chinese Medicine Intervenes in Atherosclerosis by Regulating TLR/NLRP3 Pathway via TRPV1/TRPA1
  增强出版
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 29, Issue 20, Pages: 247-256(2023)
- 作者机构：
  
  1.四川大学华西临床医学院，成都 610041
  2.北京中医药大学，北京 100029
  3.中国中医科学院中医基础理论研究所，北京 100700
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20231239
  CLC： R2-0;R33;R972+.6;R289;G353.11
- Published：20 October 2023，
  
  Published Online：05 September 2023，
  
  Received：28 June 2023，
- 稿件说明：
扫描看全文
赵培彰,杨桢,陈香云等.基于TRPV1/TRPA1调控TLR/NLRP3通路探讨中医药干预动脉粥样硬化研究进展[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(20):247-256.

ZHAO Peizhang,YANG Zhen,CHEN Xiangyun,et al.Traditional Chinese Medicine Intervenes in Atherosclerosis by Regulating TLR/NLRP3 Pathway via TRPV1/TRPA1[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(20):247-256.
赵培彰,杨桢,陈香云等.基于TRPV1/TRPA1调控TLR/NLRP3通路探讨中医药干预动脉粥样硬化研究进展[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(20):247-256. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20231239.

ZHAO Peizhang,YANG Zhen,CHEN Xiangyun,et al.Traditional Chinese Medicine Intervenes in Atherosclerosis by Regulating TLR/NLRP3 Pathway via TRPV1/TRPA1[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(20):247-256. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20231239.

摘要

动脉粥样硬化（AS）是一种脂质堆积、血管内皮功能障碍导致的慢性炎症性疾病，Toll样受体（TLR）/核转录因子-

B（NF-

B）通路与NOD样受体蛋白3（NLRP3）炎性小体通路在动脉粥样硬化的产生中发挥着重要的致炎作用，而瞬时受体电位香草酸亚型1（TRPV1）与瞬时受体电位锚蛋白1（TRPA1）在动脉粥样硬化的发生过程中发挥着重要的保护作用。作者对近10年国内外期刊发表的相关研究进行梳理，研究显示，TRPV1/TRPA1的激活可以通过多种途径激活内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、抑制活性氧（ROS）、抑制胆固醇晶体（CC）的产生进而调控TLR/NF-

B与NLRP3炎性小体通路，抑制TLR/NLRP3介导的炎症反应。同时，中医药中多种单味药有效成分与方剂可有效激活TRPV1/TRPA1或其下游途径，其对动脉粥样硬化中TLR/NLRP3通路可能具有显著调控作用。该文进一步对已探明的方剂及中药单味药有效成分调控AS中TLR/NLRP3通路的机制进行梳理，将TRPV1/TRPA1调控TLR/NLRP3途径的机制与中药方剂与单体成分进行对应。为治疗动脉粥样硬化的中药药物相互作用机制提供新启发，为临床中医药治疗动脉粥样硬化提供新策略。

Abstract

Atherosclerosis is a chronic inflammatory disease caused by lipid accumulation and vascular endothelial dysfunction. The Toll-like receptor （TLR）/nuclear transcription factor-

B （NF-

B） pathway and the NOD-like receptor protein 3 （NLRP3） inflammasome pathway play a proinflammatory role， while the transient receptor potential vanilloid subtype 1 （TRPV1） and transient receptor potential ankyrin 1 （TRPA1） play a protective role in the occurrence of atherosclerosis. We reviewed the relevant studies published in the last 10 years. The results showed that activation of TRPV1/TRPA1 could activate endothelial-type nitric oxide synthase （eNOS） and inhibit the generation of reactive oxygen species （ROS） and cholesterol crystal （CC） to modulate the TLR/NF-

B and NLRP3 inflammasome pathways， thereby inhibiting TLR/NLRP3-mediated inflammatory response. A variety of compound prescriptions and active components of Chinese medicinal materials can activate TRPV1/TRPA1 or its downstream pathway to regulate the TLR/NLRP3 pathway in atherosclerosis. This paper introduces the mechanisms of compound prescriptions and active components of Chinese medicinal materials in regulating the TLR/NLRP3 pathway via TRPV1/TRPA1 in atherosclerosis. This review provides new ideas for the research on the interactions between Chinese medicines in the treatment of atherosclerosis and provides a new strategy for the clinical treatment of atherosclerosis with traditional Chinese medicine.

