دراسة تأثير وصفة Xianglian Huazuo على دورة الخلية والتكاثر في جرذان التهاب المعدة الضموري المزمن استناداً إلى مسار إشارات TGF-β1/Smads

WANG Yican ,  

WANG Jie ,  

CHENG Yirui ,  

LI Xiaojing ,  

MA Yibin ,  

LIU Qiuhua ,  

LIU Ziwei ,  

GUO Yuxi ,  

DU Pengli ,  

CAI Yanru ,  

DU Yao ,  

ZHI Zheng ,  

LI Bolin ,  

YANG Qian ,  

摘要

الهدف هو استخدام تقنيات المعلوماتية الحيوية والتجارب الحيوانية لاستكشاف الآلية المحتملة لتأثير وصفة Xianglian Huazuo على تنظيم دورة الخلية وكبح التكاثر لعلاج التهاب المعدة الضموري المزمن (CAG). الطريقة: تم استخدام قاعدة بيانات GEO وأداة GEO2R لاختيار الجينات المتغيرة في CAG، وتم استخدام تحليل شبكة التعبير الجيني المشترك الموزون (WGCNA) للعثور على الجينات الأساسية (hub gene) لـ CAG، والتقاطع مع جينات دورة الخلية والتكاثر من قاعدة بيانات GeneCards، ثم تم إجراء تحليل الثراء للحصول على المسارات الإشارية والعمليات البيولوجية المرتبطة بـ CAG. بناء شبكة التفاعل بين البروتينات (PPI) باستخدام قاعدة بيانات STRING للبحث عن الجينات الأساسية 2.0 (hub 2.0) وإجراء تجارب حيوانية للتحقق. تم اختيار 14 من 70 من ذكور جرذان ويستر بشكل عشوائي كمجموعة طبيعية، وتم تحضير نموذج CAG باستخدام طريقة مشتركة “عدم انتظام الجوع والشبع + MNNG + صوديوم الساليسيلات” على باقي 56 جرذاً. تم تقسيم الجرذان المصابة إلى مجموعة نموذجية ومجموعات جرعات عالية ومتوسطة ومنخفضة من وصفة Xianglian Huazuo (36، 18، 9 جم / كجم)، مجموعة مورودان (1.4 جم / كجم) مع إعطاء عن طريق الفم لمدة 60 يوماً. تم استخدام تلوين الهيماتوكسيلين والأيوسين (HE) لملاحظة التغيرات المرضية في الغشاء المخاطي للمعدة، والمجهر الإلكتروني النافذ لدراسة البنية الخلوية فائقة الدقة، والتحليل المناعي الغربي للكشف عن بروتينات TGF-β1، Smad2، Smad3، البروتينات المميزة لطور S/G2/M (geminin)، وبروتين Mcm2 في الغشاء المخاطي للمعدة، مع تحليل الارتباط سبيرمان. النتائج أظهرت أن هناك 15 جيناً أساسياً 2.0 بما في ذلك TGF-β1 وأن مسار إشارات TGF-β1 يشارك في تطور CAG. مقارنة بالمجموعة الطبيعية، زادت مستويات التعبير البروتيني لـ TGF-β1، Smad2، geminin، Mcm2 بشكل ملحوظ في مجموعة النموذج (P<0.05)، وانخفض تعبير Smad3 بشكل ملحوظ (P<0.05)؛ مقارنة بمجموعة النموذج، انخفض تعبير TGF-β1 و geminin في المجموعات الدوائية بشكل ملحوظ (P<0.05)، وانخفض تعبير Smad2 و MCM2 في المجموعة ذات الجرعة المتوسطة والعالية من وصفة Xianglian Huazuo ومجموعة مورودان (P<0.05)، وارتفع تعبير Smad3 في تلك المجموعات بشكل ملحوظ (P<0.05). أظهر تحليل الارتباط سبيرمان ارتباطاً سالباً بين Smad3 وباقي المؤشرات، فيما أظهرت باقي المؤشرات ارتباطاً موجباً (P<0.01). الخلاصة قد تعمل وصفة Xianglian Huazuo عن طريق تثبيط مسار إشارات TGF-β1/Smads، تنظيم دورة الخلية وكبح التكاثر لعلاج CAG.

关键词

وصفة Xianglian Huazuo; تحليل شبكة التعبير الجيني المشترك الموزون (WGCNA); التهاب المعدة الضموري المزمن; التكاثر; دورة الخلية

阅读全文