الكشف الكمّي الجزيئي لعشبة الدانغقوي ومنتجاتها بناءً على طريقة Herb-Q
摘要
الغرض: يُعتبر عشبة الدانغقوي (当归) من الأعشاب الطبية ذات الاستخدام الواسع والمتداولة على نطاق كبير، حيث تنتشر ظاهرة التزوير في السوق بشكل متكرر مما يؤثر بشدة على الفعالية السريرية للتركيبات. حالياً تم تطوير تقنيات تحديد التزوير النوعي بشكل جيد، ولكن طرق الكشف الكمّي للتزوير في المنتجات المعالجة ما زالت غائبة. تهدف هذه الدراسة لإجراء بحث كمّي على عشبة الدانغقوي وأحد منتجاتها المتقاربة والتي يمكن أن تُخدع بها، وهي 'توتانغقوي' (当归 كوري) وذلك لإنشاء طريقة كشف كمّي جزيئي للأعشاب (Herb-Q) يمكن أن توفر نموذجاً لإنشاء تقنيات الكشف الكمّي لعشبة الدانغقوي ومنتجاتها الصحية ذات الصلة. تعتمد الطريقة على اختيار مواقع تغاير نوكليوتيد أحادي خاصة (SNP) في الجينوم البلاستيدي لكل من الدانغقوي وتوتانغقوي الكوري. تم اختيار المواقع الخاصة بالدانغقوي لإجراء دراسات المنهجية الكمّية باستخدام مساحيق الأعشاب المخلوطة بنسب تزوير مختلفة (الخطيّة، حد الكم، حد الكشف، والتكرارية). تم استخدام ثلاث نسب تزوير مختلفة (15%، 25%، 35%) في مسحوق علاج نشط لتقييم دقة طريقة Herb-Q في الكشف الكمّي للأدوية الصينية التي تحتوي على الدانغقوي. النتائج: بناءً على مقارنة 123 تسلسلًا للبلاستيدات النباتية لعشبة الدانغقوي، وبالاعتماد على المحافظة داخل النوع، والخصوصية بين الأنواع، ومتطلبات التسلسل عالي التدفق باستخدام البيروفوسفات، تم تحديد الموضع 9674 (A/G) لـNC_042826.1 والموضع 38592 (T/C) لـNC_029393.1 كمواقع مميزة جزيئية خاصة بالدانغقوي وتوتانغقوي الكوري على التوالي. تم اختيار الموضع الخاص بالدانغقوي 9674 (A/G) لتقييم علاقة الخطية لطريقة Herb-Q التي أظهرت قيمة R²=0.9974 (>0.99)، مما يدل على علاقة خطية جيدة. كانت حدود الكم وحدود الكشف 2.0%، والتكرارية جيدة (الانحراف المعياري النسبي <2.0%). أظهر نظام الكشف الكمّي المبني على طريقة Herb-Q نسبة انحراف متوسطة 1.3% في تكرار ثلاثة اختبارات للكشف عن تزوير توتانغقوي في مسحوق علاج نشط. الاستنتاج: تشير الدراسة إلى أن طريقة الكشف الكمّي Herb-Q القائمة على الموضع 9674 (A/G) في الجينوم البلاستيدي NC_042826.1 للدانغقوي تمتلك تطبيقية جيدة وموضوعية ودقة عالية في تحديد الدانغقوي وتوتانغقوي ومعالجاتهما، وتستطيع تقديم دعم تقني للكشف الكمّي في المنتجات التجارية المشتقة من الدانغقوي مثل المستحضرات الطبية الصينية، المكملات الغذائية ومنتجات الصحة.
关键词
طريقة الكشف الكمّي الجزيئي للأعشاب (Herb-Q); الدانغقوي; التزوير; تسلسل البيروفوسفات; البحث الكمّي