Protective Effect of Gegen Qianliantang on Intestinal Mucosal Barrier in Ulcerative Colitis Mice via STAT3/NF-κB Axis Regulating Th1/Treg Differentiation
تهدف هذه الدراسة إلى استكشاف تأثير حساء جذور الكوكتيل الصيني على وظيفة حاجز المخاط المعوي في نموذج الالتهاب القولوني القرحي الذي يحدث بتحفيز البولي سكاريد الصوديوم (DSS) في الفئران. تم استخدام محلول DSS بتركيز 2.5٪ لبناء نموذج UC في فئران C57BL/6 ، تم إنشاء مجموعات فارغة ونموذج ومجموعة ميسالازين (0.52 غ / كغ) ومجموعة جذر الكوكتيل الصيني عالية الجرعة (2.23 غ / كغ) ومجموعة جذر جذر الكوكتيل الصيني منخفضة الجرعة (1.12 غ / كغ) ، كل مجموعة تحتوي على 8 نماذج. تم ملاحظة تغيرات خصائص البراز والوزن لدى فئران UC في كل مجموعة قبل وبعد العلاج ، وتم حساب معدل فقد الوزن لدى فئران UC في كل مجموعة ومؤشر نشاط المرض (DAI) ، وتقييم درجة تحسن أعراض التهاب القولون قبل وبعد العلاج لكل مجموعة فئران UC. كان من الممكن تحليل التغيرات في التشريح النسيجي للأمعاء لفئران كل مجموعة باستخدام تلوين الهيماتوكسيلين والآزورين-باس والتفتق المشترك للبيولوجيات وتحليل الكرومية الشديدة والتقدير لكل من مستويات الزو=1 و muc 2 للفار UC في كل مجموعة. استخدمت طريقة تحديد الفيروسات المتصلة بالأنتيجينات (ELISA) لتحليل مستويات إفراز السايتوكينات المحفزة للالتهاب في الدم الطرفي للفئران في كل مجموعة وتقدير مستوى إفراز سايتوكينات المضادة للالتهاب (IL-10) ، واستخدام نفايات الخلايا لتحليل مستوى نشاط الخلايا المساعدة في الطحال وأنسجة القولون لكل مجموعة (Th1، Th17) ، الخلايا التنظيمية Breg). استخدمت طريقة ترسيب البروتينات المحفوظة (Western blot) لتحليل مستويات تعبير البروتين لكل مجموعة. نتائج تشير إلى أن جذر الكوكتيل الصيني بجرعتين عالية ومنخفضة يمكن أن يحسن بشكل ملحوظ معدل فقدان وزن الفئران UC وتقييم بصمة النشاط المرضي (DAI) (P <0.05) ، ويؤخر تقدم الالتهاب في أنسجة القولون الفار UC ، وأن جذر الكوكتيل الصيني بجرعة عالية يظهر أفضل تأثير مداخلة (P <0.05). أظهرت نتائج تلوين AB-PAS أن جذر الكوكتيل الصيني بجرعتين عالية ومنخفضة يمكن أن يزيد بشكل طردي من نمو خلايا المخاط المصنعة وإفراز الغليكوبروتين في بطانة الأمعاء لفئران UC في كل مجموعة. بالمقارنة مع مجموعة النموذج، أقترحت مجموعتي جذر الكوكتيل الصيني بجرعتين عالية ومنخفضة بشكل واضح تعبير البروتين ZO-1 و MUC2 في أنسجة الأمعاء لفئران UC (P <0.05) ، وقادرة على أختزان مستويات إفراز السايتوكينات المحفزة للالتهاب IFN-γ ، IL -6 ، TNF-α في الدم الطرفي (P <0.05) ، زيادة إفراز سايتوكينات المضادة للالتهاب IL-10 (P <0.05) ، ولكن لم تكن هناك اختلافات إحصائية في إفراز سايتوكينات المحفزة للالتهاب IL-17A. بالمقارنة مع مجموعة النموذج، أقترحت مجموعتي جذر الكوكتيل الصيني بجرعتين عالية ومنخفضة بشكل واضح الزيادة في نشاط خلايا Treg المفعلة في الطحال وأنسجة القولون لفئران UC (P <0.05) ، قد امتصاص العدد النشط لخلايا Th1 المفعلة CD4+IFN-γ+ (P <0.05). أشارت نتائج تلوين ويسترن بلوت إلى أن جذر الكوكتيل الصيني يمكن أن يُخفض تعبير البروتينات NF-κB p65، STAT3، T-bet (P <0.05) ، ويرتقي تعبير البروتين FoxP3 (P <0.05) ، كما يمكن أن يقلل من إجراء في نفذ بروتيينات p-NF-κB p65、p-STAT3 (P <0.05). الخترو يشير إلى أن جذر الكوكتيل الصيني قادر على رفع نسبة النشاط لخلايا CD4+FoxP3+Treg وخفض نشاط خلايا Th1 المفعلة CD4+IFN-γ+ ، وقمع إفراز السايتوكينات المحفزة للالتهاب IFN-γ ، IL-6 ، TNF-α ، زيادة إفراز سايتوكينات المضادة للالتهاب IL-10 ، وقادر على تعزيز تعبير MUC2 و ZO-1 في أنسجة الأمعاء لتخفيف حالة التلف التهابي واستعادة سلامة وظيفة حاجز المخاط المعوي. وربما يعود ذلك إلى تنظيم NF-κB p65، STAT3، التنظيمب النووي T-bet، FoxP3.
关键词
ulcerative colitis;Gegen Qianliantang;intestinal mucosal barrier function;nuclear transcription factor(NF)-κB p65/signal transducer and activator of transcription 3(STAT3) signaling pathway;CD4+ T cell subpopulation;anti-inflammatory immune regulation