Effect of Influenza A Virus on BEAS-2B in Human Lung Epithelial Cells and Intervention Effect of Shufeng Jiedu Capsule-containing Serum

CAO Shan; GENG Zihan; BAO Lei; XU Yingli; PANG Bo; ZHANG Jingsheng; ZHANG Yu; CHEN Mengping; WANG Yaxin; ZHAO Ronghua; GUO Shanshan; CUI Xiaolan

doi:10.13422/j.cnki.syfjx.20241505

您当前的位置：

首页 >

文章列表页 >

Effect of Influenza A Virus on BEAS-2B in Human Lung Epithelial Cells and Intervention Effect of Shufeng Jiedu Capsule-containing Serum

更新时间：2025-05-28

- Effect of Influenza A Virus on BEAS-2B in Human Lung Epithelial Cells and Intervention Effect of Shufeng Jiedu Capsule-containing Serum
- Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae Vol. 30, Issue 23, Pages: 90-97(2024)
- 作者机构：
  
  中国中医科学院中药研究所，北京 100700
- 作者简介：
- 基金信息：
- DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20241505
  CLC： R2-0;R22;R285.5;R289;R33
- Received：08 August 2024，
  
  Accepted：25 September 2024，
  
  Online First：29 September 2024，
  
  Published：05 December 2024
- 稿件说明：
移动端阅览
曹姗,耿子涵,包蕾等.甲型流感病毒对人肺上皮细胞BEAS-2B的影响及疏风解毒胶囊含药血清的干预作用[J].中国实验方剂学杂志,2024,30(23):90-97.

CAO Shan,GENG Zihan,BAO Lei,et al.Effect of Influenza A Virus on BEAS-2B in Human Lung Epithelial Cells and Intervention Effect of Shufeng Jiedu Capsule-containing Serum[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2024,30(23):90-97.
曹姗,耿子涵,包蕾等.甲型流感病毒对人肺上皮细胞BEAS-2B的影响及疏风解毒胶囊含药血清的干预作用[J].中国实验方剂学杂志,2024,30(23):90-97. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20241505.

CAO Shan,GENG Zihan,BAO Lei,et al.Effect of Influenza A Virus on BEAS-2B in Human Lung Epithelial Cells and Intervention Effect of Shufeng Jiedu Capsule-containing Serum[J].Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae,2024,30(23):90-97. DOI： 10.13422/j.cnki.syfjx.20241505.

摘要

目的

观察疏风解毒胶囊（SFJD）含药血清对甲型流感病毒诱导的人肺上皮细胞的影响，探究药物对细胞的保护作用及潜在的抗病毒作用。

方法

制备SFJD含药血清，体外培养人肺上皮细胞（BEAS-2B），通过细胞增殖与活性检测（CCK-8）试剂盒检测在不同浓度SFJD含药血清培养下的细胞存活率并筛选SFJD含药血清的最佳剂量用于后续实验。实验分为正常组、病毒感染组和SFJD含药血清组，采用CCK-8法检测病毒感染及给药后BEAS-2B细胞存活率。检测各组细胞中流感病毒核酸表达量，并采用荧光显微镜观察不同组细胞凋亡水平。实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测各组细胞中流感病毒核蛋白（NP）、Toll样受体4（TLR4）、髓样分化因子88（MyD88） mRNA水平及采用免疫荧光法检测肺上皮细胞TLR4、MyD88及磷酸化核转录因子-

B（p-NF-

B）的荧光强度。

结果

与正常血清组比较，空白血清组、SFJD含药血清不同浓度组（5%、10%、20%）的细胞存活率分别为100.00%±0.00%、89.05%±4.80%、87.13%±5.90%、93.83%±6.03%和99.33%±3.39%（

0.01），选择SFJD含药血清浓度为20%作为最佳剂量组进行后续实验；与正常组比较，病毒感染组的细胞存活率降低，细胞活力下降（

0.01），与病毒感染组相比较，SFJD含药血清组的细胞存活率增加，细胞活力增加（

0.01）；与病毒感染组比较，SFJD含药血清组能显著降低细胞中的病毒载量（

0.01），减少细胞凋亡；与正常组比较，病毒感染组细胞中NP、TLR4和MyD88 mRNA表达水平显著增加（

0.01），给予SFJD含药血清组治疗后细胞中的NP、TLR4和MyD88 mRNA表达水平明显降低（

0.05，

0.01）；与正常组比较，病毒感染后，细胞中TLR4、MyD88和p-NF-

B蛋白荧光强度明显增加（

0.05，

0.01），给予SFJD含药血清治疗后细胞中TLR4、MyD88和p-NF-

B蛋白荧光强度降低（

0.05）。

结论

SFJD含药血清在体外能有效抑制流感病毒，其通过提高BEAS-2B细胞存活率，减少细胞凋亡，下调BEAS-2B细胞中TLR4、MyD88和p-NF-

B的蛋白表达发挥抗流感病毒作用。

Abstract

Objective

To observe the effect of Shufeng Jiedu capsule （SFJD）-containing serum on human lung epithelial cells infected by influenza A virus， and investigate the protective effect of the drug on the cells and the potential antiviral effect.

