تأثير مصل دم المعالج بمستخلصات الكلى و العروق (TLBS) على الحماية ضد إصابة خلايا القدم للجرذان المحفزة بواسطة الدهون الدهنية

  • role: Corresponding author, First author通信作者, 第一作者
  • Affiliation:

    Jiujiang Hospital of Traditional Chinese Medicine,Jiangxi University of Chinese Medicine,Jiujiang 332000,China

  • Email:liuyf-1981@163.com
  • Introduction:Tel0792-8327915E-mailliuyf-1981@163.com
LIU Yongfang1*,  
  • Affiliation:

    Graduate School,Jiangxi University of Chinese medicine,Nanchang 330004,China

YIN Tiantian2,  
  • Affiliation:

    Jiujiang Hospital of Traditional Chinese Medicine,Jiangxi University of Chinese Medicine,Jiujiang 332000,China

LIU Huiyang1,  
  • Affiliation:

    Graduate School,Jiangxi University of Chinese medicine,Nanchang 330004,China

HUANG Rui2,  
  • Affiliation:

    Graduate School,Jiangxi University of Chinese medicine,Nanchang 330004,China

FENG Zhiying2,  
  • Affiliation:

    Graduate School,Jiangxi University of Chinese medicine,Nanchang 330004,China

ZHOU Li2

ملخص

غرض المراقبة لتحليل تأثير مصل الدم المعالج باستخدام مستخلص لمؤثرات الكلى و العروق (TLBS) على خلايا القدم في الجرذان التي يتم تحفيزها بواسطة الدهون الدهنية (LPS) و استكشاف الآثار المحتملة لها. الطريقة هي تحضير مصل الدم الفارغ لجرذان SD, مصل الدم المعالج بالكلورزة للبوتاسيوم و مصل الدم المعالج بالمستخلصات بجرعات منخفضة و متوسطة و عالية، ثم يتمزرع خلايا القدم في الجرذان في الغرض مواقع خارجية، و يتم فحص النشاط الخلوي و النمو (CKK-8) لتحليل تأثير مصل الدم المعالج على نشاط القدم، و تحديد تركيز الوقاية المثلى لمكونات مصل الدم المعالجة و أفضل تركيز للمواد المثيرة في خلايا القدم. و يتم تقسيم الخلايا إلى مجموعة السيطرة الطبيعية (NC) (10% مصل دم فارغ)، مجموعة النموذج (MC) (20.00 ملغ/ لتر LPS + 10% مصل دم فارغ)، مجموعة الكلورزة للبوتاسيوم (LP) (20.00 ملغ/ لتر LPS+10% مصل دم الكلورزة للبوتاسيوم)، مجموعة المستخلصات بالجرعة المنخفضة (TLBS-L) (20.00 ملغ/ لتر LPS+10% مصل الدم المعالج بمستخلصات الجرعة المنخفضة)، مجموعة المستخلصات بالجرعة المتوسطة (TLBS-M) (20.00 ملغ/ لتر LPS+10% مصل الدم المعالج بمستخلصات الجرعة المتوسطة) و مجموعة المستخلصات بالجرعة العالية (TLBS-H) (20.00 ملغ/ لتر LPS+10% مصل الدم المعالج بمستخلصات الجرعة العالية) تدخل علاجيا لمدة 48 ساعة. مشاهدة الهيكل الفائق للخلية تحت المجهر البروبقاعي، و فحص تجربة TUNEL للتحليل الخلوي و فحص الفلوروسينت لاسيما للجزء الأمامي من البروتين Gasdermin D (GSDMD-NT)، و استخدام تقنية PCR للتفاعل المتسلسل الذي يعتمد على دوران البوليميراز في الزمن الحقيقي (Real-time PCR) و تقنية التحليل الانتشاري للبروتين (Western blot) للكشف عن تفاعل GPRC5B، NF-κB عنصر 50، NF-κB عنصر 52، NF-κB عنصر 65، Rel B، c-Rel، NLRP3، Caspase-1، GSDMD-NT، interleukin-1β، IL-18، Nephrin، integrin α3، integrin β1 mRNA و تعبير البروتين. بالمقارنة مع مجموعة السيطرة الطبيعية، مجموعة النموذج لخلايا القدم تبين إنخفاضا واضحا في السياق الانتصابي و عدد أقل للكليات الهلامية، و نقص في أعضاء الخلية، و زيادة و تضخم للمتقوقات المحبة، و عدم التنظيم للنواة، و تثخين المِادة الصبغية. كما تبين زيادة واضحة في عدم ثبات تلك الإضاءة التي تمثل التنوخ النووي و حامض GSDMD-NT. حقق تحليل الكثير من البروتينات و مراكز نقل الجين البكتيري و Clubs الجينية mRNو الزيتون GSDMD-NT و عدد البروتينات collage المحافظة عندئذ مدي المدى الواقع لكل مستوى. نتيجة المقارنة مع مجموعة النموذج، مجموعة الكلورزة للبوتاسيوم و مجموعة المستخلصات بالجرعة المتوسطة و مجموعة المستخلصات بالجرعة العالية تبين تحسنا طفيفا في الشكل الفائق لخلايا القدم، و زيادة في عدد النقط الانتصابية، و تضحية بالتنظيم للنواة، و تقلص في الدمي الابتدائي لحمض GSDMD-NT. كما ظهور الحالة النووية، GPRC5B و NF-κB عنصر 50 و NF-κB عنصر 52 و NF-κB عنصر 65 و Rel B و c-Rel و NLRP3 و Caspase-1 و GSDMD-NT و interleukin-1β و IL-18 mRNA و تعبير البروتين يظهر انخفاض واضح، و Nephrin و تكامل البروتين في الجينات α3 و البروتين في الجينات β1 يظهر ارتفاع واضح- كل هذه العلامات تكون أوضح في مجموعة المستخلصات بالجرعة العالية. الخلاصة مصل الدم المعالج بمستخلصات TLBS يمكنه تحسين الإصابة لألوان القدم المحفزة بواسطة LPS، و تداعياتها يمكن ان تكون متعلقة بالتنظيم لمسارات الجينات GPRC5B/NF-κB/NLRP3 لتثبيط تنوخ الخلايا.

