الغرض من محفز U6 هو عنصر رئيسي في نظام تحرير الجينات CRISPR/Cas9 الذي يدير التعبير عن RNA المرشد (sgRNA) في النباتات ذات الفلقة الثنائية، والذي يحتوي على تسلسل مكرر معكوس قصير متكرر منتظم متجمع. عادةً ما يكون لمحفز U6 الأصلي في النوع نشاط نسخي أعلى، مما يعزز بشكل كبير كفاءة تحرير الجينات. تهدف هذه الدراسة إلى تحديد محفزات U6 الأصلية في نبات الأرتيميسيا لتحسين نظام تحرير الجينات CRISPR/Cas9 الخاص به، وهو مهم جدًا للتربية الجزيئية لنبات الأرتيميسيا. الطريقة: استنادًا إلى تسلسل RNA الصغير U6 النووي (snRNA) المحافظ للغاية في الأرابيدوبسيس، تم ترشيح محفزات U6 الأصلية من جينوم الأرتيميسيا الكامل، ثم تم بناء ناقل تجميعي يحمل جين اللاوسفيراز (LUC) الذي يقوده محفز U6 المرشح، وتم تحويله مؤقتًا إلى التبغ ومن ثم تقييم النشاط النسخي لكل محفز باستخدام التصوير الحي ونظام تقرير اللوكاز المزدوج. النتائج: تم بنجاح استنساخ 8 محفزات U6 أصلية من الأرتيميسيا. أظهر تحليل التسلسل أن هذه المحفزات تحتوي على عناصر تنظيمية محفوظة ذات دور في نشاط النسخ مثل USE وTATA-box. أظهر اختبار نشاط اللوكاز المزدوج أن نشاط النسخ لـ AaU6-3 و AaU6-1 و AaU6-5 أعلى بشكل ملحوظ من AtU6-26 في الأرابيدوبسيس، مع أعلى نشاط لـ AaU6-3. الاستنتاج: حددت هذه الدراسة 3 محفزات U6 أصلية عالية النشاط النسخي في الأرتيميسيا، مما يوفر عناصر وظيفية مهمة لبناء نظام تحرير جينات عالي الكفاءة في الأرتيميسيا، ويساعد على دفع التربية الجزيئية الدقيقة وتحسين موارد الأنواع عالية الجودة للأرتيميسيا.

الأرتيميسيا;محفز U6;النشاط النسخي