Method

The SFJD-containing serum was prepared and used to treat human lung epithelial cells （BEAS-2B） cultured

in vitro

. The viability of cells treated with different concentrations of SFJD-containing serum was measured by the cell counting kit-8 （CCK-8）， and the optimal concentration of SFJD-containing serum was screened for subsequent experiments. BEAS-2B cells were classified into normal control， virus infection， and SFJD-containing serum groups， and the CCK-8 method was used to detect the survival rate of BEAS-2B cells after virus infection and drug administration. The expression of influenza virus nucleic acid in the cells of each group was determined， and the apoptosis of cells in different groups was observed by fluorescence microscopy. Real-time PCR was employed to determine the mRNA levels of influenza virus nucleoprotein （NP）， Toll-like receptor 4 （TLR4）， and myeloid differentiation primary response gene 88 （MyD88） in each group of cells. The immunofluorescen

ce assay was used to detect the fluorescence intensities of TLR4， MyD88， and phosphorylated nuclear factor-

B （p-NF-

B） in lung epithelial cells.

Result

Compared with that in the control group （normal serum）， the cell survival rates in the blank serum and the SFJD-containing serum （5%， 10%， and 20%） groups were 100.00%±0.00%， 89.05%±4.80%， 87.13%±5.90%， 93.83%±6.03%， and 99.33%±3.39%， respectively （

0.01）. The SFJD-containing serum of 20% was selected as the optimal treatment for subsequent experiments. Compared with the normal control group， the virus infection group showed reduced cell survival rate （

0.01）， and the reduction was increased by the SFJD-containing serum （

0.01）. Compared with the virus infection group， SFJD-containing serum reduced the virus load （

0.01） to decrease apoptosis. Compared with the normal control group， the virus infection group showed up-regulated mRNA levels of NP， TLR4， and MyD88 （

0.01）， and the up-regulation was down-regulated by the SFJD-containing serum （

0.05，

0.01）. The fluorescence intensities of TLR4， MyD88， and p-NF-

B proteins in the cells increased after virus infection compared with those in the normal control （

0.05，

0.01）， and they were decreased after administration with the SFJD-containing serum （

0.05）.

Conclusion

The SFJD-containing serum can inhibit influenza virus

in vitro

by increasing the survival rate， reducing the apoptosis， and down-regulating the protein levels of TLR4， MyD88， and p-NF-

B in BEAS-2B cells.

关键词

Keywords

references

MA L ， JI L ， WANG T ， et al . Research progress on the mechanism of traditional Chinese medicine regulating intestinal microbiota to combat influenza a virus infection ［J］. Virol J ， 2023 ， 20 （ 1 ）： 260 .

单中超，孙建辉，李建良，等 . 基于转录组学的化湿败毒方治疗流感病毒性肺炎作用机制［J］. 中国实验方剂学杂志， 2023 ， 29 （ 18 ）： 54 - 61 .

MICHAELIS M ， DOERR H W ， CINATL J . An influenza A H1N1 virus revival - pandemic H1N1/09 virus ［J］. Infection ， 2009 ， 37 （ 5 ）： 381 - 389 .

GHEBREHEWET S ， MACPHERSON P ， HO A . Influenza ［J］. BMJ ， 2016 ， 355 ： i6258 .

WANG X ， LI Y ， O'BRIEN K L ， et al . Global burden of respiratory infections associated with seasonal influenza in children under 5 years in 2018： A systematic review and modelling study ［J］. Lancet Glob Health ， 2020 ， 8 （ 4 ）： e497 - e510 .

郭雨菲，于会勇，秦欣欣，等 . 升降散体外抗流感病毒A/PR8/34/H1N1株的作用研究［J］. 中国中医急症， 2024 ， 33 （ 2 ）： 189 - 193，208 .