مفهوم

تأثير مصل الدم المعالج بمستخلصات الكلى و العروق; مرض الأجسام المضادة للأجسام المناعية (IgA) الكلوي; خلايا القدم; تنوخ الخلية

References

  1. 1.
    LI C,LI H.Treatment of IgA nephropathy in the era of evidence-based medicine and personalized medicine[J].Chin Med J,2020,100(30):2328-2331.
  2. 2.
    LI L S,LIU Z H.Epidemiologic data of renal diseases from a single unit in China:Analysis based on 13,519 renal biopsies[J].Kidney Int,2004,66(3):920-923.
  3. 3.
    TIAN X J,HUANG C.Research progress on pathogenesis of immune inflammation in IgA nephropathy[J].Chin J Nephrol,2020,36(5):400-405.
  4. 4.
    TRIMARCHI H,BARRATT J,CATTRAN D C,et al.Oxford Classification of IgA nephropathy 2016:An update from the IgA Nephropathy Classification Working Group[J].Kidney Int,2017,91(5):1014-1021.
  5. 5.
    MAIXNEROVA D,REILY C,BIAN Q,et al.Markers for the progression of IgA nephropathy[J].J Nephrol,2016,29(4):535-541.
  6. 6.
    TRIMARCHI H,COPPO R.Podocytopathy in the mesangialprofierative immunoglulin A nephropathy:New insights into the mechanisms of damage and progression[J].Nephrol Transplant,2019,34(8):1280-1285.
  7. 7.
    MAGISTRONI R,D'AGATI V D,APPEL G B,et al.New developments in the genetics,pathogenesis,and therapy of IgA nephropathy[J].Kidney Int,2015,88(5):974-989.
  8. 8.
    LEUNG J,LAI K N,TANG S.Role of mesangial-podocytic-tubular cross-talk in IgA nephropathy[J].Semin Nephrol,2018,38(5):485-495.
  9. 9.
    NAGATA M.Podocyte injury and its consequences[J].Kidney Int,2016,89(6):1221-1230.
  10. 10.
    ZAMBRANO S,MÖLLER-HACKBARTH K,LI X,et al.GPRC5b modulates inflammatory response in glomerular diseases via NF-κB pathway[J].J Am Soc Nephrol,2019,30(9):1573-1586.
  11. 11.
    CHENG Q,PAN J,ZHOU Z L,et al.Caspase-11/4 and gasdermin D-mediated pyroptosis contributes to podocyte injury in mouse diabetic nephropathy[J].Acta Pharmacol Sin,2021,42(6):954-963.
  12. 12.
    SONG R J,ZHANG X X,GAO F,et al.Effects of Jiawei Shengjiangsan(加味升降散)on TXNIP/NLRP3 pathway and podocyte pyroptosis in rats with diabetic kidney disease[J].Pharmacol Clin Chin Mater Med,2022,38(4):2-9.
  13. 13.
    LIU Y F,CHEN B M,HU X Q,et al.Clinical research of tongluo baoshen prescription on tubulointerstitial injury in IgA nephropathy[J].Chin Med Mod Dist Edu China,2016,14(22):58-60.
  14. 14.
    LIU Y F,CHEN B M,HU X Q,et al.Clinical study of Tongluo Baoshen decoction in the treatment of IgA nephropathy[J].Chin J Integr Tradit West Nephrol,2016,17(11):991-993.
  15. 15.
    SHEN Y J.Pharmacology of Traditional Chinese Medicine[M].Beijing:People's Medical Publishing House,2004.
  16. 16.
    Kidney Disease Committee of Chinese Society of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine.Practice guide for western medicine diagnosis and TCM syndrome differentiation of IgA nephropathy[J].Chin J Integr Med,2013,33(5):583-585.
  17. 17.
