استكشاف تأثير Yishen Huayu Fang على تحلل الذات لتحول خلايا TCMK-1 بناءً على مسار SIRT1/FoxO1

LI Qingru ,  

ZHANG Linqi ,  

LI Binyi ,  

GE Zihao ,  

摘要

الغرض من استكشاف تأثير Yishen Huayu Fang على الحماية من تحول الخلايا النقوية للأنابيب الكلوية (TCMK-1) المستحث من جانب عامل نمو محول - β1 (TGF-β1) وطرق عمله المحتملة. الأساليب: تم استخدام تركيز كتلي بمقدار 10 μg · L-1 من TGF-β1 لحث خلايا TCMK-1 وإقامة نموذج تحول، وتم تحديد المجموعات بمعدل تثبيط بمقدار 2 μmol · L-1 لمثبط معلومات التعديل 1 (SIRT1) (EX527) وهي على النحو التالي: مجموعة فارغة، مجموعة النموذج، مجموعة Yishen Huayu Fang (10 ٪ من مصل الدم Yishen Huayu Fang المحتوي على الدواء)، مجموعة Valsartan (10 ٪ من مصل الدم Valsartan المحتوي على الدواء)، مجموعة EX527 + TGF- β1، مجموعة EX527 + Yishen Huayu Fang، مجموعة EX527. تم فحص المناعة الفلورية العرضية الناتجة عن الادرار بروتين (α -SMA) وبلاك الكالسوم (E-cadherin) وجينات تعبئة الأنابيب المرتبطة بالأنابيب (LC3) وتوضيح مواقع تعبير البروتينات واستخدام التحليل الفلوروسكوبي لإظهار الزمن الحقيقي (Western blot) والتفاعل بوليميراز الانتشار للتضاعف (PCR في الوقت الحقيقي) لفحص تحول الخلايا والتحلل الذاتي والبروتينات ذات الصلة بالممر وتعبير الرنا. النتائج: أظهرت نتائج التفاعل المباشر بالوقت الحقيقي وفحص Western blot مقارنة بالمجموعة الفارغة أن المجموعة النموذج، EX527 + TGF- β1 ومجموعة EX527 أظهرت زيادة ملحوظة في تعبئة الأنبوب المرتبطة بالأنابيب (α -SMA)، بروتين ب62 (p62) ، مستوى الروتين المعاد تركيبه فوكسو (Ac-FoxO1) (P <0.01)؛ مقارنة بالمجموعة النموذج، أظهرت مجموعة Yishen Huayu Fang ومجموعة Valsartan أن مستوى α-SMA و p62 ينخفض بشكل ملحوظ (P <0.05، P <0.01)، وتنخفض مستويات بروتين Ac-FoxO1 بشكل ملحوظ في مجموعة Yishen Huayu Fang (P <0.05)، في حين أن تغيرات مستوى بروتين Ac-FoxO1 في مجموعة علاج Valsartan غير واضحة؛ مقارنة مع مجموعة Yishen Huayu Fang، أظهرت مجموعة Valsartan اختلافات ملحوظة في مستوى رنا p62، α-SMA، p62 (P <0.05)؛ مقارنة مع المجموعة الفارغة غير المعالجة، أظهرت المجموعة النموذج، مجموعة EX527 + TGF- β1، مجموعة EX527 انخفاضا ملحوظا في LC3، جزيئات الأنابيب الذاتية اليومية 1 (Beclin1) ، سيرتونين (SIRT1) ، برياطات الروتين (FoxO1) (P <0.01)، مجموعة النموذج، مجموعة EX527 + TGF- β1 انخفضت تعبئة الكالسيوم في المجموعة (E-cadherin) بشكل ملحوظ (P <0.01) ولم توجد اختلافات ملحوظة في مجموعة EX527؛ مقارنة بالمجموعة النموذج، أظهرت مجموعة Yishen Huayu Fang ومجموعة Valsartan زيادة ملحوظة في E-cadherin، LC3، Beclin1، SIRT1، FoxO1 (P <0.05، P <0.01)؛ مقارنة مع مجموعة Yishen Huayu Fang، أظهرت مجموعة Valsartan اختلافات ملحوظة في رنا LC3، SIRT1، FoxO1 (P <0.05، P <0.01). اظهار نتائج الكشف الفلوري المباشر متوافقة مع نتائج فحص Western blot و PCR في الوقت الحقيقي. الخلاصة: من الممكن أن يكون Yishen Huayu Fang يعمل عن طريق تنشيط مسار SIRT1/FoxO1 لتعزيز تحلل الذات وتخفيف درجة تحول الخلايا TCMK-1 وتعزيزها.

关键词

Yishen Huayu Fang، خلايا أنبوبية كلوية (TCMK-1)، مسار الإيضاح الذاتي 1 (SIRT1) / البروتينO1 (FoxO1)، تحول، تحلل الذات

阅读全文