تأثير lncRNA MANCR على محور miR-150-5p / GPNMB على انتشار خلايا المعدة السرطانية والهجرة وتحول الظهارة-البينية

LI Chao ,  

WANG Shihui ,  

LIN Jie ,  

WANG Fanke ,  

ZHANG Rui ,  

摘要

الهدف من هذه الدراسة هو استكشاف تأثير الحمض النووي الريبوزي الطويل الغير مشفر المتصل بالإنقسام (lncRNA MANCR) في تنظيم المحور الصغير RNA-50-5p (miR-150-5p) / غير العابر للجلد الأسود (GPNMB) على انتشار الخلايا السرطانية في المعدة (GC) والهجرة وتحول الظهارة-البينية (EMT). تم إجراء تفاحن البوليميراز المتسلسلة في الوقت الحقيقي (Real-time PCR) لقياس تعبير الحمض النووي الريبوزي الطويل الغير مشفر المتصل بالإنقسام (lncRNA MANCR) و miR-150-5p و GPNMB mRNA في أنسجة GC والأنسجة المجاورة للسرطان التي تمت إزالتها جراحيًا في المستشفى الجامعي الأول لكلية الطب في جامعة هيبي بين يونيو 2022 وسبتمبر 2023 في الصين. تم تحديد تعبير lncRNA MANCR في خلايا المعدة السرطانية البشرية BGC-823 وخلايا غشاء المعدة البشرية GES-1 في الثقافة الخلوية الخارجية. تم تقسيم خلايا BGC-823 إلى مجموعات عشوائية: مجموعة Control (ثقافة طبيعية) ؛ مجموعة sh-NC (شريطة sh-NC) ؛ مجموعة sh-MANCR (شريطة sh-MANCR) ؛ مجموعة sh-MANCR + anti-NC (شريطة sh-MANCR و anti-NC معًا) ؛ ومجموعة sh-MANCR + anti-miR-150-5p (شريطة sh-MANCR و anti-miR-150-5p معًا). Analyse تعبير lncRNA MANCR و miR-150-5p و GPNMB mRNA في خلايا BGC-823 المختلفة. تم التحقق من انتشار خلايا BGC-823 باستخدام تلوين 5-ethynyl-2-مفرد النيكوتينوأميد (EdU). أجريت تجربة Transwell لقياس هجرة الخلايا والغزو. تم اختبار الفوائد البروتين بواسطة التحليل المناعي بالبروتين الوراثي (Western blot) لتحديد تعبير البروتين المتعلق بتحول الظهارة-البينية E- الكاديرين (E-cadherin) و N-الكاديرين (N-cadherin) واجهزة الشكل (Vimentin) وبروتين GPNMB. أجري اختبار الجينات البقليمانية المشعتة مزدوجة الفوتونات لتحليل التفاعل بين lncRNA MANCR و miR-150-5p و miR-150-5p و GPNMB. في مقارنتها مع الأنسجة المجاورة للسرطان ، زاد تعبير lncRNA MANCR و GPNMB mRNA في أنسجة GC بشكل ملحوظ وقلص تعبير miR-150-5p بشكل ملحوظ (P<0.05). في مقارنتها مع خلايا القشرة البلزمية GES-1 للمعدة البشرية ، ارتفع تعبير lncRNA MANCR في خلايا BGC-823 بشكل ملحوظ (P<0.05). في مقارنتها مع المجموعة Control ومجموعة sh-NC ، انخفضت نسبة الخلايا الإيجابية لـ EdU وعدد الهجرة وعدد الغزو وتعبير lncRNA MANCR و GPNMB mRNA وبروتين N-الكاديرين والفيمنتين وصنع البروتين بشكل ملحوظ ، في حين زاد تعبير miR-150-5p وبروتين E-الكاديرين بشكل ملحوظ (P<0.05). في مقارنتها مع المجموعة sh-MANCR ومجموعة sh-MANCR + anti-NC ، انخفض تعبير miR-150-5p وبروتين E-كاديرين بشكل ملحوظ ، وزادت نسبة الخلايا الإيجابية لـ EdU وعدد الهجرة وعدد الغزو و GPNMB mRNA وبروتين N-الكاديرين والفيمنتين بشكل ملحوظ (P<0.05). يمكن للحمض النووي الريبوزي الطويل الغير مشفر المتصل بالإنقسام (lncRNA MANCR) التوجه إلى الهدف لتنظيم سلبي لـ miR-150-5p ، ويمكن لـ miR-150-5p التوجه إلى الهدف لتنظيم سلبي لـ GPNMB. الاستنتاج توضح أن صمت الحمض النووي الريبوزي الطويل lncRNA MANCR يمكن أن يعبر عن تنظيم محور miR-150-5p / GPNMB لقمع هجرة خلايا GC وانتشارها وتحول الظهارة-البينية.

关键词

الحمض النووي الريبوزي الطويل الغير مشفر المتصل بالإنقسام; RNA-50-5p; غير العابر للدم الأسود; سرطان المعدة; الانتشار; الهجرة; تحول الظهارة-البينية

阅读全文