Modified Wuhutang Alleviates Airway Inflammation and Down-regulates Expression of Muc5AC， STAT3， NF-<italic style="font-style: italic">κ</italic>B， and NLRP3 in Lung Tissues of RSV-infected Asthmatic Mice

YU Linlin; WANG Jing; ZOU Ya; CHENG Weiwei; JING Xiaoping

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20231322

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Modified Wuhutang Alleviates Airway Inflammation and Down-regulates Expression of Muc5AC， STAT3， NF-κB， and NLRP3 in Lung Tissues of RSV-infected Asthmatic Mice

更新时间：2023-09-08

- Modified Wuhutang Alleviates Airway Inflammation and Down-regulates Expression of Muc5AC， STAT3， NF-κB， and NLRP3 in Lung Tissues of RSV-infected Asthmatic Mice
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 29, Issue 19, Pages: 108-115(2023)
- 作者机构：
  
  1.上海中医药大学，上海 201203
  2.上海市儿童医院，上海交通大学医学院附属儿童医院，上海 200062
  3.上海中医药大学附属普陀医院，上海 200062
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20231322
  CLC： R2-0;R22;R242;R2-031;R285.5
- Published：05 October 2023，
  
  Published Online：30 May 2023，
  
  Received：10 March 2023，
- 稿件说明：
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于琳琳,王婧,邹亚等.五虎汤加味对RSV感染哮喘小鼠气道炎症及肺组织Muc5AC、STAT3、NF-κB、NLRP3蛋白表达的影响[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(19):108-115.

YU Linlin,WANG Jing,ZOU Ya,et al.Modified Wuhutang Alleviates Airway Inflammation and Down-regulates Expression of Muc5AC， STAT3， NF-κB， and NLRP3 in Lung Tissues of RSV-infected Asthmatic Mice[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(19):108-115.
于琳琳,王婧,邹亚等.五虎汤加味对RSV感染哮喘小鼠气道炎症及肺组织Muc5AC、STAT3、NF-κB、NLRP3蛋白表达的影响[J].中国实验方剂学杂志,2023,29(19):108-115. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20231322.

YU Linlin,WANG Jing,ZOU Ya,et al.Modified Wuhutang Alleviates Airway Inflammation and Down-regulates Expression of Muc5AC， STAT3， NF-κB， and NLRP3 in Lung Tissues of RSV-infected Asthmatic Mice[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2023,29(19):108-115. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20231322.

摘要

目的

探讨五虎汤加味对呼吸道合胞病毒（RSV）感染哮喘小鼠气道炎症及黏蛋白（Muc）5AC、转录激活因子3（STAT3）、核转录因子-

B（NF-

B）、NOD样受体蛋白3（NLRP3）蛋白表达的影响。

方法

70只雄性6~8周龄BALB/c小鼠，每组10只，随机分为正常组、哮喘组（卵清蛋白，OVA）、RSV感染哮喘组（OVA+RSV）、五虎汤加味组（高、中、低剂量分别为4.08、2.04、1.02 g·kg

-1

·d

-1

）、地塞米松组（0.1 g·kg

-1

·d

-1

）。OVA致敏及雾化激发哮喘模型，经RSV滴鼻连续3次感染（1.0×10

PFU·mL

-1

，50 μL），构建RSV感染哮喘模型；五虎汤加味组予五虎汤加味灌胃；地塞米松组给予地塞米松注射液腹腔注射；正常组予等量生理盐水灌胃。末次激发24 h，在2.5%戊巴比妥钠麻醉下，留取肺组织进行苏木素-伊红（HE）、苦味酸-酸性品红（VG）染色观察气道炎症反应，免疫组织化学检测Muc5AC蛋白表达情况；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测磷酸化（p）-STAT3、STAT3、p-NF-

B、NF-

B、NLRP3蛋白表达情况。

结果

与正常组比较，OVA组小鼠气道炎性细胞浸润，组织充血水肿，胶原纤维沉积；OVA+RSV组小鼠气道炎性细胞浸润，组织充血水肿较OVA组更显著；与OVA+RSV组比较，五虎汤加味组能显著改善气道周围炎性细胞浸润，组织充血水肿，胶原纤维沉积明显减轻，其中高剂量组作用更加明显。免疫组化结果显示，与正常组比较，OVA组和OVA+RSV组Muc5AC蛋白表达水平均显著升高（