关键词

动脉粥样硬化香草酸受体亚型1Toll样受体NOD样受体蛋白3（NLRP3）炎性小体研究进展

Keywords

atherosclerosistransient receptor potential vanilloid subtype 1Toll-like receptorNOD-like receptor protein 3 （NLRP3） inflammasomeresearch progress

references

BASATEMUR G L，JØRGENSEN H F，CLARKE M，et al.Vascular smooth muscle cells in atherosclerosis［J］.Nat Rev Cardiol，2019，16（12）：727-744.

中国心血管健康与疾病报告编写组.中国心血管健康与疾病报告2021概要［J］.心脑血管病防治，2022，22（4）：20-36，40.

VAN LEENT M，BELDMAN T J，TONER Y C，et al.Prosaposin mediates inflammation in atherosclerosis［J］.Sci Transl Med，2021，doi：10.1126/scitranslmed.abe1433http://dx.doi.org/10.1126/scitranslmed.abe1433.

KONG P，CUI Z Y，HUANG X F，et al.Inflammation and atherosclerosis：Signaling pathways and therapeutic intervention［J］.Signal Transduct Target Ther，2022，7（1）：131.

BROZ P，DIXIT V M.Inflammasomes：Mechanism of assembly，regulation and signalling［J］.Nat Rev Immunol，2016，16（7）：407-420.

PéTRILLI V，PAPIN S，DOSTERT C，et al.Activation of the NALP3 inflammasome is triggered by low intracellular potassium concentration［J］.Cell Death Differ，2007，14（9）：1583-1589.

亓玉婕，何湛湛，杨桢，等.基于TRPV1对动脉血管平滑肌的自噬作用探讨人参汤治疗AS的作用机制［J］.中国实验方剂学杂志，2023，29（12）：55-62.

ZHANG C，YE L，ZHANG Q，et al.The role of TRPV1 channels in atherosclerosis［J］.Channels （Austin），2020，14（1）：141-150.

GAO W，SUN Y，CAI M，et al.Copper sulfide nanoparticles as a photothermal switch for TRPV1 signaling to attenuate atherosclerosis［J］.Nat Commun，2018，9（1）：231.

PENG G，SHI X，KADOWAKI T.Evolution of TRP channels inferred by their classification in diverse animal species［J］.Mol Phylogenet Evol，2015，84：145-157.

YAO K，DOU B，ZHANG Y，et al.Inflammation-the role of TRPA1 channel［J］.Front Physiol，2023，14：1093925.

ZOU Y，HUANG Y，LIU S，et al.Periodontopathic microbiota and atherosclerosis：Roles of TLR-mediated inflammation response［J］.Oxid Med Cell Longev，2022，2022：9611362.

SHAFEGHAT M，KAZEMIAN S，AMINORROAYA A，et al.Toll-like receptor 7 regulates cardiovascular diseases［J］.Int Immunopharmacol，2022，113（Pt A）：109390.

TOLDO S，MEZZAROMA E，BUCKLEY L F，et al.Targeting the NLRP3 inflammasome in cardiovascular diseases［J］.Pharmacol Ther，2022，236：108053.

LI B，XIA Y，HU B.Infection and atherosclerosis：TLR-dependent pathways［J］.Cell Mol Life Sci，2020，77（14）：2751-2769.

TANG Y L，JIANG J H，WANG S，et al.TLR4/NF-κB signaling contributes to chronic unpredictable mild stress-induced atherosclerosis in ApoE-/- mice［J］.PLoS One，2015，10（4）：e0123685.

COLE J E，NAVIN T J，CROSS A J，et al.Unexpected protective role for Toll-like receptor 3 in the arterial wall［J］.Proc Natl Acad Sci USA，2011，108（6）：2372-2377.