张悦，于会勇，宋利琼，等 . 基于网络药理学和实验验证探索千金三黄汤加减治疗甲型流感病毒的作用机制［J］. 世界中西医结合杂志， 2023 ， 18 （ 6 ）： 1168 - 1177 .

李菁，房德敏，张金红 . 奥司他韦致神经精神不良事件国内外文献系统回顾性分析［J］. 现代药物与临床， 2021 ， 36 （ 12 ）： 2687 - 2694 .

周峰，赵国桢，李博，等 . 疏风解毒胶囊治疗流行性感冒疗效及安全性的系统评价与Meta分析［J］. 中国中药杂志， 2023 ， 48 （ 22 ）： 6216 - 6224 .

朱强，潘君，许浚，等 . 疏风解毒胶囊治疗呼吸道感染性疾病研究进展［J］. 中草药， 2022 ， 53 （ 11 ）： 3557 - 3563 .

刘志群，王国茗，潘巍巍，等 . 疏风解毒胶囊治疗病毒性上呼吸道感染临床观察［J］. 中国中医急症， 2020 ， 29 （ 5 ）： 898 - 900 .

王书臣，罗海丽 . 疏风解毒胶囊治疗上呼吸道感染480例临床观察［J］. 世界中西医结合杂志， 2009 ， 4 （ 12 ）： 872 - 875 .

许国强，赵启亮，王晓宇，等 . 疏风解毒胶囊的系统评价再评价［J］. 中国中药杂志， 2022 ， 47 （ 4 ）： 1103 - 1113 .

鲍岩岩，高英杰，时宇静，等 . 疏风解毒胶囊广谱抗病毒功效研究［J］. 新中医， 2019 ， 51 （ 12 ）： 5 - 8 .

LI H ， LU Y ， CHUNG J ， et al . Activation of apoptosis by rationally constructing NIR amphiphilic AIEgens： Surmounting the shackle of mitochondrial membrane potential for amplified tumor ablation ［J］. Chem Sci ， 2021 ， 12 （ 31 ）： 10522 - 10531 .

GIORDANO G ， HONG S ， FAUSTMAN E M ， et al . Measurements of cell death in neuronal and glial cells ［J］. Methods Mol Biol ， 2011 ， 758 ： 171 - 178 .

KUKSIN D ， KUKSIN C A ， QIU J ， et al . Cellometer image cytometry as a complementary tool to flow cytometry for verifying gated cell populations ［J］. Anal Biochem ， 2016 ， 503 ： 1 - 7 .

陈金凤，何军，徐涛 . 基于流感发病机制的药物研究进展［J］. 中国药理学通报， 2021 ， 37 （ 5 ）： 606 - 612 .

SHINYA K ， EBINA M ， YAMADA S ， et al . Avian flu： Influenza virus receptors in the human airway ［J］. Nature ， 2006 ， 440 （ 7083 ）： 435 - 436 .

VAN RIEL D ， MUNSTER V J ， DE WIT E ， et al . Human and avian influenza viruses target different cells in the lower respiratory tract of humans and other mammals ［J］. Am J Pathol ， 2007 ， 171 （ 4 ）： 1215 - 1223 .

VAN RIEL D ， DEN BAKKER M A ， LEIJTEN L M ， et al . Seasonal and pandemic human influenza viruses attach better to human upper respiratory tract epithelium than avian influenza viruses ［J］. Am J Pathol ， 2010 ， 176 （ 4 ）： 1614 - 1618 .

ZHOU B ， LI J ， LIANG X ， et al . Transcriptome profiling of influenza A virus-infected lung epithelial（A549） cells with lariciresinol-4- β - D -glucopyranoside treatment ［J］. PLoS One ， 2017 ， 12 （ 3 ）： e0173058 .

GUI R ， ZHENG H ， MA L ， et al . Sperm-associated antigen 9 promotes influenza a virus-induced cell death via the c-Jun N -terminal kinase signaling pathway ［J］. mBio ， 2022 ， 13 （ 3 ）： e0061522 .

FUJIKURA D ， MIYAZAKI T . Programmed cell death in the pathogenesis of influenza ［J］. Int J Mol Sci ， 2018 ， 19 （ 7 ）： 2065 .

BURGOYNE R A ， FISHER A J ， BORTHWICK L A . The role of epithelial damage in the pulmonary immune response ［J］. Cells ， 2021 ， 10 （ 10 ）： 2763 .

李承泽，褚福浩，李园，等 . 达原饮调控TLR/MAPK/NF- κ B通路防治H1N1感染诱发急性肺损伤的作用机制［J］. 中国实验方剂学杂志， 2024 ， 30 （ 18 ）： 52 - 60 .

