بهدف استخدام تقنية البروتيوميكس غير التبعية للبيانات (DIA)، درس هذا البحث آليات عمل مستخلص الأشياغا في علاج الفئران المصابة بمرض باركنسون (PD). تم بناء نموذج PD باستخدام فئران معدلة جينيا لزيادة تعبير بروتين α- السينوكلين (α-Syn)، وتم تقسيمها بشكل عشوائي إلى مجموعة نموذج ومجموعة أشياغا ومجموعة ميدوبا، وتم أيضاً اخذ فئران C57BL/6 ذكور بنفس العمر لتكون مجموعة فار تحقق. حيث أعطيت مجموعة أشياغا 61.25 ملغ/كغ من مستخلص الأشياغا، وأعطيت مجموعة ميدوبا 97.5 ملغ/كغ من محلول الميدوبا عن طريق الفم يومياً لمدة 20 يومًا، تم تقييم قدرة حركة الفئران باستخدام وقت التسلق وعدد الحركة الطبيعية لكل مجموعة، واستخدم تلوين هيماتوكسيلين وأيون الأحمر (HE) لمراقبة تغيرات الخلايا العصبية في منطقة العقدة السوداء للفئران المصابة بمرض باركنسون، والاختبار الايمونوهيستوكيميائي (IHC) لقياس نشاط انزيم الدوبامين هيدروكسيليز (TH) في منطقة العقدة السوداء وكثافة سطح α-Syn في منطقة السترياتوم، واستخدام تقنية DIA كشف الفروق في تعبير البروتين بين مختلف مجموعات الفئران واستخدام IHC للتحقق من تعبير البروتينات الفارقة الرئيسية (مثل اللاكتوترانسفيرين، وبروتين 2 الناتج عن جلطة، وبروتين N-Myc المعدل بعد نقص البيولوجي، وبروتين 166 عبر الغشاء (TMEM 166)). تم استخدام مختبر CCK-8 للتحقق من تأثير مستخلص الأشياغا على القدرة المحورة لنموذج الخلايا العصبية المفرطة التعبير عن بروتين α-Syn، واستخدام تقنية تفاعل البوليميراز المتسلسل بالوقت الحقيقي (Real-time PCR) وإختبار الطباعة الكيميائية بالغشاء البوليميراز (Western blot) لقياس تعبير البروتينات وحمض الريبوز المُنَظم بعد زيادة تعبير بروتين α-Syn. نتائج الدراسة أظهرت أن فار PD في المجموعة النموذجية كان لديها زمن تسلق ملحوظ للغاية وتدهور في القدرة على التنسيق وانخفاض مختلط في حركة الفئران الطبيعية (P < 0.01)، وكمية النيورونات المتضخمة قلت؛ مقارنة مع مجموعة الفئران الفارغة، أظهرت مجموعة النموذج أيضاً انخفاضا ملحوظا في نشاط TH في منطقة العقدة السوداء للفئران وتراكم α-Syn في منطقة السترياتوم (P < 0.01)؛ مقارنة مع مجموعة النموذج، أظهرت أشياغا وميدوبا بشكل واضح إعادة تحفيز العملية مكان TH وتقليل تراكم α-Syn (P < 0.05)؛ تحليل بروتينوميكس الكمي أظهر أن مجموعة النموذج مقارنة مع مجموعة الفارغة كان لديها 464 بروتين مختلف في التعبير (DEPs)، ومن ضمنها 323 ارتفاع و141 انخفاض؛ أما مجموعة الأشياغا، قامت برصد 262 DEPs، من ضمنها 85 ارتفاع و 177 انخفاض؛ KEGG أظهر أن الأشياغا يقوم بتنظيم مسار إشارة الخطيئة الرئيسي، وكشف أن تعبير Notch2 و Ndrg2 و TMEM 166 في مجموعة النموذج كان مرتفعاً في حين تعبير Lactotransferrin كان انخفض (P < 0.01)؛ مقارنة مع مجموعة النموذج، أظهرت مجموعة الأشياغا أيضاً انخفاضاً في تعبير Notch2 و Ndrg2 و TMEM 166 و ارتفاعاً في تعبير Lactotransferrin (P < 0.01)، وأظهرت النتائج أيضاً أن التحليل الخارجي أظهر أن تعبير Notch2 و Ndrg2 و TMEM 166 في مجموعة النموذج كان مرتفعاً للغاية في باقي الخلايا (P < 0.01) وأن تعبير Lactotransferrin كان منخفضاً بشكل كبير (P < 0.01)؛ مقارنة مع مجموعة النموذج، أظهرت مجموعة الأشياغا أيضاً انخفاضاً كبيراً في تعبير Notch2 و Ndrg2 و TMEM 166 (P < 0.01) وزيادة ملحوظة في تعبير الكردويل (P < 0.05 و P < 0.01)؛ الاستنتاج شيكوشا ربما يتمكن من خلال تقليل تعبير Notch2 و Ndrg2، وذلك للمساعدة في منع مسار إشارة الخطيئة وتقليل إصابة الخلايا العصبية؛ ومن خلال زيادة تعبير Lactotransferrin وتقليل TMEM 166، يمكنه إصلاح تراكمات الحديد في الدماغ ومنع موت الحديد، وايقاف التحلل الذاتي للميتوكوندريا، ومنع ضرر الأكسجين النشط (ROS)، وحماية الخلايا العصبية لعلاج مرض باركنسون.

مستخلص الأشياغا; مرض باركنسون; تقنية البروتيوميكس غير التبعية للبيانات (DIA); بروتين α- السينوكلين (α-Syn)