GILLESPIE M A，GOLD E S，RAMSEY S A，et al.An LXR-NCOA5 gene regulatory complex directs inflammatory crosstalk-dependent repression of macrophage cholesterol efflux［J］.EMBO J，2015，34（9）：1244-1258.

ISHIBASHI M，SAYERS S，D'ARMIENTO J M，et al.TLR3 deficiency protects against collagen degradation and medial destruction in murine atherosclerotic plaques［J］.Atherosclerosis，2013，229（1）：52-61.

CEN X，WANG B，LIANG Y，et al.Small molecule SMU-CX24 targeting toll-like receptor 3 counteracts inflammation：A novel approach to atherosclerosis therapy［J］.Acta Pharm Sin B，2022，12（9）：3667-3681.

DUAN T，DU Y，XING C，et al.Toll-like receptor signaling and its role in cell-mediated immunity［J］.Front Immunol，2022，13：812774.

BAYER A L，ALCAIDE P.MyD88：At the heart of inflammatory signaling and cardiovascular disease［J］.J Mol Cell Cardiol，2021，161：75-85.

LIN S C，LO Y C，WU H.Helical assembly in the MyD88-IRAK4-IRAK2 complex in TLR/IL-1R signalling［J］.Nature，2010，465（7300）：885-890.

KAWASAKI T，KAWAI T.Toll-like receptor signaling pathways［J］.Front Immunol，2014，5：461.

ULLAH M O，SWEET M J，MANSELL A，et al.TRIF-dependent TLR signaling， its functions in host defense and inflammation，and its potential as a therapeutic target［J］.J Leukoc Biol，2016，100（1）：27-45.

WEI J，CHING L C，ZHAO J F，et al.Essential role of transient receptor potential vanilloid type 1 in evodiamine-mediated protection against atherosclerosis［J］.Acta Physiol （Oxf），2013，207（2）：299-307.

PEREIRA M，GAZZINELLI R T.Regulation of innate immune signaling by IRAK proteins［J］.Front Immunol，2023，14：1133354.

WANG Y，CUI L，XU H，et al.TRPV1 agonism inhibits endothelial cell inflammation via activation of eNOS/NO pathway［J］.Atherosclerosis，2017，260：13-19.

LEE G H，KIM C Y，ZHENG C，et al.Rutaecarpine increases nitric oxide synthesis via eNOS phosphorylation by TRPV1-dependent CaMKⅡ and CaMKKβ/AMPK signaling pathway in human endothelial cells［J］.Int J Mol Sci，2021，22（17）：9407.

TAO L，YANG G，SUN T，et al.Capsaicin receptor TRPV1 maintains quiescence of hepatic stellate cells in the liver via recruitment of SARM1［J］.J Hepatol，2023，78（4）：805-819.

MIN H，CHO W H，LEE H，et al.Association of TRPV1 and TLR4 through the TIR domain potentiates TRPV1 activity by blocking activation-induced desensitization［J］.Mol Pain，2018，doi：10.1177/1744806918812636http://dx.doi.org/10.1177/1744806918812636.

NING W，GAO G，ZHOU Y，et al.Calcitonin gene-related peptide ameliorates sepsis-induced intestinal injury by suppressing NLRP3 inflammasome activation［J］.Int Immunopharmacol，2023，116：109747.

GUO Y，ZHANG Q，CHEN H，et al.The protective role of calcitonin gene-related peptide （CGRP） in high-glucose-induced oxidative injury in rat aorta endothelial cells［J］.Peptides，2019，121：170121.

YAN L，YINGHUI T，BO Y，et al.Effect of calcitonin gene-related peptide on nitric oxide production in osteoblasts：An experimental study［J］.Cell Biol Int，2011，35（8）：757-765.

LI W，ZHANG Z，LI X，et al.CGRP derived from cardiac fibroblasts is an endogenous suppressor of cardiac fibrosis［J］.Cardiovasc Res，2020，116（7）：1335-1348.

