الهدف هو استكشاف النشاط المضاد للصدفية خارج الجسم للسوائل التجديدية (KFX) وآليته المحتملة، وذلك لتوفير أساس تجريبي لتأثير KFX المضاد للصدفية. الطريقة: أولاً، تقسم خلايا كيراتين المعبأة غير المستحثة (خلايا HaCaT) إلى 7 مجموعات، وهي التحكم ومجموعات KFX بجرعات مختلفة (5، 10، 20، 40، 80، 160 جم/لتر). بعد المعالجة بتركيزات مختلفة من KFX، يتم فحص تأثير KFX على تكاثر الخلايا الطبيعية بواسطة مجموعة اختبار CCK-8. ثانياً، تقسم خلايا HaCaT غير المستحثة إلى 6 مجموعات، وهي التحكم ومجموعات rh-IL-17A بجرعات مختلفة (5، 10، 50، 100، 120 جم/لتر). بعد المعالجة بتركيزات مختلفة من interleukin-17A البشري المعاد تركيبه (rh IL-17A)، يتم فحص تأثيره على تكاثر الخلايا واختيار أفضل تركيز تحفيزي. ثم تقسم خلايا HaCaT الطبيعية إلى مجموعات تحكم وKFX (5، 10، 20، 40، 80، 160 جم/لتر)، حيث تُستخدم تركيزات rh IL-17A المختارة لبناء نموذج خلايا الصدفية في جميع المجموعات ما عدا التحكم، وتعالج بتركيزات مختلفة من KFX لتحليل تأثيرها على تكاثر خلايا HaCaT المصابة بالصدفية. أخيراً، تقسم خلايا HaCaT غير المستحثة إلى 6 مجموعات: التحكم، rh IL-17A، MTX، ومجموعات KFX بجرعات مختلفة (20، 40، 80 جم/لتر). تستخدم تركيزات rh IL-17A المثلى لبناء نموذج الصدفية في جميع المجموعات ما عدا التحكم، وتعالج بمواد مختلفة. يتم فحص مستوى هجرة الخلايا عن طريق اختبار الخدش، وتقييم التعبير النسخي النسبي لـ Ki67 وS100A7 وS100A8 وS100A9 بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل الفلوري الكمي اللحظي، لتقييم النشاط المضاد للصدفية للـ KFX. يتم أيضاً دراسة آلية العمل من خلال تقييم التعبير النسخي للالتهابات المرتبطة بـ IL-1β وIL-6 وCXCL-20 ومستوى البروتينات JAK3 وp-JAK3 وSTAT3 وp-STAT3 في خلايا HaCaT المصابة بالصدفية. النتائج: بالمقارنة مع التحكم، عند معالجة 80 جم/لتر KFX لمدة 72 ساعة (P<0.05) وعند معالجة 160 جم/لتر في أوقات مختلفة (P<0.01)، كان هناك تأثير كبير على نشاط تكاثر خلايا HaCaT، في حين لم تُظهر تركيزات KFX الأخرى فروقاً ملحوظة، مما يدل على أمان KFX لخلايا HaCaT. بعد 24 ساعة من معالجة الخلايا بتركيزات rh IL-17A المختلفة، زاد نشاط التكاثر بشكل ملحوظ، وكان أفضل تركيز 100 ميكروغرام/لتر (P<0.05)، بأقصى نشاط يقارب 100% وشكل خلوي جيد. أظهرت نتائج معالجة خلايا الصدفية المحفزة بـ rh IL-17A أن KFX لم يقمع فقط تكاثر هذه الخلايا (P<0.01) ولكن قلل أيضاً من قدرتها على الهجرة (P<0.01) وتعبير mRNA لـ Ki67 وS100A7 وS100A8 وS100A9 (P<0.01). بالإضافة إلى ذلك، خفض KFX بشكل كبير التعبير النسخي لعوامل الالتهاب IL-1β وIL-6 وCXCL-20 (P<0.01) وقمع فوسفورية بروتينات JAK3 وSTAT3 (P<0.05، P<0.01). الخلاصة: لا يظهر KFX سمية واضحة على خلايا HaCaT غير المحفزة، ولكن يثبط تكاثر خلايا الصدفية المحفزة بـ rh IL-17A ويقلل من هجرة الخلايا، مع فوائد واضحة مضادة للصدفية خارج الجسم، ويُحتمل أن يكون آليته مرتبطة بخفض تعبير عوامل الالتهاب في مسار الإشارة JAK3/STAT3 وقمع فسفرة بروتينات JAK3 وSTAT3.

الصدفية; السوائل التجديدية; تكاثر الخلايا; القدرة على الهجرة; عوامل الالتهاب; كيناز التيروسين 3 (JAK3)/مسار إشارة عوامل النقل والتنشيط النسخي 3 (STAT3)