    LIU Y F,LIU H Y,CHEN B M,et al.TCM treatment of podocyte injury in IgA nephropathy based on multiple TCM theories:A review[J].Chin J Exp Tradit Med Form,2024,30(4):198-208.
  18. 18.
    CAO H,LIANG J,LIU J,et al.Novel effects of combination therapy through inhibition of Caspase-1/Gasdermin D induced-pyroptosis in lupus nephritis[J].Front Immunol,2021,12:720877.
  19. 19.
    WANG S,LI Y,FAN J,et al.Interleukin-22 ameliorated renal injury and fibrosis in diabetic nephropathy through inhibition of NLRP3 inflammasome activation[J].Cell Death Dis,2017,8(7):e2937.
  20. 20.
    ZHANG P C.Salvianolic acid-B regulates pyroptosis by the Nrf2 in Acute kidney injury[D].Guangzhou:Guangzhou University of Chinese Medicine,2019.
  21. 21.
    PENG W,PEI G Q,TANG Y,et al.IgA1 deposition may induce NLRP3 expression and macrophage transdifferentiation of podocyte in IgA nephropathy[J].J Transl Med,2019,17(1):406.
  22. 22.
    ZHANG H,WANG Z.Effect and regulation of the NLRP3 inflammasome during renal fibrosis[J].Front Cell Dev Biol,2019,7:379.
  23. 23.
    XIAO Y,HE H D,HU P,et al.Correlation between serum Gd-IgAl level and clinical and pathological characteristics of patients with IgA nephropathys[J].J Clin Transfus Lab Med,2021,23(4):492-496.
  24. 24.
    CHEN F F,TANG H Y,YU F,et al.Renal involvement in a silicosis patient - Case report and literature review[J].Ren Fail,2019,41(1):1045-1053.
  25. 25.
    YARIBEYGI H,MOHAMMADI M T,REZAEE R,et al.Fenofibrate improves renal function by amelioration of NOX-4,IL-18,and p53 expression in an experimental model of diabetic nephropathy[J].J Cell Biochem,2018,119(9):7458-7469.
  26. 26.
    FU Q,WU J,ZHOU X Y,et al.NLRP3/Caspase-1 pathway-induced pyroptosis mediated cognitive deficits in a mouse model of sepsis-associated encephalopathy[J].Inflammation,2019,42(1):306-318.
  27. 27.
    CHUN J,CHUNG H,WANG X,et al.NLRP3 localizesto the tubular epithelium in human kidney and correlates with outcome in IgA nephropathy[J].Sci Rep,2016,6:24667.
  28. 28.
    NAVARRO-GONZÁLEZ J F,MORA-FERNÁNDEZ C,MUROS DE FUENTES M,et al.Inflammatory molecules and pathways in the pathogenesis of diabetic nephropathy[J].Nat Rev Nephrol,2011,7(6):327-340.
  29. 29.
    BOINI K M,XIA M,ABAIS J M,et al.Activation of inflammasomes in podocyte injury of mice on the high fat diet:Effects of ASC gene deletion and silencing[J].Biochim Biophys Acta,2014,1843(5):836-845.
  30. 30.
    LIANG J,ZHANG Y,CAO L,et al.The effect of fibrinolytic system on podocyte injury in membranous nephropathy rats[J].Acta Lab Anim Sci Sin,2016,24(3):283-287.
  31. 31.
    HAN W W.α3β1 integrin and podocyte lesion[J].Int J Urol Nephrol,2015,35(5):787-790.
  32. 32.
    ZHANG L,LIU W,LI S,et al.Astragaloside Ⅳ alleviates renal fibrosis by inhibiting renal tubular epithelial cell pyroptosis induced by urotensin Ⅱ through regulating the cAMP/PKA signaling pathway[J].PLoS One,2024,19(5):e0304365.

قراءة النص الكامل

The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website