ZHAO J F，SHYUE S K，KOU Y R，et al.Transient receptor potential ankyrin 1 channel involved in atherosclerosis and macrophage-foam cell formation［J］.Int J Biol Sci，2016，12（7）：812-823.

何湛湛，杨桢，亓玉婕，等.枳实薤白桂枝汤现代药理作用研究进展［J］.中国实验方剂学杂志，2023，29（6）：254-259.

李磊，孟红旭，林力，等.双参芎连颗粒对高同型半胱氨酸血症慢性肾病大鼠血管舒张及PI3K/Akt/eNOS通路的影响［J］.中国实验方剂学杂志，2021，27（1）：88-97.

冷雪，臧安缘，李其芳.人参皂苷Rg1通过PI3K/Akt/eNOS信号通路调控异丙肾上腺素致急性心肌缺血大鼠心肌的抗氧化作用［J］.中国实验方剂学杂志，2017，23（11）：145-150.

杨帆，张晓云，张亚京，等.补阳还五汤加味通过抑制炎症和纤维化改善糖尿病肾病小鼠肾脏损伤［J］.中国实验方剂学杂志，2022，28（24）：114-121.

张喆，赵舒，韩云鹏，等.补阳还五汤对特发性肺纤维化大鼠Keap1/Nrf2/HO-1抗氧化信号通路的影响［J］.中国实验方剂学杂志，2022，28（17）：9-16.

李国玲，匡彬，张舒，等.基于AMPK/eNOS信号通路探讨黄芪甲苷改善糖尿病肾病大鼠肾损伤的作用及机制研究［J］.广州中医药大学学报，2023，40（3）：701-707.

武兵兵，马礼科，刘秀珠，等.中药通过AMPK途径对糖尿病致内皮功能障碍的保护作用及机制［J］.中药药理与临床，2022，doi：10.13412/j.cnki.zyyl.2022.03.005http://dx.doi.org/10.13412/j.cnki.zyyl.2022.03.005.

鄂璐莎，田志强，王婷.金丝桃苷通过TLR4/NF-κB信号通路对动脉粥样硬化小鼠的干预作用［J］.广西医学，2023，45（3）：302-308.

徐丹，陶永梅，宋丹，等.基于TLR/NF-κB通路探究蓬子菜总黄酮对动脉粥样硬化模型家兔的干预效果［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2022，20（14）：2540-2544.

曾妮，许妹萍，庄丽明.丹参素对大鼠动脉粥样硬化的作用及其机制［J］.免疫学杂志，2020，36（10）：884-889，896.

KELLEY N，JELTEMA D，DUAN Y，et al.The NLRP3 inflammasome：An overview of mechanisms of activation and regulation［J］.Int J Mol Sci，2019，20（13）：3328.

SHARMA B R，KANNEGANTI T D.NLRP3 inflammasome in cancer and metabolic diseases［J］.Nat Immunol，2021，22（5）：550-559.

MUNJAL A，KHANDIA R.Atherosclerosis：Orchestrating cells and biomolecules involved in its activation and inhibition［J］.Adv Protein Chem Struct Biol，2020，120：85-122.

HOSEINI Z，SEPAHVAND F，RASHIDI B，et al.NLRP3 inflammasome：Its regulation and involvement in atherosclerosis［J］.J Cell Physiol，2018，233（3）：2116-2132.

DUEWELL P，KONO H，RAYNER K J，et al.NLRP3 inflammasomes are required for atherogenesis and activated by cholesterol crystals［J］.Nature，2010，464（7293）：1357-1361.

ZENG W，WU D，SUN Y，et al.The selective NLRP3 inhibitor MCC950 hinders atherosclerosis development by attenuating inflammation and pyroptosis in macrophages［J］.Sci Rep，2021，11（1）：19305.

YUAN R，ZHANG W，NIE P，et al.Nur77 deficiency exacerbates macrophage NLRP3 inflammasome-mediated inflammation and accelerates atherosclerosis［J］.Oxid Med Cell Longev，2022，2022：2017815.

SILVIS M，DEMKES E J，FIOLET A，et al.Immunomodulation of the NLRP3 inflammasome in atherosclerosis，coronary artery disease，and acute myocardial infarction［J］.J Cardiovasc Transl Res，2021，14（1）：23-34.

