摘要:目的观察加味黄芪鳖甲汤联合耳穴压豆治疗糖尿病周围神经病变气阴两虚证的疗效及对髓样分化因子(MyD88)/核转录因子-κB抑制蛋白(IκB)信号通路的影响。方法140例患者随机分为观察组和对照组,各70例。均给予患者饮食指导,控制空腹血糖、血压等基础治疗,观察组给予加味黄芪鳖甲汤联合耳穴压豆治疗,对照组给予甲钴胺治疗,疗程均为4周。治疗前后分别观察两组多伦多临床神经病变量表(TCSS),中医证候,运动及感觉神经(正中神经、腓总神经、胫神经、尺神经)传导速度,糖代谢指标[空腹血浆葡萄糖(FPG),餐后2 h血浆葡萄糖(2 h PG),糖化血红蛋白(HbA1c)],肠道菌群(毛梭菌、布劳氏菌、拟杆菌、粪杆菌),血清MyD88/IκB信号通路[MyD88,IκBα,磷酸化核转录因子-κB抑制蛋白α(p-IκBα)]的水平。比较两组临床疗效及安全性。结果观察组总有效率85.3%(58/68),高于对照组的48.5%(32/66)(χ2=6.143,P<0.05)。与对照组治疗后比较,观察组TCSS,中医证候,FPG,2 h PG,HbA1c,毛梭菌,布劳氏菌,MyD88,p-IκBα降低(P<0.05),运动及感觉神经(正中神经、腓总神经、胫神经、尺神经)传导速度加快(P<0.05),拟杆菌,粪杆菌,IκBα升高(P<0.05)。观察组不良反应发生率1.5%(1/68),低于对照组的12.1%(8/66)(χ2=4.328,P<0.05)。结论加味黄芪鳖甲汤联合耳穴压豆可明显改善糖尿病周围神经病变气阴两虚证患者的临床疗效,其作用机制可能与调节血清MyD88/IκB信号通路有关。
摘要:目的通过芯片分析联合网络药理学及其实验验证,阐明淫羊藿干预乳腺癌干细胞(BCSCs)的潜在分子标志物和药物-化合物-靶点机制。方法在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)检索相关药物信息,获得淫羊藿的活性成分和潜在靶点。在基因表达综合(GEO)数据库检索“Breast Cancer Stem Cells”,通过分析与筛选,获取GSE98239芯片数据,使用GEO2R在线分析工具获取其差异基因,绘制差异基因热图和火山图。通过Cytoscape 3.8.0构建淫羊藿干预乳腺癌干细胞差异基因网络图,并进行药物与疾病基因的基因本体(GO)和京都基因和基因组百科全书(KEGG)富集分析。将人乳腺癌MDA-MB-231细胞分为20%,40%,60%淫羊藿含药血清组和对照组,通过细胞增殖与活性检测(CCK-8),蛋白免疫印迹法(Western blot)检测淫羊藿含药血清干预MDA-MB-231后,对其活性和乳腺癌细胞中靶蛋白表达量的影响。结果获得淫羊藿含有的黄酮、甾醇、生物碱及倍半萜类活性成分23个,发现其与乳腺癌干细胞中的B细胞淋巴瘤-2样蛋白1(BCL2L1),基质金属蛋白酶2(MMP2),人前列腺素内过氧化物合酶2(PTGS2),血管内皮生长因子(VEGF)A,转化生长因子β受体Ⅰ(TGFBR1)等枢纽基因相互作用,参与诱导新的血管生成、细胞迁移,使BCSCs持续自我更新而凋亡减少并发生细胞迁移,从而促进乳腺癌的复发和转移。KEGG结果显示,淫羊藿干预pathway in cancer信号通路中转化生长因子β(TGF-β),VEGF,胞内磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt),丝裂原活化蛋白激酶(MAPK),哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)亚通路的多个差异表达基因(DEGs)来发挥其干预乳腺癌干细胞的功效。实验表明,淫羊藿含药血清干预后乳腺癌细胞存活率显著降低,乳腺癌细胞中TGFBR1和Smad2表达量显著降低(P<0.01)。结论淫羊藿不同浓度含药血清中的多个组分,能够协同作用于乳腺癌干细胞的目标差异表达基因,并通过下调TGF-β通路中关键分子TGFBR1及下游信号Smad2蛋白的表达水平,从而发挥抑制乳腺癌细胞增殖的作用。