LUO R ， LV C ， WANG T ， et al . A potential Chinese medicine monomer against influenza A virus and influenza B virus：Isoquercitrin ［J］. Chin Med ， 2023 ， 18 （ 1 ）： 144 .

单佳铃，程虹毓，文乐，等 . TLR/MyD88/NF- κ B信号通路参与不同疾病作用机制研究进展［J］. 中国药理学通报， 2019 ， 35 （ 4 ）： 451 - 455 .

葛海亮，李素，于少雄，等 . 病毒感染引起的炎症反应：宿主对抗病毒的“双刃剑” ［J］. 微生物学报， 2022 ， 62 （ 5 ）： 1571 - 1586 .

张铁军，朱月信，刘岱琳，等 . 疏风解毒胶囊药效物质基础及作用机制研究［J］. 中草药， 2016 ， 47 （ 12 ）： 2019 - 2026 .

张铁军，许浚，申秀萍，等 . 疏风解毒胶囊治疗新型冠状病毒肺炎（COVID-19）的基础研究及抗COVID-19中药新药研发思路［J］. 中草药， 2020 ， 51 （ 9 ）： 2273 - 2282 .

LIU X ， ZHANG H ， XU J ， et al . Identification of absorbed components and their metabolites in rat plasma after oral administration of Shufeng Jiedu capsule using ultra-performance liquid chromatography/quadrupole time-of-flight mass spectrometry ［J］. Rapid Commun Mass Spectrom ， 2019 ， 33 （ 19 ）： 1494 - 1501 .

张向丽，吕开原，张静泽，等 . 基于文献探讨马鞭草对新型冠状病毒肺炎的作用机制［J］. 武警后勤学院学报：医学版， 2020 ， 29 （ 7 ）： 68 - 74 .

吴丛宇，周悦，上官璐茜，等 . 大黄素的药理作用机制研究进展［J］. 中国药科大学学报， 2023 ， 54 （ 5 ）： 634 - 643 .

王剑，张萍萍，于健，等 . 天然药物抗呼吸道病毒活性成分及其作用机制研究进展［J］. 药学学报， 2024 ， 59 （ 4 ）： 853 - 865 .

CHEN X ， WU Y ， CHEN C ， et al . Identifying potential anti-COVID-19 pharmacological components of traditional Chinese medicine Lianhuaqingwen capsule based on human exposure and ACE2 biochromatography screening ［J］. Acta Pharm Sin B ， 2021 ， 11 （ 1 ）： 222 - 236 .

Views

477

下载量

CSCD

Alert me when the article has been cited

提交

Tools

Publicity Resources

Impact and Mechanism of Gypenosides on MAFLD Mice via Regulating SIRT6/CREB/Nur77 Signaling Pathway and Mediating Apoptosis

Molecular Mechanism of Gypenoside L Inducing Ovarian Cancer Cell Apoptosis by Regulating NUF2 and Influencing Magnesium Homeostasis

Programmed Cell Death of Atherosclerosis and Intervention of Traditional Chinese Medicine Compounds： A Review

Huanglian Jiedutang Improves Cognitive Impairment after Schemic Stroke by Regulating Neuron via NF-κB Signaling Pathway

Molecular Mechanisms and Research Progress of Traditional Chinese Medicine Intervention in Diabetic Foot Ulcers Based on Regulation of Inflammation-oxidative Stress Axis

Related Author

CAO Shan

GUO Shanshan

CUI Xiaolan

SUN Xiaofei

SONG Nan

CAO Yuan

LIU Yu

ZHANG Meiling

Related Institution

Liaoning University of Traditional Chinese Medicine

Liaoning University of Traditional Chinese Medicine（TCM）

Affiliated Hospital of Liaoning University of TCM

The Graduate School，Jiangxi University of Chinese Medicine

The Afflliated Hospital of Jiangxi University of Chinese Medicine

AI脑图

AI问答

Address：No. 16, Nanxiaojie, Dongzhimennei, Beijing Postal code：100700
Tel：010-84076882 Email：syfjx_2010@188.com
Technical support is provided by Beijing Founder electronics co., LTD 京ICP备11006657号-10 京公网安备11010802024621
It is recommended to read the content of this site in Chrome&IE9+. Please switch to extreme mode in browser 360.
Cookies We use cookies to help provide and enhance our service and tailor content. By continuing, you agree to the use of cookies.

⁰