Exploring Mechanism of Hei Xiaoyaosan Regulating PI3K/Akt Pathway to Improve Learning and Memory Ability of Insomnia Rats with Liver Depression Syndrome Based on Transcriptomics
摘要
هدفت هذه الدراسة إلى استكشاف تأثير سايشاو يواي سان على تحسين قدرة التعلم والذاكرة لدى فئران الأرق الكبدية الانفعالية المحسينة عن طريق تحسين مسار إيونوزيتيد الفوسفوينوزيتيد 3 (PI3K) / بروتين الإيونوزيتيد B (Akt) بناءً على الجينوم. قمنا باختيار 60 فأرًا ذكورًا بالغًا من سلالة SD عمرهم 8 أسابيع بشكل عشوائي وقمنا بتقسيمهم إلى مجموعة فارغة ومجموعة النموذج ومجموعة جرعة منخفضة ومتوسطة وعالية من سايشاو يواي سان (3.82 و 7.65 و 15.30 غ/كغ) ومجموعة ريزيبين (0.09 ملغ/كغ) ، كل منها 10 فئران. باستثناء المجموعة الفارغة ، تم استخدام الحبس المزمن والتحفيز بواسطة جمع الذيل والحقن الوريدي لحمض الباراكلوروفينيل 5-هيدروكسي التربتامين (PCPA) لتحفيز نموذج الأرق الكبدية الانفعالية. تمت إعطاء جميع مجموعات العلاج عن طريق الفم حسب الجرعة المقابلة، مرة واحدة في اليوم لمدة 14 يومًا متتالية. تم اختبار كمية النوم والسلوك المثل الاكتئابي وقدرة التعلم والذاكرة لدى الفئران باستخدام اختبارات التعاون في النوم المختبري المشترك ، واختبار الميدان المفتوح ، واختبار متاهة الماء موريس ؛ واختبارات امتصاص الإنزيم المقروء باللونين (ELISA) لقياس محتوى السيروتونين 5-هيدروكسي تريبتامين (5-HT) وحامض - ج-أمينوبوتيريك (GABA) وعوامل النمو العصبي الناتجة عن المخ (BDNF) وعوامل النمو العصبي المصدرة من خلية الجليا (GDNF) ومحتوى الأكسيد النيتريك (NO) في أنسجة الفهود ؛ الصبغ بالهيماتوكسيلين-ويزوفيلين (HE) لمراقبة التغيرات المرضية في أنسجة الفهود ؛ تقنية تونيل لوسم النهاية لمراقبة معدلات البرمجة الخلايا العصبية في الفهود. تم استخدام تقنيات وراثية الشظية لاتلاحظ الفحوص المجلسية أنه تم تغيير كمية الجينات المعروضة للنموذج ومجموعة الفارغة ومجموعة الجرعة المتوسطة لسايشاو يواي سان بتقنية الفحص المجلسي لمعرفة الجينوم الفرقية وقامنا بإجرائها من خلال التحليل الاستكشافي للجينات ومعرفة الجينات ووظائف الجينات ومسارات الجينات في كتاب الجينوم الكايوتو (KEGG) والتسلسلي الزيجية / مكتبة الجينوم. وتم التحقق من الجينات ذات التجمع العالي والمسارات الرئيسية المحتوية على الجينات والجينات الرئيسية بواسطة التفاعل المتسارع للبوليميراز الحادي والمضاعف (PCR) في الوقت الحقيقي ؛ واختبار الإفصاح بالفلوريسانس المقروء. (ELISA) لقياس تحت الجلد والإيوزيت الفوسفور التين (PTEN) وبيتين 2 (Bcl-2) بروتين بمستوى التعبر المتقدر (BCL2L11) وميتابوليزي لتنشيط البروتين 1 (MAPK1) وانغررجة وجودته وايزمرالية البروتين في أنسجة الفهود. مقارنة بمجموعة فارغة ، تم انخفاض كتلة الفار في مجموعة النموذج وتم تأخير وقت الانتظار للنوم وتقصير وقت النوم (P < 0.01) ؛ كما ظهرت سلوكيات معززة بشكل واضح للديكسات وتم تناول الذكر بشكل كبير ؛ خفضت محتويات السيروتونين و GABA و NO و BDNF و GDNF في أنسجة الفهود (P < 0.01) ؛ يوجد اضطراب في ترتيب الخلايا في منطقة CA1 الفهود وشكل الخلية غير النظامية وقلة عدد الخلايا وصبغ النواة العميق ومتوتر وزيادة في التحول وزيادة في معدل البرمجة الخلوي (P < 0.01). بالمقارنة مع مجموعة النموذج ، ظهرت زيادة في كتلة الفار لدى مجموعة الجرعة العالية والمتوسطة لسايشاو يواي سان وتم تقصير وقت الانتظار للنوم وزيادة في وقت النوم (P < 0.05 ، P < 0.01) ؛ تحسنت سلوكيات الاكتئاب وتحسينت قدرة التعلم والذاكرة؛ زيادة محتوى السيروتينين و GABA و NO و BDNF و GDNF في أنسجة الهبود (P < 0.05 ، P < 0.01) ؛ لاحظنا تحسينًا في الضرر المرضي بالمنطقة CA1 للفهود ، وتم قليل من برمجة خلايا الفهود (P < 0.01). أظهرت نتائج الفحص المجلسي أن السايشاو يواي سان ربما يتحكم في مسار إيوني بتين، و BCL2L11، و MAPK1 عالية الأهمية لتنظيم مسار PI3K / Akt من خلال نقص السمات الحيوية للميزان والفعالية القصوى للبروتين ومجموعة الدلالات. أظهرت النتائج التي قمنا بها تقليل نسبة تعبير ميتابوليزي لتنشيط الفوسفات العالين (PTEN) وبروتين بيتين 2 (Bcl-2) وميتابوليزي الميتابوليزي 1 (MAPK1) لدى الفهود بـ مجموعة الجرعة العالية والمتوسطة للسايشاو يواي سان (P < 0.01) ، لقد زادت نسبة ميفينوسيت الفوسفات العالين (PTEN) وبروتين Bax وبروتين Caspase-3 المقسم بشكل كبير (P < 0.01) ؛ بالمقارنة مع مجموعة النموذج ، قللت مجموعة الجرعة العالية والمتوسطة للسايشاو يواي سان نسبة التعبر المتقدر لبروتين متابوليزي + PI3K و AKt (P < 0.01) ، زادت نسبة تعبير بروتين Bcl-2 (P < 0.01) ، وقللت نسبة التعبير لبروتين Bax و Caspase-3 المقسم (P < 0.05 ، P < 0.01) ؛ تم التوصل إلى أن سايشاو يواي سان ربما يتحكم في مسار PI3K / Akt من خلال تخفيض التعبير الوراثي لبيتين 2 و BCL2L11 و MAPK1 من خلال الفيزيولوجيا الممتازة لتنشيط البروتين لتحسين قدرة التعلم والذاكرة لدى الفئران المصابة بالأرق الكبدية الانفعالية.
关键词
Hei Xiaoyaosan;insomnia with liver depression syndrome;learning and memory abilities;transcriptomic sequencing;differential genes;phosphatidylinositol 3-kinase （PI3K）/protein kinase B （Akt） signaling pathway