تهدف هذه الدراسة إلى التحقيق في تأثير شربة القرن المضادة للسموم على الفئران الصغيرة المصابة بالتهابات بكتيرية، واستكشاف الآليات الجزيئية التي تخفف من تفاعلات الالتهاب بواسطة تنظيم إنزيم البيروفيت النوع M2 (PKM2) في مسار الأيض الكربوني. وقد تم تقسيم 40 فأرًا من نوع C57BL/6N عشوائيًا إلى مجموعة طبيعية ومجموعة نموذجية ومجموعة شربة القرن المضادة للسموم بجرعة منخفضة (7.7 جرام/كغ) ومجموعة شربة القرن المضادة للسموم بجرعة مرتفعة (15.4 جرام/كغ). بعد أسبوع من الإعطاء عن طريق الفم، باستثناء المجموعة الطبيعية، تم استخدام طريقة ربط الزائدة الدودية المخروطية (CLP) لبناء نموذج حيواني لالتهاب بكتيري. تم تسجيل معدلات الوفيات بعد 24 ساعة من الجراحة، وتم استخدام طريقة ELISA للكشف عن السايتوكينات في المصل، واستخدم التلوين بالهيماتوكسيلين-آزورين (HE) لاختبار التغيرات المرضية في أنسجة الرئتين. في التجربة الخارجية، تمت تعريض خلايا الدبقية الأحادية النواة البشرية (THP-1) لتراكيز مختلفة من شربة القرن المضادة للسموم، وتم تعريضها للشحم الليبي (LPS) بتركيز نهائي مقداره 2 ملغ/لتر لمدة 24 ساعة، وتم إعداد مجموعة فارغة. تم استخدام مجموعة ملونة ترقيمية للتحقق من مستوى تفاقم الخلايا، واستخدمت طريقة المنبع المناعي الجلي (Western blot) للكشف عن تعبير السايتوكينات الملتهمة للورم -ألفا (TNF-α)، وكبريتات الشخص الأبيض -1بيتا (IL-1β) وبروتين B المتصل بالخلايا اللمفاوية-2 (Bcl-2)، وبروتين B المتصل بالخلايا اللمفاويةX (Bax). تم تحليل تسلسل الحمض النووي للريبوزات الشريطية وقامت المجموعات بتحليل تخصيب الجينات المعبرة بشكل مختلف وتوسيعها. تحققت المنضدة البيزية في تأكيد جينات المسار الكربوني المفصلية (PKM2، MTR، PHGDH)، وضمن ذلك تم استخدام المناديل البنفسجية لإقامة نموذج تثبيط تعبير PKM2، وقامت بتحليل تغيير تعبير البروتين ذات الصلة. أظهرت التجربة الحيوانية أن مقارنة بالمجموعة الطبيعية، ظهر ارتفاع ملحوظ في درجة حرارة الفئران في المجموعة النموذجية، وظهرت أعراض التهابية في الرئتين (P<0.01)، كما زادت اكثر من مستويات كل من مستويات TNF-α و IL-1β في المصل (P<0.01)؛ بالمقارنة مع المجموعة النموذجية، أظهرت مجموعة شربة القرن المضادة للسموم بجرعة مرتفعة قدرة على خفض حرارة الفئران المصابة بالتهاب بكتيري وإصابة الأنسجة في الرئتين (P<0.05)، وكذا خفض مستويات كل من TNF-α و IL-1β في المصل بشكل ملحوظ (P<0.01)؛ فأثر مجموعة شربة القرن المضادة للسموم بجرعة منخفضة على حرارة الفئران لم تظهر فروقاً ذات دلالة إحصائية، بينما ظهر انخفاض ملحوظ في مستويات كل من TNF-α و IL-1β في المصل (P<0.01). أظهر تسلسل الحمض النووي للريبوزات الشريطية ونتائج Western blot أن كلاً من TNF-α و IL-1β والجينات المتصلة بالأيض (PKM2 و MTR و PHGDH) ظهرت لها فروقات واضحة (P<0.01). أظهرت التجربة الخلوية مقارنة بالمجموعة الطبيعية، ارتفع مستوى كلٍ من بروتينات TNF-α و IL-1β بشكل ملحوظ في خلايا THP-1 في المجموعة النموذجية، وانخفضت نسبة Bcl-2/Bax بشكل ملحوظ، وزادت درجة التفاقم بشكل ملحوظ (P<0.01)؛ أظهرت تسلسل الحمض النووي للريبوزات الشريطية ونتائج Western blot أن كلاً من TNF-α و IL-1β والجينات المتصلة بالأيض (PKM2 و MTR و PHGDH) ظهرت لها فروقات واضحة (P<0.01)؛ بالمقارنة مع المجموعة النموذجية، أظهرت مجموعة شربة القرن المضادة للسموم بجرعة مرتفعة قدرة على تعزيز النسبة Bax/Bcl-2 ومستوى بروتين PHGDH بشكل ملحوظ (P<0.01)، وتخفيف درجة التفاقم بشكل فعال (P<0.01)، كما أظهرت تخفيفاً ملحوظاً في مستويات كلٍ من TNF-α و IL-1β و PKM2 و MTR بشكل ملحوظ (P<0.01)، أما مجموعة شربة القرن المضادة للسموم بجرعة منخفضة فأظهرت تعزيزاً في نسبة Bax/Bcl-2 ومستوى بروتين PHGDH (P<0.05)، وتخفيفاً في درجة التفاقم بشكل ملحوظ (P<0.05)، وأظهرت تقليصاً ملحوظاً في مستويات كلٍ من IL-1β و MTR (P<0.05، P<0.01)، ولكن لم يظهر فروقات من دلالة إحصائية في TNF-α و PKM2. بعد تثبيط تعبير البروتين PKM2 في خلايا THP-1 باستخدام مركب إشاري، تم اختبار تعبير البروتينات المتعلقة بالأيض الكربوني. بالمقارنة مع المجموعة الفارغة، أظهر تعويض الشحم الليبيت النموذجي ارتفاعاً كبيراً في تعبير PKM2 (Pلت;0.01)، وانخفض تعبير PHGDH بشكل ملحوظ (Pلت;0.01)؛ بالمقارنة مع المجموعة النموذجية، أظهرت مجموعة التعامل مع السموم تعويض PKM2 بشكل ملحوظ (Pلت;0.05)، وانخفاض PHGDH بشكل ملحوظ (Pلت;0.01)، وانخفض MTR بشكل ملحوظ (P<0.05). وبناء على ذلك توصلت الدراسة إلى أن شربة القرن المضادة للسموم يمكن أن يعيق إطلاق مستقبلات الالتهاب، وأن آلية تأثيرها ترتبط باهتراء إنزيم البيروفيت النوع M2 في مسار الأيض الكربوني.

املغمة؛ بيروفيت الألاسيت؛ الأيض الكربوني؛ تفكك الخلايا؛ شربة القرن المنادة للسموم