Establishment and Evaluation of Mouse Model of Ischemic Heart Disease with Qi and Yin Deficiency Syndrome Based on Proteomics

ZHANG Qiuyan ,  

LI Ying ,  

GAO Yunxiao ,  

HU Longxiao ,  

YUAN Yue ,  

CHEN Xiaoxiao ,  

SHI Yali ,  

REN Junguo ,  

摘要

استكشاف طرق بناء نموذج فئران الأمراض القلبية الإقفارية الناتجة عن الانخفاض الشديد في الدمانين والهواء في البطن عن طريق حقن أيزوبروترينول (ISO) في البطن، وطرقها البيولوجية. يتم تقسيم 144 فأر ذكر C57BL / 6J عشوائيًا وفق الوزن إلى 3 مجاميع طبيعية و 9 مجاميع نماذج، كل منها لديها 12 فأرًا. بمعدل حقن ISO في البطن (5، 10، 15 ملغ/كغ/يوم) وفترة الحقن (4، 7، 14 يوم) باعتبارها العوامل، يتم بناء جدول L_9 (2^3) متقاطع، ويتم حقن المجاميع الثلاثة الطبيعية بكميات متساوية من محلول كلوريد الصوديوم القلوي. يتم فحص أوزان الفئران، كميات الماء التي تم شربها خلال 24 ساعة، القوة الاستقبالية، والحركة المستقلة بعد انتهاء عملية النمذجة، يتم حقن المجاميع النموذجية بهدف فحص أداء القلب لديهم بمسح القلب بالصوت وفحص مستويات النورأبينيفرين (NE) والسيكليك أمب (cAMP) وسيكليك جيوانوزين مونوفوسفات (cGMP) في المصل، واختبار أنزيم مرتبط بالذات (ELISA) لقياس محتوى ATP في أنسجة العضل القلبية ومراقبة التحولات النسيجية بتلوينات HE. يتم استخدام تحليل التجربة المتقاطعة بشكل مباشر والتحليل التبايني لاختيار أفضل ظروف نمذجة فئران الأمراض القلبية الإقفارية الناتجة عن الانخفاض الشديد في الدمانين والهواء. نحتاج أيضًا إلى استخدام تقنيات البروتينوميات الكمية المتعلقة بالبيانات (DDA) لقياس الاختلافات في البروتينات بين أفضل مجموعة نموذجية والمجموعة الطبيعية للانسجة العضل القلبية وربط النتائج بالتحليل الإحصائي للمعلومات الحيوية لاستكشاف الآليات الحيوية المحتملة لنموذج فئران الأمراض القلبية الإقفارية. يظهر تحليل التجربة المتقاطعة أن لديها تأثير كبير على بناء النموذج الأمثل وهو: حقن ISO في البطن بمعدل 15 ملغ/كغ/يوم، لمدة 14 يومًا؛ في هذا الشرط وبالمقارنة مع المجموعة الطبيعية، فإنه يتم تقليل الوزن وكميات الطعام والماء التي تم شربها والقوة الاستقبالية ومسافة الحركة الكلية والسرعة المتوسطة وقيم EF و FS ومستويات NE في المصل وcGMP ومحتوى ATP في أنسجة العضل القلبية بشكل signiأشارت أني، وزمن الكسل ومحتوى cAMP وقيمة cAMP/cGMP ترتفع بشكل ملحوظ. نتائج تلوين HE تشير إلى الاضطراب الذي يحدث في ترتيب الخلايا في أنسجة العضل القلبية والتهاب الخلايا وانقسام ألياف العضل القلبية ونمو نسيج الألياف. تشير نتائج البروتينوميات إلى أن هناك 141 بروتين مختلف بين المجموعة النموذجية والمجموعة الطبيعية، منها 52 يتم رفعها و 89 يتم خفضها. إن إختزالية الجينات (GO) و T EG G لعرض الطرق المشبعة تشير إلى أن الجزء المضلل (CC) يتعلق بالميتوكندريا وغشاءها الداخلي، والعملية الحيوية (BP) تتعلق بتفعيل الكميم وتفعيل الصفائح الدموية وردود الفعل على اليونات المعدنية، والمسار الوظيفي قد يكون مرتبط دومًا بردود الفعل المتراكبة لتفعيل الكميم وتفعيل الصفائح الدموية ومختلف ردود الفعل على اليونات المعدنية ومسار إشارات أيض حمض البورفيرين. الحشد ISO 15 ملغ/كغ/يوم ذي الحقن المستمر لمدة 14 يومًا يمكن أن يبني نموذج فئران الأمراض القلبية الإقفارية المرتبط بانخفاض الدمانين والهواء، والآليات المتعلقة قد تكون مرتبطة بتنظيم السيتوكروم C3 و C5 و Cp بالمعادن، وإحداث تغييرات في الأنسجة العضل القلبية عن طريق تفعيل الكميم وتفعيل الصفائح الدمية والاستجابة إلى اليونات المعدنية وعمليات الدم.

关键词

orthogonal test;isoproterenol;Qi and Yin deficiency syndrome;ischemic heart disease;mouse model;proteomics

阅读全文