Efficacy and Mechanism of Shuanghua Drink in Treating Primary Dysmenorrhea Based on COX-2/NF-κB Signaling Pathway

MA Yuncheng ,  

SHI Yuanyuan ,  

LIU Zhen ,  

WANG Yuxi ,  

TIAN Yuan ,  

LI Qian ,  

WANG Xiaozhu ,  

HE Cheng ,  

XU Wenhui ,  

WANG Weiling ,  

GAO Jian ,  

WANG Ting ,  

摘要

الهدف من هذا البحث هو تقييم الفعالية الدوائية لشراب Shuanghuayin في علاج نموذج الألم الحيضي الأولي في الفئران واستكشاف آلية عمله. تم استخدام نموذج الانعطاف بواسطة الأوكسيتوسين لتقييم تأثير شراب Shuanghuayin المسكن. تم تقسيم 48 فأرة أنثى حامل من نوع ICR غير معالجة إلى 6 مجموعات ، مجموعة فارغة ومجموعة نموذج ومجموعة بيروكسيكام (85.00 ملغ/كغ) ، ومجموعة Shuanghuayin بجرعات منخفضة ومتوسطة وعالية (7.14 و 14.28 و 28.57 مل/كغ) ، كل مجموعة تحتوي على 8 فئران. تم إعطاء كل مجموعة جرعة يومية عن طريق الفم لمدة 10 أيام متتالية. سُحب آخر جرعة بعد ساعة واحدة من التطعيم من عقلة المعدة. يتم تحضير نموذج الألم الحيضي في الفئران الكبيرة بطريقة المشتركة لحمض البنزويك أيثينيل - الأوكسيتوسين ، وتقييم قدرة شراب Shuanghuayin على إيقاف تقلصات العضلات الرحمية. تم تقسيم 48 فأرة أنثى حامل من نوع ICR بدون علاج إلى مجموعة فارغة ومجموعة نموذج ومجموعة بيروكسيكام (51.00 ملغ/كغ) ، ومجموعة Shuanghuayin بجرعات منخفضة ومتوسطة وعالية (4.28 و 8.57 و 17.10 مل/كغ) ، كل مجموعة تحتوي على 8 فئران. تم تحقيق الحقن تحت الجلد لمدة 10 أيام متتالية بحامض البنزويك أيثينيل ورصد تأثيرها على الانقباض الغير طبيعي للرحم بواسطة حقن الأوكسيتوسين (2 وحدة / لكل فأرة) في اليوم الحادي عشر . تم أعطاء الجرعة الفموية لمجموعات العلاج المختلفة في اليوم الثاني لإعداد النموذج وتم متابعة الإعطاء لمدة 10 أيام متتالية. تم تقييم تأثير Shuanghuayin على نموذج الألم الحيض للفئران الكبيرة من خلال اختبار الأنشطة الرحمية ومعدل تغير الأنشطة الرحمية. تم تقييم آثار Shuanghuayin على نموذج ألم الحيض للفئران الكبيرة ، واستخدمت طريقة اختبار ارتباط الإنزيم المرتبطة بالمناعة لقياس مستويات البروستان F2α (PGF2α)،PGE2،TXB2،6-keto-PGF1α، β-أدنوكورتيكوتروبين (β-EP). تم استخدام طريقة اختبار التفاعل اللوني للكشف عن تغيرات مستويات أكسيد النيتريك ومستويات الإنقان الإكرازي للأكسيد النيتريك (iNOS) في أنسجة الرحم. استخدمت طريقة البصمة الجزيئية لتحليل مستويات البروتين لـ p-IKKβ/IKKβ, p-IκBα/IκBα, p-p65 / p65, COX-2 في أنسجة الرحم للفئران الكبيرة. في نموذج الانعطاف بواسطة الأوكسيتوسين في الفئران الكبيرة ، وبالمقارنة مع المجموعة الفارغة ، كانت فترة الانعطاف في المجموعة النموذجية أقصر بشكل ملحوظ وزاد عدد مرات الانعطاف بشكل ملحوظ ( P <0.01) . تمكنت مجموعة بيروكسيكام ومجموعة Shuanghuayin بجرعة عالية من تأخير فترة الانعطاف بشكل ملحوظ ( P <0.05) ، بينما خفضت كل من مجموعة بيروكسيكام ومجموعة Shuanghuayin بجرعات مختلفة عدد مرات الانعطاف بشكل ملحوظ ( P <0.01) . في نموذج ألم الحيض لفئران الكبيرة ، كانت النشاطية الرحمية ومعدل تغيير النشاطية الرحمية في المجموعة النموذجية أعلى بشكل ملحوظ مقارنة بالمجموعة الفارغة ( P <0.01) ، هذا بالإضافة إلى أن كل من مجموعة بيروكسيكام ومجموعة Shuanghuayin بجرعات مختلفة قامت بتثبيط القيم المذكورة بشكل ملحوظ ( P <0.01) . فيما يتعلق بالآلية ، كانت مستويات البروستان F2α / PGE2 و TXB2 / 6-keto-PGF1α ومستويات أكسيد النيتريك ومستويات iNOS في أنسجة الرحم مرتفعة بشكل ملحوظ في المجموعة النموذجية ( P <0.05، P <0.01) ، كما انخفض مستوى β-EP بشكل ملحوظ ( P <0.01). تمكنت مجموعة Shuanghuayin بجرعات مختلفة ومجموعة بيروكسيكام من تثبيط المؤشرات المذكورة بشكل ملحوظ ، وخفضت مستويات PGF2α / PGE2 ( P <0.01) و TXB2 / 6-keto-PGF1α ( P <0.01) و NO (مجموعة جرعة متوسطة P <0.05) و iNOS ( P <0.01) ، ورفع مستوى β-EP (مجموعة جرعة متوسطة P <0.05). بالمقارنة مع المجموعة النموذجية ، ارتفع مستوى β-EP في مصل الدم بشكل ملحوظ في مجموعة بيروكسيكام ومجموعة Shuanghuayin بجرعة متوسطة ( P <0.05) ؛ يتمثل الفرق البياني في تعبير البروتينات COX-2 و p-IKKβ/IKKβ و p-IκBα/IκBα و p-p65/p65 في أنسجة الرحم لدى فئران النموذج بالمقارنة مع المجموعة الفارغة بشكل ملحوظ ( P <0.01) ، بالإضافة إلى الانخفاض الواضح في بروتين IκBα المضاد للالتهاب ( P <0.05). بالمقارنة مع المجموعة النموذجية ، قللت مجموعة بيروكسيكام ومجموعة Shuanghuayin بجرعات منخفضة ومتوسطة وعالية بشكل ملحوظ من تعبير COX-2 ( P <0.01) ، p-IKKβ/IKKβ ( P <0.01) ، p-IκBα/IκBα ( P <0.05، P <0.01) و p-p65/p65 ( P <0.01) ، ورفعت بروتين IκBα بشكل ملحوظ ( P <0.05، P <0.01). Shuanghuayin يمكن أن يعالج الألم الحيض بفعالية، مظهره كمسكن وتثبيط عضلات الرحم الغير طبيعية، والآلية الفعالة ربما تكون في خفض مستويات PGF2α/PGE2 و TXB2/6-keto-PGF1α ومستويات iNOS وNO ورفع مستوى β-ΕP وتثبيط مسارات إشارة COX-2/NF-κB.

关键词

Shuanghua drink;primary dysmenorrhea;cyclooxygenase-2 / nuclear factor-κB (COX-2 / NF-κB) signaling pathway;prostaglandin;inducible nitric oxide synthase ( iNOS )

阅读全文