كبسولات إزالة الرياح والسموم من خلال تثبيط مسارات TLR/NF-κB في خلايا الظهارة التنفسية للتخفيف التهاب الرئة الفيروسي

GENG Zihan ,  

BAO Lei ,  

CAO Shan ,  

ZHU Qiang ,  

PAN Jun ,  

LI Shuran ,  

ZHAO Ronghua ,  

SUN Jing ,  

BAO Yanyan ,  

MU Shaoqiu ,  

CUI Xiaolan ,  

GUO Shanshan ,  

摘要

الغرض من هذا البحث هو استكشاف آلية كبسولات إزالة الرياح والسموم (SFJD) في تخفيف التهاب الرئة الفيروسي الناتج عن فيروس الانفلونزا H1N1 من النوع A، مع التركيز بشكل أساسي على تأثيرها على مسارات إشارة مستقبلات الأمراضية (TLR) في خلايا الظهارة التنفسية. تم تقسيم الفئران إلى مجموعة عادية ومجموعة العدوى بفيروس H1N1 (PR8) ومجموعة SFJD (8.4 جم/كغ) تحت التغذية بشكل عشوائي، كل مجموعة تتكون من 10 فئران. في يوم العدوى كان اليوم الأول، وفي مجموعة SFJD تم تغذية كل فأر بحجم 20 مل/كغ يوميًا، بينما تم إعطاء فئران المجموعة العادية ومجموعة PR8 كمية متساوية من الماء المعزول. تم في اليوم الخامس إجراء مسح الكمبيوتر المحوسب بتقنية الأشعة المقطعية الحاسوبية (Micro-CT)، وقطعت رئة الفأر لحساب مؤشر الرئة للتحقق من فاعلية الدواء؛ تم تحليل فجوني الخلية الواحدة لفهم تعبير الجينات المختلفة لخلايا الظهارة التنفسية. تم الكشف عن تعبير البروتين في الخلايا الظهارية الإيجابية لبروتين عائق الخلية الظهارية البيبسي السلالي (EpCAM)، مستقبل عامل الورم الخبيث 6 (TRAF6) وMyD88 في فقرات القنطري، وحساب نسبة خلايا الظهارة التنفسية التي تعبر عن بروتين مسار TLR؛ تم فصل خلايا الظهارة التنفسية بطريقة الفرز التدفقي؛ تم اكتشاف تعبير البروتين المتسلسل (Western blot) في الخلايا الظهارية الفرزة بالعديد من TLR وMyD88 وTRAF6 وعائق بروتين الكل جديدβ (TRIF) المؤهل لحث فيروسات النقص المناعي التي توقع الصمت (IKKα) وعامل تقمع الكيناز (NF-κB)؛ تم قياس مستويات البعوض المناعي (ELISA) في أنسجة الرئة من الجهاز المناعي الأبيض كي لاβ (IL-1β) وعامل عامل الورم الخبيث (TNF-α). في المستوى النقلي، أظهرت كبسولات إزالة الرياح والسموم SFJD قدرتها على عكس اتجاه تعبير الجينات التوجيهية لمسار TLR في خلايا الظهارة التنفسية (P<0.01). على المستوى بروتين، خفضت SFJD بشكل ملحوظ نسبة الخلايا الظهارية التي تعبر عن TLR3 في أنسجة الرئة (P<0.05)، وهبطت بشكل ملحوظ مستوى التعبير عن TLR2 وTLR3 وTLR4 وTRIF وTRAF6 وIKKα وNF-κB في الخلايا الظهارية (P<0.05، P<0.01)، بالإضافة إلى مستويات البعوض المناعي للمواد الجاذبة IL-1β وTNF-α في الأنسجة الرئوية (P<0.01). الختام قدرت كبسولات إزالة الرياح والسموم SFJD على تثبيط مسار اتصالات مستقبل الأمراضية الظهارية TLR وتفاعلاته التسلسلية الهابطة، وربما يكون هذا أحد الآليات التي تسهم في تخفيف الالتهابات الفيروسية في الرئة.

关键词

كبسولات إزالة الرياح والسموم; فيروس الانفلونزا H1N1 من النوع A; خلايا الظهارة التنفسية; مسارات إشارة مستقبلات الأمراضية

阅读全文