Identification of <italic style="font-style: italic">in Vitro</italic> and<italic style="font-style: italic"> in vivo</italic> Chemical Constituents of Ruyi Zhenbaowan Based on UHPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS

CHEN Kedian; MA Zhaochen; CAI Bingbing; LIU Ying; LIU Yudong; LI Tao; XU Mingzhu; WANG Haiping; LIN Na; ZHANG Yanqiong

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20241443

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Identification of in Vitro and in vivo Chemical Constituents of Ruyi Zhenbaowan Based on UHPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS

更新时间：2024-11-18

- Identification of in Vitro and in vivo Chemical Constituents of Ruyi Zhenbaowan Based on UHPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS
  增强出版
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 30, Issue 24, Pages: 78-84(2024)
- 作者机构：
  
  1.中国中医科学院中药研究所，北京 100700
  2.金诃藏药股份有限公司，西宁 810003
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20241443
  CLC： R2-0;R33;R274
- Received：06 June 2024，
  
  Online First：19 September 2024，
  
  Published：20 December 2024
- 稿件说明：
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陈可点,马兆臣,蔡冰冰等.基于UHPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS的如意珍宝丸体内外成分分析[J].中国实验方剂学杂志,2024,30(24):78-84.

CHEN Kedian,MA Zhaochen,CAI Bingbing,et al.Identification of in Vitro and in vivo Chemical Constituents of Ruyi Zhenbaowan Based on UHPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2024,30(24):78-84.
陈可点,马兆臣,蔡冰冰等.基于UHPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS的如意珍宝丸体内外成分分析[J].中国实验方剂学杂志,2024,30(24):78-84. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20241443.

CHEN Kedian,MA Zhaochen,CAI Bingbing,et al.Identification of in Vitro and in vivo Chemical Constituents of Ruyi Zhenbaowan Based on UHPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2024,30(24):78-84. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20241443.

摘要

目的

基于超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱法（UHPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS）对如意珍宝丸所含化学成分及其入血、入脑成分进行定性研究。

方法

采用UHPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS鉴定如意珍宝丸的化学成分。12只雄性SD大鼠随机分为空白组与如意珍宝丸组，如意珍宝丸组按生药量1.8 g·kg

-1

进行如意珍宝丸混悬液灌胃，空白组灌胃等体积纯水。灌胃1.5 h后取血浆与脑脊液，采用ACQUITY UPLC BEH C

色谱柱（2.1 mm×50 mm，1.7 μm），流动相0.1%甲酸水溶液（A）-乙腈（B）梯度洗脱（0~15 min，97%~80%A；15~30 min ，80%~60%A；30~40 min，60%~30%A；40~45 min，30%~5%A），电喷雾离子源（ESI），扫描范围

m/z

100~1 500，并结合文献和对照品的相应信息，分别完成在正、负离子模式下对样品进行入血与入脑成分的定性分析。

结果

从如意珍宝丸80%甲醇溶液中鉴定出126种化合物，血浆中检测到14种原型成分，脑脊液中检测到7种原型成分，并分析了芹菜素、芹菜素-7-

葡萄糖醛酸苷、高良姜素、甘草苷、胡椒碱、甘草酸、丁香酚、没食子酸和胆酸的裂解规律。

结论

该研究实现了如意珍宝丸中多类别体外化学成分、入血及入脑成分的快速表征与鉴定，为该品种药效物质基础与质量控制研究提供了参考。

Abstract

Objective

To identif

y the chemical constituents of Ruyi Zhenbaowan

in vitro

and

in vivo

Method

The chemical constituents of Ruyi Zhenbaowan were identified based on UHPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS. A total of 12 male SD rats were randomized into two groups： control （pure water） and Ruyi Zhenbaowan （1.8 g·kg

-1

）. The rats were administrated with the suspension of Ruyi Zhenbaowan or pure water by gavage. After 1.5 h， the plasma and cerebrospinal fluid were collected. Chromatographic separation was performed on a Waters ACQUITY UPLC BEH C

column （2.1 mm × 150 mm， 1.7 μm） with a mixture of 0.1% formic acid aqueous solution （A） and acetonitrile （B） as the mobile phase. Gradient elution was carried out according to the procedure of 0~15 min，97%~80%A；15~30 min ，80%~60%A；30~40 min，60%~30%A；40~45 min，30%~5%A. The ion source was electrospray ionization， and scan range was

100-1 500. The prototype components and the components in the plasma and cerebrospinal fluid were analyzed qualitatively by scanning in positive and negative ion modes and identified by comparison with the data in published literature and the information of standard substances.

Result

A total of 126 chemical constituents were identified from the 80% methanol solution of Ruyi Zhenbaowan， and 14 and 7 prototype constituents were detected in the plasma and the cerebrospinal fluid， respectively. In addition， the fragmentation rules of apigenin， apigenin-7-

-glucuronide， galangin， liquiritin， piperine， glycyrrhizic acid， eugenol， gallic acid， and cholic acid were deduced.

Conclusion

This study achieved rapid multicomponent characterization and identification of Ruyi Zhenbaowan

in vitro

and

in vivo

， providing theoretical support for exploring active substances and performing quality control.l.

关键词

Keywords

references

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Identification of in Vitro and in vivo Chemical Constituents of Ruyi Zhenbaowan Based on UHPLC-Q Exactive Orbitrap HRMS

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