الغرض: مشغل U6 هو عنصر رئيسي يدير تعبير RNA الموجه (sgRNA) في نظام تحرير الجينات المشتق من CRISPR/Cas9 في النباتات ذات الفلقة الزوجية، ويتكون من تتابعات مكررة قصيرة عاكسة (CRISPR). عادةً ما تكون المشغلات U6 الأصلية في النوع لها نشاط نسخي أعلى مما يعزز كفاءة تحرير الجينات بشكل كبير. تهدف هذه الدراسة إلى تحديد المشغلات U6 الأصلية في نبات الأرتميسيا الصينية لتحسين نظام تحرير الجينات CRISPR/Cas9 الخاص به، وهو أمر ذو أهمية كبيرة للتربية الجزيئية لهذا النبات. المنهج: بناءً على تسلسل U6 snRNA شديد الحفظ في أرابيدوبسيس، تم اختيار تسلسلات مشغل U6 الأصلية من الجينوم الكامل للأرتميسيا الصينية، ثم تم بناء ناقل مركب يعبر عن جين اللوسيفيراز (LUC) تحت تحكم المشغل U6 المرشح، وتم تحويل هذا إلى نبات التبغ بشكل مؤقت، وتم تقييم النشاط النسخي للمشغلات المختلفة عبر التصوير الحي ونظام تقرير لوسيفيراز مزدوج. النتائج: تم استنساخ 8 مشغلات U6 أصلية من الأرتميسيا الصينية بنجاح. أظهر التحليل التسلسلي أن هذه المشغلات تحتوي على عناصر مركزية متحكمة (USE وTATA-box) تؤثر في نشاطها النسخي. أظهرت نتائج اختبار اللوسيفيراز المزدوج أن نشاط النسخ للمشغلات AaU6-3 و AaU6-1 و AaU6-5 كان أعلى بشكل ملحوظ من AtU6-26 في أرابيدوبسيس، وكان AaU6-3 هو الأعلى نشاطًا. الخلاصة: حددت الدراسة ثلاثة مشغلات U6 أصلية ذات نشاط نسخي عالي في الأرتميسيا الصينية، مما يوفر عناصر وظيفية هامة لبناء نظام تحرير جينات فعال، ويساعد في تعزيز التربية الجزيئية الدقيقة وتحسين الموارد الوراثية للنبات.

الأرتميسيا الصينية;مشغل U6;النشاط النسخي