0.01）；与OVA+RSV组比较，五虎汤加味组可明显降低Muc5AC蛋白表达水平，其中高剂量组作用更加明显（

0.05）；与五虎汤加味高剂量组比较，地塞米松组可明显降低Muc5AC蛋白表达水平（

0.05）。在蛋白表达水平，与正常组比较，OVA组、OVA+RSV组p-STAT3、p-NF-

B、NLRP3蛋白表达明显升高（

0.05，

0.01）；与OVA+RSV组比较，五虎汤加味组可显著降低p-STAT3、p-NF-

B、NLRP3蛋白表达水平（

0.01）；与五虎汤加味高剂量组比较，地塞米松组可显著升高p-STAT3、p-NF-

B蛋白表达水平（

0.01）。

结论

五虎汤加味可以明显减轻RSV感染哮喘小鼠气道炎症，降低Muc5AC、p-STAT3、p-NF-

B、NLRP3蛋白的表达，提示五虎汤加味减轻RSV感染哮喘气道炎症可能与调控STAT3/NF-

B信号通路抑制NLRP3蛋白表达相关。

Abstract

Objective

To explore effect of modified Wuhutang on airway inflammation and expression of mucin （Muc） 5AC， signal transducer and activator of transcription 3 （STAT3）， nuclear factor kappa B （NF-

B）， and NOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3 （NLRP3） in respiratory syncytial virus （RSV）-infected asthmatic mice.

Method

Seventy male BALB/c mice of 6-8 weeks old were randomized into normal control （CON）， asthma （ovalbumin， OVA）， RSV infection-induced asthma （OVA+RSV）， high-， medium-， and low-dose （4.08， 2.04， 1.02 g·kg

-1

·d

-1

， respectively） modified Wuhutang， and dexamethasone （Dxms， 0.1 g·kg

-1

） groups （

=10）. The model of asthma was established by sensitization and atomization inhalation with OVA. The RSV infection-induced asthma model was established by three consecutive RSV nasal infusions （1.0 × 10

PFU·mL

-1

， 50 μL）. Wuhutang was administrated by gavage， and Dxms by intraperitoneal injection

The CON group was given the same amount of normal saline by gavage. The mice were anesthetized with 2.5% pentobarbital sodium 24 h after the last administration， and then the lung tissue was stained by hematoxylin-eosin （HE） and Van Gieson （VG） for observation of airway inflammation. The immunohistochemical assay was employed to detect the expression of Muc5AC. Western blot was employed to determine the protein levels of phosphorylated （p）-STAT3， STAT3， p-NF-

B， NF-

B， and NLRP3.

Result

Compared with the CON group， the OVA group presented airway inflammatory cell infiltration， tissue hyperemia and edema， and collagen fiber deposition. The OVA+RSV group showed severer airway inflammatory cell infiltration and tissue hyperemia and edema than the OVA group. Compared with the OVA+RSV group， modified Wuhutang alleviated the airway inflammatory cell infiltration， tissue hyperemia and edema， and collagen fiber deposition， and the high-dose group had the best performance. Compared with the CON group， the OVA group and the OVA+RSV group showed increased expression level of Muc5AC （

0.01）. Compared with the OVA+RSV group， modified Wuhutang reduced the expression level of Muc5AC， and the reduction was significant in the high-dose group （

0.05）. Compared with the high-dose modified Wuhutang group， Dxms lowered the expression level of Muc5AC （

0.05）. Compared with the CON group， the OVA and OVA+RSV groups showed up-regulated protein levels of p-STAT3， p-NF-

B， and NLRP3 （

0.05，

0.01）. Compared with the OVA+RSV group， modified Wuhutang down-regulated the protein levels of p-STAT3， p-NF-

B， and NLRP3 （

0.01）. Compared with the high-dose modified Wuhutang group， the Dxms group showed up-regulated levels of p-STAT3， p-NF-

B proteins （

0.01）.

Conclusion

Modified Wuhutang can reduce airway inflammation and down-regulate the expression of Muc5AC， p-STAT3， p-NF-

B， and NLRP3 in RSV-infected asthmatic mice， which suggests that Wuhutang reduces airway inflammation in RSV-infected asthma by regulating the STAT3/NF-

B signaling pathway.

关键词

五虎汤加味呼吸道合胞病毒（RSV）哮喘气道炎症NOD样受体蛋白3（NLRP3）

Keywords

modified Wuhutangrespiratory syncytial virus （RSV）asthmaairway inflammationNOD-like receptor thermal protein domain associated protein 3 （NLRP3）

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Modified Wuhutang Alleviates Airway Inflammation and Down-regulates Expression of Muc5AC， STAT3， NF-κB， and NLRP3 in Lung Tissues of RSV-infected Asthmatic Mice

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