تنظيم glaucocalyxin L لمحور piR-hsa-2804461/FKBP8/Bcl-2 لتعزيز الانحلال الخلوي لمحاربة سرطان المبيض

DONG Yuanguang ,  

SUN Yinying ,  

YUAN Mingdian ,  

YANG Ying ,  

WANG Jiaxin ,  

ZHU Jingxuan ,  

SONG Nan ,  

摘要

من أجل استكشاف الآلية الجزيئية التي تعزز فيها Gyp-L glaucocalyxin L (Gyp-L) عبر تسارع بروتين الربط بـ FK506 (FKBP) البيئي/الميتوكندري (FKBP8) /محور بروتين اللمفاوي البائي Bcl-2 للتخلص من سرطان المبيض (OC) من خلال طريق piR-hsa-2804461 وجاء هدف باستخدام المسلك الخاص به. تم استخدام طريقة اختبار نشاط الخلية (CCK-8) لتقدير تأثيرات تركيزات مختلفة من Gyp-L و cisplatin على نشاط الانقسام الخلوي لخلايا OVCAR3 لتحديد التركيز المناسب للتدخل في التجارب اللاحقة. تم تجهيز خلايا سرطان المبيض OVCAR3 إلى مجموعة سالبة من البيض, مجموعة منخفضة تركيز لـ Gyp-L (50 µmol·L-1), مجموعة عالية تركيز لـ Gyp-L (100 µmol·L-1), ومجموعة cisplatin (15 µmol·L-1) من خلال تجربة الجرح للخلية, تجربة تكوين الأقراص الخلوية وتدفق الخلية لاختبار قدرة هجرة الخلية وتكوين الأقراص الخلوية لخلايا OVCAR3 وحالة الانحلال لخلايا OVCAR3. تم استخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل بالنسبة الزمنية الحقيقية (PCR) للكشف عن مستويات ال RNA الخاصة بـ piR-hsa-2804461 ومحور FKBP8/Bcl-2 المرتبطة بـ OVCAR3 واستخدام تحليل الطباعة الذاتية بتحليل الكم الكامل للكشف عن مستويات البروتين المرتبطة بـ FKBP8/Bcl-2. تم بناء نموذج OVCAR3 المصمم للتعبير عن بروتين مُعطلٍ من piR-hsa-2804461, تم تقسيم الخلية إلى مجموعة سالبة من البيض, مجموعة مثبطة NC للألفا, مجموعة مثبطة, مجموعة مثبطة NC + Gyp-L, مجموعة مثبطة + Gyp-L. تم استخدام تجربة تكوين الأقراص الخلوية للكشف عن قدرة تكوين الأقراص الخلوية لخلايا OVCAR3 واستخدام تفاعل البوليميراز المتسلسل بالنسبة الزمنية الحقيقية (PCR) للكشف عن مستويات ال RNA الخاصة بـ piR-hsa-2804461 ومحور FKBP8/Bcl-2 المرتبطة بـ OVCAR3 واستخدام تحليل الطباعة الذاتية بتحليل الكم الكامل للكشف عن مستويات البروتين المرتبطة بـ FKBP8/Bcl-2. أظهرت Gyp-L قدرة كبيرة على تثبيط قدرة هجرة وانقسام الخلايا لخلايا OVCAR3 (P<0.01), وتعزيز قوة الانحلال لخلايا OVCAR3 (P<0.05), وكذلك زيادة واضح في مستوى RNA الخاص بـ piR-hsa-2804461 في خلايا OVCAR3(P<0.05), وخفض مستويات RNA وبروتين FKBP8 و Bcl-2 (P<0.05), وزيادة مستويات المحور الخاص بـ FKBP8/Bcl-2 المرتبطة بـ Bcl-2 ومحور Bax المرتبط بـ Bcl-2 وCaspase-3 وCaspase-9 (P<0.05). ومن المحتمل أن يكون لدى Gyp-L تأثير على ترويج الخلايا للانحلال عبر تنظيم محور piR-hsa-2804461/FKBP8/BcL2.

关键词

سرطان المبيض; glaucocalyxin L; piR-hsa-2804461; FKBP8; بروتين اللمفاوي البائي Bcl-2

阅读全文