Mechanism of Xiayuxue Tang in Inhibiting Hepatocellular Carcinoma Cells by Regulating YAP1/SIRT5 Signaling Axis to Mediate Succinate Metabolism and Succinylation

LU Linzhu ,  

GUO Qianqian ,  

TIAN Xuefei ,  

CHEN Bin ,  

TAN Nianhua ,  

摘要

هدفت هذه الدراسة إلى استكشاف تأثير شوربة التخلص من الدمً على تنظيم الاستقلاب العصاري وتثبيط تصلب الكبد الخلوي وآليته. طرق: تحضير مصل الدم المشمع لشوربة التخلص من الدم؛ استخدام اختبار نشاط زيادة الخلايا (CCK-8) لمراقبة تأثير حمض العصير على نمو خلايا HepG2 و MHCC97H في تراكيز مختلفة وتحديد تركيز التجربة التالي؛ بعد ذلك، استخدام اختبار CCK-8 لرصد تأثير مصل الدم المشمع لشوربة التخلص من الدم (5٪ و 10٪ و 15٪) على نمو خلايا HepG2 و MHCC97H؛ اختبار نمط الخلايا الجاري واختبار الإتصال الخلوي واختبار Transwell لتحليل تأثير مصل الدم المشمع لشوربة التخلص من الدم (10٪) على الدورة الخلوية والتحرك والاختراق والخفقان لخلايا HepG2 و MHCC97H، فضلاً عن قياس محتوى حمض العصير واختبار نشاط إنزيم الفصل (SDH) واختبار البصمة الجزيئية (Western blot) لتحليل التغير في الاستقلاب العصاري وتثبيط تصلب الكبد الخلوي، بالإضافة إلى استخدام تكرار رقمي لتفاعل البوليميراز المتسلسل في الوقت الحقيقي (Real-time PCR)، واختبار Western blot لتحليل تعبير Yes-associated protein 1 (YAP1) وsilent information regulator factor 5 (SIRT5)؛ استخدام الارتباط الجزيئي للتحقق من القدرة المتميزة لمكونات شوربة التخلص من الدم الرئيسية على ارتباط البروتين المستهدف. النتائج: بالمقارنة بالمجموعة الفارغة، فإن العصير بتركيز 1 ~ 2 ممول / ليتر يمكن أن يحفز بشكل ملحوظ نمو خلايا HepG2 و MHCC97H (P <0.01>؛ في المقارنة مع مجموعة المصل الفارغة، يمكن أن شوربة التخلص من الدم للدم المشمع (5٪ و 10٪ و 15٪) تثبط بشكل واضح نمو خلايا HepG2 و MHCC97H (P <0.05>، P <0.01>؛ في المقارنة مع مجموعة المصل الفارغة، يمكن أن مصل الدم الشخصي لشوربة التخلص من الدم (10٪) يمكن أن يوقف الدورة الخلوية للخلية في مرحلة التخليق القبلي لحمض النووي (G0 / G1) (P <0.01>، وفي الوقت نفسه يثبط بشكل واضح التحرك والاختراق لخلايا HepG2 و MHCC97H (P <0.01>؛P <0.05>، P <0.01>، P <0.01>؛ بالإضافة إلى ذلك، في المقارنة مع مجموعة شوربة التخلص من الدم، يمكن أن نسبة نمو خلايا HepG2 و MHCC97H في مجموعة تعامل شوربة التخلص من الدم المشمع مع حمض النووي (G0 / G1) (P <0.01>؛ يقلل التحرك والقدرة على الاختراق (P <0.05>، P <0.01>، P <0.05>، P <0.01>؛ في مقارنة مع مجموعة المصل الفارغة، يمكن أن مصل الدم المشمع بشوربة التخلص من الدم (10%) ينخفض مستوى حمض النووي في خلايا HepG2 و MHCC97H (P <0.05>، P <0.01>؛ يرتفع نشاط SDH (P <0.01>، ويقلل بشكل ملحوظ من مستوى التشبع بالعصير. فيما يتعلق بمسار YAP1 / SIRT5، في المقارنة مع مجموعة المصل الفارغة، يمكن بشكل واضح أن مصل الدم المشمع لشوربة التخلص من الدم (10٪) بشكل ملحوظ يخفض التعبير الريبوزي والبروتين YAP1 في خلايا HepG2 و MHCC97H (P <0.05>، P <0.01>؛ يرتفع تعبير رسول الحمض الريبوزي والبروتين SIRT5 (P <0.05>، P <0.01>؛ وتظهر نتائج الربط الجزيئي أن ياس1 وSIRT5 بينهما، وكذلك مكونات شوربة التخلص من الدم النشطة الرئيسية وYAP1و SIRT5 تمتلك جميعها قدرة ربط جيدة. الاستنتاج: تتمحور شوربة التخلص من الدم على الاشاراتYAP1 / SIRT5 للتدخل في الاستقلاب العصاري - تشبع العصير لتثبيط تصلب الكبد الخلوي.}, title :الاستقلابالعصاري؛ YAP1 / SIRT5 keyword :سرطان الكبد؛ شوربة التخلص من الدم؛ عصير العصير؛ تشبع العصير؛ Yes-associated protein 1 (YAP1)؛ silent information regulator factor 5 (SIRT5)

关键词

hepatocellular carcinoma;Xiayuxue Tang;succinate;succinylation;yes-associated protein 1 (YAP1);sirtuin 5 (SIRT5)

阅读全文