تأثير صيغة Xianlian Detox على توازن البكتيريا المعوية والاستجابة المناعية لخلايا T CD8+ المضادة لسرطان القولون والمستقيم

ZHUANG Yupei ,  

ZHOU Hongli ,  

LIANG Yuwei ,  

ZHENG Mingyue ,  

YUAN Weichen ,  

CHENG Haibo ,  

ZHOU Hongguang ,  

摘要

هدفت هذه الدراسة إلى استكشاف تأثير صيغة Xianlian Detox على تنظيم توازن البكتيريا المعوية الذي يوصله الخلايا T CD8+ في الإستجابة المناعية المضادة للأورام ضد سرطان القولون والمستقيم (CRC). الطريقة: تم تقسيم 30 من الفئران الذكور البالغة من سلالة BALB/c إلى مجموعة عادية، مجموعة نموذجية، مجموعة أوكسالي بلاتين (8x10-3 g/kg-1.(3 d)-1)، ومجموعتين عالية ومنخفضة الجرعة من Xianlian Detox (12.9 و 6.45 g/kg-1.d-1)، من خلال حقن خلايا CT-26 تحت الجلد للبناء الموديل الفئرة لورم الغدة الليمفاوية الانتقالي في CRC، بالإضافة إلى تلقي التدخل المقابل. من ناحية أخرى، تم اختيار 10 فئران BALB/c ذكور إلى مجموعة Xianlian Detox Fecal Microbiota Transplantation (XFMT) ومجموعة نموذجية Fecal Microbiota Transplantation (MFMT)، عن طريق خلطة من الأدوية النباتية المضادة للميكروبات الرباعية، تنظيف البكتيريا المعوية للفئران، ثم بحقن CT-26 الخلايا تحت الجلد لبناء نموذح فئران CRC الدون جراثيم المبتذل. تم جمع البراز من مجموعة النموذج ومجموعة Xianlian Detox عالية الجرعة لإعداد محلول البراز للحصول على دفعة متحركة لعلاج الفئران بنفس الجرعة لديهم CRC. قامت مجموعة XFMT بتناول محلول البراز للفئران المصابة بسرطان القولون التي تم علاجها باستخدام جرعة عالية من صيغة Xianlian Detox، وقامت مجموعة MFMT بتناول محلول البراز الخاص بالفئران مع مرض سرطان القولون. كما تمت مراقبة وتسجيل تغييرات في حجم الورم لدى الفئران، كما تمت مراقبة التغيرات المرضية في أنسجة ورم الفئران من خلال الصبغة الهيماتوكسيلين والأيونين (HE)؛ تحليل تنوع البكتيريا المعوية بالتسلسل بالريبوز النقي الكامل (PacBio)؛ إجراء تحليل الخلايا الكاذبة السيولين وصبغة الإضاءة المناعية لتقييم التغيرات في تسلل الخلايا T في أنسجة الأورام؛ واختبار امتصاص الإنزيم مناعي مركب (ELISA) لقياس اختلاف محتوى حياتي الانتفاخ (IFN-γ) في أنسجة الأورام. النتائج مقارنة مع المجموعة النموذجية، أظهرت مجموعة أوكسالي بلاتين، ومجموعة عالية ومنخفضة الجرعة من Xianlian Detox انخفاضاً كبيراً في حجم الأورام لدى الفئران الليمفاوية المنتقلة (P <0.01). أوضحت صبغة HE أنه مقارنة بالمجموعة النموذجية، زادت مساحة التنخر في أنسجة ورم الفئران وأصبح تركيب الخلايا أضعف وتقلصت حالات تقسيم الخلايا النووية.تحليل تتابع البكتريا المعوية عرض أن مجموعة Xianlian Detox العالية الجرعة قد قلصت الفهورانات Chao1 و ACE و Shannon برغم أن الفروقات كانت بدون أهمية إحصائية. توضح تحليل PCoA أن تركيب مجتمع البكتريا المعوية بين المجموعة العادية والمجموعة نموذجية كان مختلف تماماً، وأدلى كان تركيب مجتمع Xianlian Detox للفئران CRC أكثر قرباً من المجموعة العادية (P<0.01). كمقارنة مع المجموعة العادية، كانت الفوف الكتربيد وMuribaculum intestinale و Parabacteroides goldsteinii و Bacteroides thetaiotaomicron و Parabacteroides gordonii كانت أجلب فاضعة كلها ((P <0.0، 0). أظهرت نتائج أن فاضـيل Alistipes وBacteroides وHelicobacter وHelicobacter pylori وBacteroides acidifaciens و Campylobacterales وKineothrix وKineothrix alysoides وAcetatifactor و Faecalimonas وFaecalimonas umbilicata وAcetatifactor وLachnospiraceae وClostridia وEubacteriales وFirmicutes. تكاثرت في المجموعة النموذجية؛ بينما Verrucomicrobia وVerrucomicrobiae وVerrucomicrobiales وAkkermansiaceae وAkkermansia وAkkermansia muciniphila وBacteroidales وBacteroidia وBacteroidetes وParabacteroides وTannerellaceae وMuribaculum وParabacteroides gordonii كانت أكثر تكاثر في المجموعة Xianlian Detox العالية الجرعة. بالإضافة إلى ذلك، كانت كل فاضية CD8+ T الخلوية أو محتواها من IFN-γ في أنسجة ورم الفئران أكثر منحرفة بشكل ملحوظ مقارنة بالنموذجية (P <0.0،

关键词

البكتيريا المعوية؛الاستجابة المناعية؛سرطان القولون؛Xianlian Detox؛الطب التقليدي الصيني

阅读全文