تأثير خلطة العشاب إينتشينهاو تشينجان تانغ وخلطة التدفئة إينتشين شوسو فا تانغ على زرع الدماء الخارجي للمرضى الذين يعانون من تدهور الكبد الحاد والمزمن ذو الصلة بالتهاب الكبد B

ZENG Menghui ,  

DU Shan ,  

TAN Nianhua ,  

PENG Jie ,  

CHEN Bin ,  

摘要

تهدف هذه الدراسة إلى استكشاف تأثير خلطة العشاب إينتشينهاو تشينجان تانغ وخلطة التدفئة إينتشين شوسو فا تانغ (طريقة التنقية والتسخين المجتمعة) على تنظيم تعبير الخلايا T المنظمة (Treg) / الخلية المساعدة 17 (Th17) في زرع الدماء في المرضى الذين يعانون من تدهور الكبد الحاد والمزمن ذو الصلة بفيروس الالتهاب الكبدي B (HBV-ACLF). يتم جمع البلازما الطرفية الجديدة لدى مرضى HBV-ACLF وفصل الخلايا النووية الفردية (PBMC) وفقًا لتقنية الخرطوشة المغناطيسية. بعد فصل الخلايا الأصلية Treg وNaive CD4 + T cells، تم تكاثرها في الخارج ثم توجيه Naive CD4 + T للتفرع إلى خلايا Th17. إعداد بلازما دموية محتوية على خليط الأعشاب الطبيعية (إينتشينهاو تشينجان تانغ) وطريقة التنقية (إينتشين شوسو تانغ) وطريقة التنقية والتسخين المجتمعة (خلطة الأعشاب الطبيعية إينتشينهاو تشينجان تانغ وطريقة التدفئة إينتشين شوسو فا تانغ، أي طريقة استخدام التسخين والتخلص من السموم بالمادة الحارة) وبلازما الجرذان الفارغة (محلول ملحي فيزيولوجي)، وضبط مجموعة فارغة ومجموعة التنقية (5.04 غ/كغ) ومجموعة التسخين (6.21 غ/كغ) ومجموعة التنقية والتسخين المجتمعة (17.1 غ/كغ)، وتؤخذ لكل مجموعة خلايا معالجة ببلازما مختلفة. استخدام تقنية فحص الخلايا السائبة لفحص تردد الخلايا Treg / Th17، واستخدام الإنزيم المرتبط بالتشقق (ELISA) لاختبار مستويات تعبير عامل التحويل نمط النمو - ß (TGF-ß)، واستخدام تقنية الاصطفات المجسمة لاصطياد الخلايا (CBA) لفحص مستويات تعبير الإنترلوكين (IL) -10، IL-17A، عامل النخر التوافي (TNF-α)، IL-23، واستخدام تقنية البوليميراز المتسلسلة في الوقت الحقيقي (Real-time PCR) لاختبار تعبير بروتين البالغين-3 (FoxP3)، وفيتامين البرومورفين ذو علاقة نووية غرامية-γt (ROR-γt) للرنا، واختبار البيض المناعي النقطي (Western blot) لاختبار تعبير البروتين FoxP3، و ROR-γt . بعد التدخل ببلازما الدم المحتوية على خليط الأعشاب الطبيعية والطريقة التدفئة وطريقة التنقية والتسخين المجتمعة، انخفضت ترددات الخلايا Treg و Th17 في مجموعة التنقية والتسخين المجتمعة، وانخفضت بشكل ملحوظ مستويات المتغيرات الخاصة بالخلايا Treg المحفزة TGF-ß و IL-10 ومستويات المتغيرات الخاصة بالخلايا Th17 لعامل TNF-α و IL-17A و IL-23، كما انخفضت بشكل ملحوظ تعبيرات الرنا والبروتين FoxP3 و ROR-γt (<0.01)؛ بالمقارنة مع مجموعة التنقية، انخفضت ترددات خلايا Treg وكثافة تعبير الرنا والبروتين FoxP3، لكن الفارق لا يتضمن أي دليل إحصائي، وأنخفضت ترددات الخلايا Th17 ومستويات المتغيرات الخاصة بالخلايا Treg TGF-ß و IL-10، ومستويات المتغيرات الخاصة بالخلايا Th17 TNF-α و IL-17A و IL-23، وأنخفضت بشكل ملحوظ تعبيرات الرنا والبروتين ROR-γt (<0.05، <0.01)؛ بالمقارنة مع مجموعة التسخين، انخفضت ترددات خلايا Treg وكثافة تعبير الرنا والبروتين FoxP3، لكن الفارق لا يتضمن أي دليل إحصائي، وأنخفضت ترددات الخلايا Th17 ومستويات المتغيرات الخاصة بالخلايا Treg TGF-ß و IL-10، ومستويات المتغيرات الخاصة بالخلايا Th17 TNF-α و IL-17A و IL-23، وأنخفضت بشكل ملحوظ تعبيرات الرنا والبروتين ROR-γt (<0.05).

关键词

تدهور الكبد الحاد ذو الصلة بالتهاب الكبد B؛ الخلايا T المنظمة (Treg)؛ الخلية المساعدة 17 (Th17)؛ الاستجابة الالتهابية؛ طريقة التنقية والتسخين المجتمعة

阅读全文