RANJAN K，PATHAK C.FADD regulates NF-κB activation and promotes ubiquitination of cFLIPL to induce apoptosis［J］.Sci Rep，2016，6：22787.

GURUNG P，ANAND P K，MALIREDDI R K，et al.FADD and Caspase-8 mediate priming and activation of the canonical and noncanonical Nlrp3 inflammasomes［J］.J Immunol，2014，192（4）：1835-1846.

GREBE A，HOSS F，LATZ E.NLRP3 inflammasome and the IL-1 pathway in atherosclerosis［J］.Circ Res，2018，122（12）：1722-1740.

LEE G S，SUBRAMANIAN N，KIM A I，et al.The calcium-sensing receptor regulates the NLRP3 inflammasome through Ca2+ and cAMP［J］.Nature，2012，492（7427）：123-127.

WANG M，ZHANG Y，XU M，et al.Roles of TRPA1 and TRPV1 in cigarette smoke -induced airway epithelial cell injury model［J］.Free Radic Biol Med，2019，134：229-238.

XIONG S，WANG P，MA L，et al.Ameliorating endothelial mitochondrial dysfunction restores coronary function via transient receptor potential vanilloid 1-mediated protein kinase a/uncoupling protein 2 pathway［J］.Hypertension，2016，67（2）：451-460.

CARTY M，KEARNEY J，SHANAHAN K A，et al.Cell survival and cytokine release after inflammasome activation is regulated by the Toll-IL-1R protein SARM［J］.Immunity，2019，50（6）：1412-1424.

MA L，ZHONG J，ZHAO Z，et al.Activation of TRPV1 reduces vascular lipid accumulation and attenuates atherosclerosis［J］.Cardiovasc Res，2011，92（3）：504-513.

LIN A H，LIU M H，KO H K，et al.Lung epithelial TRPA1 transduces the extracellular ROS into transcriptional regulation of lung inflammation induced by cigarette smoke：The role of influxed Ca2+［J］.Mediators Inflamm，2015，2015：148367.

TIAN C，HAN X，HE L，et al.Transient receptor potential ankyrin 1 contributes to the ATP-elicited oxidative stress and inflammation in THP-1-derived macrophage［J］.Mol Cell Biochem，2020，473（1/2）：179-192.

KO H K，LIN A H，PERNG D W，et al.Lung epithelial TRPA1 mediates lipopolysaccharide-induced lung inflammation in bronchial epithelial cells and mice［J］.Front Physiol，2020，11：596314.

SUN K，ZHU J，YAN C，et al.CGRP regulates nucleus pulposus cell apoptosis and inflammation via the MAPK/NF-κB signaling pathways during intervertebral disc degeneration［J］.Oxid Med Cell Longev，2021，2021：2958584.

QIN S，SU Q，LI X，et al.Curcumin suppresses cell proliferation and reduces cholesterol absorption in Caco-2 cells by activating the TRPA1 channel［J］.Lipids Health Dis，2023，22（1）：6.

娄原，姜雅楠，徐浩群，等.槲皮素抗脑缺血再灌注损伤作用机制研究进展［J］.中国实验方剂学杂志，2022，28（17）：248-257.

熊仕英，王晓栋，李波，等.基于P2X7R/NLRP3通路探讨枳葛口服液改善大鼠酒精性肝损伤的作用机制［J］.中成药，2023，45（1）：233-236.

邓英，赵兴桃，周梦婷，等.连翘脂素通过调控P2X7R/NF-κB/NLRP3炎性小体信号通路缓解LPS/ATP诱导的L02细胞炎症［J］.中国实验方剂学杂志，2022，28（14）：61-69.

姚政，林达，曹露，等.参苓健脾胃颗粒对非酒精性脂肪肝病小鼠肝脏UCP-2和Cytb表达的影响［J］.时珍国医国药，2019，30（10）：2330-2333.

袁思琪，胡艺，唐梦灵，等.类鼻疽菌T3SS1的BPSS1395基因在番茄植株感染中的作用研究［J］.第三军医大学学报，2020，42（10）：973-980.

