Mechanism of Huanglian Wendantang on Damp-heat Type Diabetes Enteropathy Rats Based on TGR5/GLP-1 Signaling Pathway and Intestinal Flora

WANG Yujin ,  

QIE Yulong ,  

JIANG Hua ,  

YUAN Chen ,  

DENG Xirui ,  

MENG Xuelian ,  

WANG Wenli ,  

SU Yanjin ,  

摘要

الغرض من هذا البحث هو استكشاف ميكانيكية تأثير شراب الحلقون والصفن على أمراض الأمعاء المعوية من نوع السكري المعرضة للرطوبة من خلال مسار إشارة مستقبل حمض الصفراء المرتبط ببروتين G5 / Peptide-1 (TGR5 / GLP-1) والتي تدور حول الأمعاء المعوية والعضوية. الطريقة تم تحضير 72 من الجرذان الذكور نوع SD، تم تغذيتها بنجاح لمدة أسبوع واحد من التأقلم. تم اختيار 12 منها عشوائيًا كمجموعة فارغة وأُعطيت تغذية عادية ، أما الجرذان الأخرى من نوع SD فقد صُوموا ولكن لم يتم منعهم من شرب الماء لمدة 12 ساعة بالطريقة التالية إعطاء حقن في الجانب الأيسر للبطن (55 ملغ / كغ) + نظام غذائي عالي بالسكر والدهون (20٪ من محلول سكر القصب + غذاء عالي الدهون) + بيئة رطبة ودافئة (صندوق مناخي صناعي: درجة حرارة من 30 إلى 34 درجة مئوية، نسبة رطوبة من 85٪ إلى 95٪) لتكوين نموذج الجرذان الكبدية الدافئة لمرض الأمعاء المعوية من نوع السكري. بمجرد التأكد من نجاح عملية النمذجة، تم تقسيمها عشوائيا إلى مجموعات نموذجية، ومجموعة بلور سيليكات الألمونيوم المخثر (200 ملغ / كغ)، ومجموعات الجرعات المنخفضة والمتوسطة والعالية لشراب الحلقون والصفن (7.10، 14.20، 28.39 جم / كغ)، بمعدل 12 في كل مجموعة. وأُعطيت مجموعات الفراغ والنموذجية محلول الملح الفيزيولوجي عن طريق الفم يوميا، مرة واحدة يوميا، واستمر التدخل لمدة 6 أسابيع متتالية. خلال فترة المراقبة، تم قياس الوزن ومستوى السكر في الدم لدى الجرذان أسبوعيا وتم تسجيله. بعد الانتهاء من العلاج، تم جمع البراز الطازج للفئران واستخدام تكنولوجيا تسلسل RNA 16S لدراسة الفروق والتغييرات في مجموعات البكتيريا في الأمعاء بين المجموعات المختلفة. وتم استخدام تقنية ELISA لفحص مستويات عامل الورم المنزلي-α (TNF-α) والإنترلوكين-6 (IL-6) في مصل الدم لدى الجرذان. ولقد درسنا تغيرات الشكلية النسجية لأمعاء القولون الستاتية؛ وتم استخدام الكيمياء المناعية لفحص تعبير TGR5 و GLP-1 في أنسجة القولون لدى الجرذان؛ واستخدمت تقنية البصمة المناعية (Western blot) لفحص تعبير بروتينات TGR5 و GLP-1 في أنسجة القولون لدى الجرذان. في المقارنة مع الفراغ، انخفض وزن الجرذان قي نموذج الفراغ، ارتفعت مستويات السكر في الدم، وظهرت أعراض الرطوبة بشكل واضح، زادت محتوى TNF-α و IL-6 في المصل بصورة واضحة (P<0.01)، وقليلة تعبير TGR5 و GLP-1 (P<0.01)، وزادت البكتيريا الضارة. بالمقارنة مع نموذج الفراغ، ظهرت تحسن في الوزن ومستوى السكر في الدم وأعراض الرطوبة في جميع مجموعات العلاج، وكان لشراب الحلقون والصفن بجرعة عالية أكبر تحسن ملحوظ، وانخفضت مستويات الالتهاب بشكل واضح (P<0.01)، وزاد تعبير TGR5 و GLP-1 بشكل واضح (P<0.01)، وأظهرت شقوق الأنسجة المحببية المركزية مع كبسولة الحلقون والصفن أنها تقوم بتحسين الشكل الطبيعي للأنسجة القولونية. تكنولوجيا تسلسل RNA 16S أظهرت ، بصورة واضحة، تزايدا في الأنواع البكتيرية المفيدة في مجموعات العلاج. الاستنتاج أظهرت إصلاحات ضخمة في أعراض الرطوبة ومستويات السكر في الدم في جرذان أمراض الأمعاء المعوية من نوع السكري المعرضة للرطوبة من خلال استخدام شراب الحلقون والصفن، ويمكن أن تكون تلك الآثار مرتبطة بضبط مسار إشارة TGR5/GLP-1 وانقلاب البكتيريا المعوية.

关键词

diabetes enteropathy;intestinal flora;G protein coupled bile acid receptor 5/glucagon like peptide-1 (TGR5/GLP-1) signaling pathway;Huanglian Wendantang

阅读全文