شيانليان جيودو فانغ من خلال منع سرطان القولون المدعوم بالأورام العملاقة الملتهبة ذات الصلة بلانتقال المستضد CCL5/STAT3/β-catenin،

QIAN Jingyang ,  

TAO Lihuiping ,  

ZHANG Qinchang ,  

SHEN Weixing ,  

LI Liu ,  

SUN Dongdong ,  

CHENG Haibo ,  

摘要

الهدف من هذه الدراسة هو استكشاف آلية كيف يمكن لشيانليان جيودو فانغ منع انتقال سرطان القولون من خلال تثبيط إنتاج عامل الجذب المستضد 5 C-C من قبل الخلايا العملاقة الملتهبة ذات الصلة بالأورام (TAMs) الذين يعتمدون على M2 بولاريزيشن. تمت إعداد الخلايا الحبيبية الواحدة البشرية اليتيمة (THP-1) لتحويلها إلى TAMs من النوع M2 بناءً على المظهر وتم اختبار الهمتيرة الحيوية في الزمن الحقيقي (Real-time PCR) للتحقق والتعرف على الخلايا المعزولة مع خلية سرطان القولون البشرية (HCT116). تمت تجربة مجموعة بدائل (خلية HCT116)، مجموعة التدخل بـCCL5 (20، 40، 60 ميكروغرام / لتر)، مجموعة الزرع المشترك (زرع HCT116 مع TAMs)، مجموعة شيانليان جيودو فانغ المنخفضة، المتوسطة، العالية (زرع HCT116 مع TAMs ثم إضافة 1، 2، 3 جرام / لتر من شيانليان جيودو فانغ)، مجموعة الجسيمات المضادة للـCCL5 (2 ملليغرام / لتر) تم فحص محتوى CCL5 في الزرع الخلوي من خلال طريقة الامتصاص المناعي المطابقة (ELISA) وتأثير CCL5 على قدرة نمو خلية HCT116 تم فحصه بواسطة تجربة CCK-8 وتجربة تشكيل التجمع وتجربة الهجرة عبر Transwell. تم اختبار التعبئة الكلوية للجرح وتجربة الانتقال لاختبار قدرة نقل الخلايا HCT116 تحت ظروف تدخل مختلفة، باستخدام تقنية الفحص البروتيني الكيميائي والمستخلص (Western blot) لاختبار تعبير E- الكاديرين، N- الكاديرين، الفيمنتين، بيتا القفص، STAT3،و تعبير الفوسفرة STAT3. أظهرت نتائج الفحص في الزمن الحقيقي أن مستوى التعبير لـ Arginase-1 و CCL22 للخلايا النمطية M2 TAMs كان مرتفعًا بشكل ملحوظ مقارنة بالمجموعة النمطية M0 (P<0.01)؛ أظهرت نتائج ELISA أن محتوى CCL5 في تربيت الخلايا للمجموعة النمطية من الجيل M0 كان زائد ولكن لم يكن هذا الفرق ذا أهمية إحصائية، وكان محتوى CCL5 في تربيت الخلايا للمجموعة M2 والمجموعة المشتركة كان مرتفع بشكل مبين (P<0.01)؛ بالمقارنة مع المجموعة المشتركة كان مستوى محتوى CCL5 في مجموعة شيانليان جيودو فانغ المنخفضة والمتوسطة والعالية منخفضًا بشكل واضح (P<0.05، P<0.01). أظهرت نتائج CCK-8 أن تأثيرات معدلات البقاء على قيد الحياة لخلايا HCT116 بالمقارنة مع المجموعة البدائل وهذا بتدخل CCL5 (2.5~100 ميكروغرام / لتر) لم يكن له اختلاف ذو دلالة إحصائية بعد 24، 48، 72 ساعة. أظهرت نتائج تجربة تشكيل التجمع أن معدل تشكيل الانسكاب ربما ليس له دلالة إحصائية على الإطلاق بعد 20، 40، 60 ميكروغرام / لتر. أظهرت نتائج تجربة التعبئة الكلوية للجرح وتجربة الهجرة عبر Transwell إن معدل نقل الخلايا في مجموعات التدخل من CCL5 (20، 40، 60 ميكروغرام / لتر)، والمجموعة المشتركة كان مرتفعًا بشكل ملحوظ (P<0.01) ؛ بالمقارنة مع المجموعة المشتركة، كان معدل نقل الخلايا في مجموعة الجسيمات المضادة للـCCL5 ومجموعة شيانليان جيودو فانغ المنخفضة والمتوسطة والعالية كان منخفضًا بشكل ملحوظ (P<0.01)؛ لكن تعبير E- الكاديرين، N- الكاديرين، الفيمنتين، بيتا القفص، STAT3، وتعبير الفوسفرة STAT3، و تعبير p-STAT3/STAT3 كان في تزايد ملحوظ بالمقارنة مع المجموعة البدائل (P<0.05، P<0.01). بالمقارنة مع مجموعة الزرع المشترك، كان معدل التعبير لـN- الكاديرين، الفيمنتين، بيتا القفص، STAT3، وتعبير الفوسفرة STAT3، و تعبير p-STAT3/STAT3 وكان في تناقص ملحوظ (P<0.05، P<0.01)، أما معدل التعبير لـE- الكاديرين كان في زيادة ملحوظة (P<0.01). يمكن لشيانليان جيودو فانغ منع انتقال سرطان القولون من خلال تثبيط إنتاج CCL5 المعتمد على TAMs وتوازن تعبير البروتينات التي تشير إلى إعبار الزائد والنقصان في المقاطعة الخلوية وبالتالي يؤدي إلى خلل في تعبير الإشارة.

关键词

شيانليان جيودو فانغ، سرطان القولون، الخلايا العملاقة الملتهبة ذات الصلة بالأورام، C-C من عامل الجذب المستضد 5 (CCL5)، الانتقال الخلوي عبر التجمع (EMT)

阅读全文