آلية عمل شياو وي تاو هاو تشنغ تشي تانغ في تحسين تضيّق الشعيرات الدموية الكبدية على أساس مسار إشارة Notch/eNOS
摘要
الهدف هو دراسة ما إذا كان شياو وي تاو هاو تشنغ تشي تانغ (JTCT) يعالج تليف الكبد عن طريق تثبيط تضيّق الشعيرات الدموية الكبدية، والتحقق مما إذا كانت الآلية المحددة مرتبطة بمسار إشارة جين وشم الحافة ثنائي الجناحين في ذبابة الفاكهة (Notch) ومسار إشارة أكسيد النيتريك النوع البطاني (eNOS). الطريقة: تم تقسيم 50 فأر C57BL/6 عشوائيًا إلى مجموعة طبيعية، مجموعة نموذج (5 مل·كغ^-1·3 أيام^-1)، ومجموعات الجرعات المنخفضة والمتوسطة والمرتفعة من JTCT (JTCT-L، JTCT-M، JTCT-H) (16.6، 33.3، 66.6 جم·كغ^-1·يوم^-1). باستثناء المجموعة الطبيعية، تم حقن الفئران الأخرى داخل الصفاق كل 3 أيام بمحاليل زيت الزيتون مع رباعي كلوريد الكربون 20% لمدة 4 أسابيع لتحفيز نموذج تليف الكبد. في الوقت ذاته، تم إعطاء المجموعات JTCT-L، JTCT-M، JTCT-H عن طريق التسريب الفموي يوميًا وبجرعات محددة لمدة 4 أسابيع (تم إعطاء المجموعتين الطبيعية والنموذج محلول ملحي متساوي الحجم). تم عزل الخلايا البطانية الجيوبية الكبدية الأولية (LSECs) من كبد الجرذان باستخدام بروتوكول إنزيمي وموسطة بيركول لفصل الخلايا مع إزالة خلايا كوففر الانتقائية، وتم التحقق من النمط الظاهري للخلايا قبل التجارب. بعد تحضين الخلايا إلى الطور اللوغاريتمي، تم استخدام مجموعة أدوات RNA التدخلي القصير (siRNA) للتحويل الفوري لتقليل تعبير الجوانيلات السيكليز القابل للذوبان (sGC). بعد ذلك، تم تحويل الخلايا باستخدام siRNA لخفض التعبير عن sGC واستخدام منشط Notch الجاغد-1. استخدم اختبار تنشيط تكاثر الخلايا CCK-8 لاختبار تأثير JTCT على تثبيط تكاثر LSECs، وPCR الكمي الفوري وWestern blot لتحليل التعبير الجيني والبروتيني لمسارات Notch و eNOS، واستخدمت مجسات الفلوروفور Fluo-4/AM لعلامة أيونات الكالسيوم الثنائية Ca^2+ داخل الخلايا. النتائج: بالمقارنة مع المجموعة الطبيعية، أظهرت أنسجة الكبد في مجموعة النموذج تنكسًا شحميًا، تسللًا لخلايا الالتهاب، تنكس ونيكروز في خلايا الكبد، تعطيل بنية الفصيص وزيادة النسيج الليفي؛ بالإضافة إلى ارتفاع ملحوظ في بروتين الهيدروكسي برولين (Hyp) في الدم، وإنزيمات ALT وAST (P<0.01)؛ وارتفاع في تعبير Notch1، Hes1، CD31، وعامل فون ويلبراند (vWF) (P<0.01)، مع انخفاض تعبير eNOS المفسفر (p-eNOS/eNOS) وsGC (P<0.01). بالمقارنة مع مجموعة النموذج، أظهرت مجموعات جرعات JTCT انخفاضًا ملحوظًا في Hyp، ALT، AST في الدم (P<0.01)؛ وانخفاض تعبير Notch1، Hes1، CD31، vWF في الكبد (P<0.05، P<0.01)؛ وارتفاع في تعبير p-eNOS/eNOS و sGC (P<0.05، P<0.01)، مع أفضل تحسين في مجموعة JTCT-H (P<0.01). في التجارب الخارجية، بالمقارنة مع مجموعة LSEC-1day، أظهرت LSEC-5day زيادة تعبير Notch1، Hes1، CD31، vWF (P<0.01) وانخفاض تعبير p-eNOS/eNOS وsGC (P<0.01)؛ وزيادة ملحوظة في تركيز Ca^2+ داخل الخلايا (P<0.01). مقارنة بمجموعة LSEC-5day، أظهرت مجموعة JTCT انخفاضًا ملحوظًا في تعبير Notch1، Hes1، CD31، vWF (P<0.01)، وارتفاعًا في تعبير p-eNOS/eNOS (P<0.01) وانخفاضًا في تركيز Ca^2+ داخل الخلايا (P<0.01). لم تكن هناك فروق ذات دلالة إحصائية في التعبير وتركيز Ca^2+ بين مجموعة Jagged1 ومجموعة Jagged1+JTCT. مقارنة بمجموعة LSEC-5day، أظهرت مجموعة KO لـ sGC (sGC-KO) زيادة في تعبير CD31، vWF (P<0.01)، ولم تظهر فروق ذات دلالة إحصائية بين مجموعتي sGC-KO وsGC-KO+JTCT. الاستنتاج: يعالج JTCT تليف الكبد عن طريق تثبيط تنشيط مسار إشارة Notch، واستعادة نشاط مسار eNOS، مما يثبط تضيّق الشعيرات الدموية ل LSECs.
关键词
شياو وي تاو هاو تشنغ تشي تانغ; تضيق الشعيرات الدموية الكبدية; مسار إشارة جين وشم الحافة ثنائي الجناحين (Notch); مسار إشارة أكسيد النيتريك النوع البطاني (eNOS); تليف الكبد
以上内容由讯飞翻译自动生成，翻译内容仅供参考。对于因使用本网站翻译内容产生的相关后果，本网站不承担任何商业和法律责任。
The above content is generated by Large Model Translation. The translated content is for reference only. We do not assume any commercial or legal responsibilty for any consequences arising from the use of our website