陈昌国，李易，王建飞，等.健脾化浊方通过NOX4/ROS/NF-κB通路调节动脉粥样硬化大鼠主动脉炎症及氧化应激反应的研究［J］.中药药理与临床，2019，35（6）：134-139.

钟子安，刘娟，杨柳，等.基于Nox4/NLRP3通路探讨桃叶珊瑚苷干预动脉粥样硬化的作用机制［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2023，21（13）：2405-2411.

刘永瑞，唐娜，王林，等.基于细胞焦亡NF-κB信号通路探讨黄连解毒汤干预动脉粥样硬化斑块的作用机制［J］.中西医结合心脑血管病杂志，2022，20（23）：4265-4273.

赖丽娜，李金霞，郑彩杏，等.五首活血化瘀方对血瘀证新西兰兔血脂代谢、肝脏组织及ABCA1、PPARγ表达的影响［J］.中国实验方剂学杂志，2022，28（15）：78-84.

贾庆玲，申定珠.补肾降脂方通过PPARγ-LXRα-ABCA1通路干预ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化的效应机制［J］.上海中医药杂志，2020，54（4）：85-91.

LEE L Y，HSU C C，LIN Y J，et al.Interaction between TRPA1 and TRPV1：Synergy on pulmonary sensory nerves［J］.Pulm Pharmacol Ther，2015，35：87-93.

ZHU H，WANG Y，HE Y，et al.Inflammation-mediated macrophage polarization induces TRPV1/TRPA1 heteromers in endometriosis［J］.Am J Transl Res，2022，14（5）：3066-3078.

陈君媚，周春祥.苓桂术甘汤药理作用及其机制研究进展［J］.中国实验方剂学杂志，2019，25（14）：222-227.

安致君，刘珍洪，于峥，等.从热敏通道TRPV1探讨蛇床子提取物的作用机制［J］.中国中医基础医学杂志，2018，24（12）：1786-1789.

郭蓉，刘珍洪，汪文来，等.艾叶醇提物对热敏通道TRPV1的影响［J］.中国中医基础医学杂志，2019，25（3）：314-316，398.

余思云，付金荣，刘晓庆，等.加味盆痛灵对EMs疼痛大鼠TRPV1/CaMKⅡ信号的调节作用［J］.时珍国医国药，2023，34（3）：534-536.

Views

下载量

CSCD

Alert me when the article has been cited

提交

Tools

Publicity Resources

Role of Endoplasmic Reticulum Stress in Atherosclerosis and Its Regulation by Traditional Chinese Medicine： A Review

Chinese Medicine Regulates Atherosclerosis-related Signaling Pathway： A Review

Research Progress on Anti-atherosclerosis Mechanism of Mongolian Medicine

Research Progress of Effect of Traditional Chinese Medicine in Prevention and Treatment of Atherosclerosis Based on Signal Pathway Related to Inflammatory Response

Research Progress of Traditional Chinese Medicine for Yiqi Huoxue Huatan in Treatment of Atherosclerosis

Related Author

LIANG Qingzhi

CHEN Zhengtao

ZHOU Ruoran

LI Jiying

ZHANG Yuan

XIE Chunguang

YANG Qiyue

Manli ZHOU

Related Institution

Hospital of Chengdu University of Traditional Chinese Medicine（TCM）

Chengdu University of TCM

First Affiliated Hospital of Army Medical University

School of Traditional Chinese Medicine（TCM）， Hunan University of Chinese Medicine

Hunan Provincial Key Laboratory of Diagnostics of TCM， Hunan University of Chinese Medicine

Postal code：100700
Tel：010-84076882 Email：syfjx_2010@188.com
Technical support is provided by Beijing Founder electronics co., LTD 京ICP备11006657号-10 京公网安备11010802024621
It is recommended to read the content of this site in Chrome&IE9+. Please switch to extreme mode in browser 360.
Cookies We use cookies to help provide and enhance our service and tailor content. By continuing, you agree to the use of cookies.

⁰